Effekten av induksjon av rituximab (RTx) og levende donasjon på immunregulering og viruskontroll ved nyretransplantasjon

Objektiv. Blodgruppeinkompatibel (ABOi) LD nyretransplantasjon representerer en anerkjent behandlingsmodalitet i Tyskland. I denne innstillingen tillater etiske hensyn en detaljert studie av kort- og langsiktige immunologiske og virologiske effekter av Rtx-induksjonsterapi, inkludert sekvensielle protokollbiopsier. I det foreslåtte prosjektet vil vi utføre analyser på perifert blod, iliacale lymfeknuter og protokollbiopsier. Protokollbiopsier innhentes rutinemessig 3 og 12 måneder etter transplantasjon ved universitetene i Giessen og Freiburg. I denne prospektive, åpne pilotstudien vil immunologiske parametere for graftutfall og kontroll av polyomavirus, EBV og CMV-replikasjon bli sammenlignet mellom RTx-behandlede ABOi LD nyretransplanterte (n=25-30, gruppe 1) og blodgruppekompatibel LD nyre transplanterte uten Rtx-induksjon (n=25-30, gruppe 2) men ellers sammenlignbar immunsuppressiv behandling (MPS og Tacr, bytte til Tacr-MR (modifisert frigjøring) innen 2 uker etter transplantasjon; oppfølging på 5 år). De samme analysene vil bli gjort hos nyretransplanterte DD behandlet med Tacr (bytte til Tacr-ME) og MPS (n=25-30, gruppe 3). Denne studiedesignen gjør det mulig å analysere virkningen av levende donasjoner på immunregulering og viruskontroll (gruppe 2 versus 3).

Bakgrunn. Det er økende bevis for at humorale mekanismer spiller en viktig rolle i kronisk allograft dysfunksjon, som ble vist å være signifikant assosiert med de-novo dannelse av donorspesifikke antistoffer mot humane leukocyttantigener (HLA). Imidlertid ser det ut til at B-celler ikke bare virker i humorale responser mot transplantatet, men kan spille en betydelig rolle i T-cellemedierte antidonorresponser på grunn av deres rolle som effektive antigenpresenterende celler. Dette antydes videre av det faktum at Rtx er effektivt ved primært T-celle-medierte sykdommer som revmatoid artritt eller multippel sklerose.

Hypotese/spesifikke mål. Vi antar at Rtx-induksjon kan endre immunregulering på kort og lang sikt etter nyretransplantasjon med potensial til å forbedre langsiktig resultat. Podebeskyttende effekter av Rtx-induksjon kan gis av B-celleutarming og de resulterende effektene på humorale så vel som T-celleresponser, og også av endrede responser etter B-celle-repopulasjon. Mulige negative effekter av Rtx på polyomavirus og CMV-kontroll samt beskyttende effekter på EBV-replikasjon, de-novo monoklonal gammopati og regulering av lymfomvekstfaktorer (interleukin 6 og 10 (IL-6, IL-10)) vil bli analysert. Videre kan B-celle-undergruppeanalyse i perifert blod og den sannsynligvis assosierte innvirkningen av Rtx på B-celleutarming i transplantatdrenerende iliacalymfeknuter gjøre oss i stand til å etablere en optimalisert Rtx-dose og dermed tillate vellykket ABOi-nyretransplantasjon uten de nå observerte 15 % frafallene. .

Foreløpige resultater. Vi har utført kliniske studier som viser den prediktive kraften til immunparametre som regulatoriske anti-Fab autoantistoffer, sCD30, CD4 (cluster of differentiation 4) hjelperaktivitet og CD4 celle IL-4 (interleukin 4) og IL-10 (interleukin 10) svar på graftresultat. Langtidseffekten av Rtx induksjonsterapi og levende donasjon på disse parameterne vil bli analysert.

Tidligere fant vi at pasienter med risiko for polyomavirusnefropati kan bli gjenkjent tidlig etter transplantasjon ved sekvensiell revers transkriptase-polymerasekjede (rt-PCR) vurdering av polyomavirusreplikasjon i urin. Sekvensiell rt-PCR-testing av polyomavirusreplikasjon i urin og plasma vil bli brukt for å analysere effekter av Rtx-induksjon på polyomaviruskontroll.

Foreslåtte metoder. Immunparametre vil bli analysert hovedsakelig før transplantasjon, 3 måneder og 1, 2 og 5 år etter transplantasjon. Flowcytometri (inkludert regulatoriske T-celler, B-celleundergrupper, ekspresjon av cytokinreseptorer, costimulerende og adhesjonsmolekyler), mitogenstimulerte allogene kokulturer, protein-A plakkanalyse (B-celleresponser, CD4-hjelperaktivitet), intracellulær cytokinanalyse av CD4+ og CD8+ (cluster of differentiation 8) T-celler, B-celler og monocytter, rt-PCR for virologiske studier (BKV, JCV, CMV, EBV) og immunfluorescerende farging av iliacale lymfeknuter (oppnådd ved transplantasjonstidspunktet) og protokollbiopsier vil bli brukt . Donorspesifikke antistoffer vil bli påvist ved hjelp av lymfocytotoksisitet, HLA klasse I og II ELISA og Luminex analyser. Donorspesifisitet vil bli bekreftet ved T- og B-cellekryssmatching med donorceller. Regulatoriske IgG (immunoglobulin G) og IgA (immunoglobulin A) anti-Fab autoantistoffer, neopterin og sCD30 vil bli vurdert ved ELISA.

Forventede resultater. Vi forventer at Rtx-induksjon vil vise en innvirkning på immunologiske parametere for graftresultat, slik som de-novo posttransplantasjons-antidonor-HLA-antistoffdannelse. Denne pilotstudien kan tillate forbedret langsiktig nyretransplantatresultat hos mottakere med immunologiske risikoparametere i kraft av pasienttilpasset immunsuppressiv terapi. Ved ABOi nyretransplantasjon kan denne studien forhindre de nåværende 15 % frafallsratene ved å tillate en optimalisert Rtx-dosering basert på den tiltenkte doseresponsanalysen (analyse av B-celler i blod- og transplantatdrenerende lymfeknuter). Videre vil denne studien tillate risikoestimering av Rtx-administrasjon med hensyn til CMV- og polyomavirusreplikasjon, og kan gi ledetråder angående beskyttelse mot EBV-replikasjon og posttransplantasjonslymfoproliferativ sykdom. Det siste punktet er av stor klinisk betydning hos pasienter med en forsterket PTLD-risiko (posttransplantasjon lymfoproliferativ sykdom), slik som EBV-negative mottakere av EBV-positive grafts.