Indvirkning af Rituximab (RTx)-induktion og levende donation på immunregulering og viruskontrol ved nyretransplantation

Objektiv. Blodgruppeinkompatibel (ABOi) LD nyretransplantation repræsenterer en anerkendt behandlingsmodalitet i Tyskland. I denne indstilling giver etiske overvejelser mulighed for en detaljeret undersøgelse af kort- og langsigtede immunologiske og virologiske virkninger af Rtx-induktionsterapi, herunder sekventielle protokolbiopsier. I det foreslåede projekt vil vi udføre analyser på perifert blod, iliacale lymfeknuder og protokolbiopsier. Protokolbiopsier opnås rutinemæssigt 3 og 12 måneder efter transplantation ved universiteterne i Giessen og Freiburg. I dette prospektive, åbne pilotstudie vil immunologiske parametre for transplantatresultat og kontrol af polyomavirus, EBV- og CMV-replikation blive sammenlignet mellem RTx-behandlede ABOi LD-nyretransplantationsmodtagere (n=25-30, gruppe 1) og blodgruppekompatibel LD-nyre transplanterede uden Rtx-induktion (n=25-30, gruppe 2) men ellers sammenlignelig immunsuppressiv behandling (MPS og Tacr, skift til Tacr-MR (modificeret frigivelse) inden for 2 uger efter transplantation; opfølgning på 5 år). De samme analyser vil blive udført hos DD nyretransplanterede modtagere behandlet med Tacr (skift til Tacr-ME) og MPS (n=25-30, gruppe 3). Dette studiedesign gør det muligt at analysere virkningen af ​​levende donation på immunregulering og viruskontrol (gruppe 2 versus 3).

Baggrund. Der er voksende evidens for, at humorale mekanismer spiller en stor rolle i kronisk allograft dysfunktion, som viste sig at være signifikant forbundet med de-novo dannelse af donorspecifikke antistoffer mod humane leukocytantigener (HLA). Imidlertid synes B-celler ikke kun at virke i humorale reaktioner mod transplantatet, men kan spille en væsentlig rolle i T-cellemedierede antidonorreaktioner på grund af deres rolle som effektive antigenpræsenterende celler. Dette antydes yderligere af den kendsgerning, at Rtx er effektiv i primært T-celle-medierede sygdomme, såsom leddegigt eller multipel sklerose.

Hypotese/specifikke mål. Vi antager, at Rtx-induktion kan ændre immunregulering på kort og lang sigt efter nyretransplantation med potentiale til at forbedre langsigtet resultat. Graft-beskyttende virkninger af Rtx-induktion kan tilvejebringes af B-celle-udtømning og de resulterende virkninger på humorale såvel som T-celle-responser, og også af ændrede responser efter B-celle-repopulation. Mulige negative effekter af Rtx på polyomavirus og CMV kontrol samt beskyttende effekter på EBV replikation, de-novo monoklonal gammopati og regulering af lymfom vækstfaktorer (interleukin 6 og 10 (IL-6, IL-10)) vil blive analyseret. Endvidere kan B-celle-undergruppeanalyse i perifert blod og den sandsynligvis associerede indvirkning af Rtx på B-celle-udtømning i transplantatdrænende iliacale lymfeknuder gøre os i stand til at etablere en optimeret Rtx-dosis og derved tillade vellykket ABOi nyretransplantation uden de aktuelt observerede 15 % frafald .

Foreløbige resultater. Vi har udført kliniske undersøgelser, der viser den prædiktive kraft af immunparametre såsom regulatoriske anti-Fab autoantistoffer, sCD30, CD4 (cluster of differentiation 4) hjælperaktivitet og CD4 celle IL-4 (interleukin 4) og IL-10 (interleukin 10) svar på graftresultat. Den langsigtede effekt af Rtx-induktionsterapi og levende donation på disse parametre vil blive analyseret.

Tidligere fandt vi ud af, at patienter med risiko for polyomavirus nefropati kan blive genkendt tidligt efter transplantation ved sekventiel revers transkriptase polymerase kæde (rt-PCR) vurdering af polyomavirus replikation i urin. Sekventiel rt-PCR-testning af polyomavirusreplikation i urin og plasma vil blive brugt til at analysere effekter af Rtx-induktion på polyomaviruskontrol.

Foreslåede metoder. Immunparametre vil primært blive analyseret før transplantation, 3 måneder og 1, 2 og 5 år efter transplantation. Flowcytometri (herunder regulatoriske T-celler, B-celle-undergrupper, ekspression af cytokinreceptorer, costimulerende og adhæsionsmolekyler), mitogen-stimulerede allogene cokulturer, protein-A-plakassay (B-celleresponser, CD4-hjælperaktivitet), intracellulær cytokinanalyse af CD4+ og CD8+ (cluster of differentiation 8) T-celler, B-celler og monocytter, rt-PCR til virologiske undersøgelser (BKV, JCV, CMV, EBV) og immunfluorescerende farvning af iliacale lymfeknuder (opnået på tidspunktet for transplantation) og protokolbiopsier vil blive brugt . Donorspecifikke antistoffer vil blive påvist ved hjælp af lymfocytotoksicitet, HLA klasse I og II ELISA og Luminex assays. Donorspecificitet vil blive bekræftet ved T- og B-celle krydsparring med donorceller. Regulatoriske IgG (immunoglobulin G) og IgA (immunoglobulin A) anti-Fab autoantistoffer, neopterin og sCD30 vil blive vurderet ved ELISA.

Forventede resultater. Vi forventer, at Rtx-induktion vil vise en indvirkning på immunologiske parametre for graftresultat, såsom de-novo posttransplantation af antidonor HLA-antistofdannelse. Denne pilotundersøgelse kan muliggøre forbedret langsigtet nyretransplantatresultat hos modtagere med immunologiske risikoparametre i kraft af patienttilpasset immunsuppressiv terapi. Ved ABOi nyretransplantation kan denne undersøgelse forhindre de nuværende 15 % frafaldsrater ved at tillade en optimeret Rtx-dosis baseret på den tilsigtede dosisresponsanalyse (B-celleundergruppeanalyse i blod- og transplantatdrænende lymfeknuder). Ydermere vil denne undersøgelse muliggøre risikoestimering af Rtx-administration med hensyn til CMV- og polyomavirusreplikation og kan give ledetråde vedrørende beskyttelse mod EBV-replikation og posttransplantationslymfoproliferativ sygdom. Sidstnævnte punkt er af stor klinisk betydning hos patienter med en øget PTLD-risiko (posttransplantation lymfoproliferativ sygdom), såsom EBV-negative modtagere af EBV-positive transplantater.