Rituximab(RTx) 유도 및 생체 기증이 신장 이식에서 면역 조절 및 바이러스 제어에 미치는 영향

목적. 혈액형 부적합(ABOi) LD 신장 이식은 독일에서 인정된 치료 방식을 나타냅니다. 이 설정에서 윤리적 고려 사항은 순차적 프로토콜 생검을 포함하여 Rtx 유도 요법의 단기 및 장기 면역학적 및 바이러스학적 효과에 대한 자세한 연구를 허용합니다. 제안된 프로젝트에서 우리는 말초 혈액, 장골 림프절 및 프로토콜 생검에 대한 분석을 수행할 것입니다. 프로토콜 생검은 기센 대학과 프라이부르크 대학에서 이식 후 3개월 및 12개월에 일상적으로 얻습니다. 이 전향적 공개 파일럿 연구에서는 RTx 처리된 ABOi LD 신장 이식 수용자(n=25-30, 그룹 1)와 혈액형 호환 LD 신장 이식편 결과 및 폴리오마바이러스 제어의 면역학적 매개변수, EBV 및 CMV 복제를 비교합니다. Rtx 유도가 없는 이식 수혜자(n=25-30, 그룹 2) 그러나 달리 유사한 면역억제 치료(MPS 및 Tacr, 이식 후 2주 이내에 Tacr-MR(수정 방출)로 전환; 5년 추적). 동일한 분석이 Tacr(Tacr-ME로 전환) 및 MPS(n=25-30, 그룹 3)로 치료된 DD 신장 이식 수용자에서 수행될 것이다. 이 연구 설계를 통해 생체 기증이 면역 조절 및 바이러스 제어에 미치는 영향을 분석할 수 있습니다(그룹 2 대 3).

배경. 체액 메커니즘이 인간 백혈구 항원(HLA)에 대한 공여자 특이적 항체의 드노보 형성과 유의미하게 연관되는 것으로 나타난 만성 동종이식 기능 장애에서 중요한 역할을 한다는 증거가 증가하고 있습니다. 그러나 B 세포는 이식편에 대한 체액성 반응뿐만 아니라 효과적인 항원 제시 세포로서의 역할로 인해 T 세포 매개 항도너 반응에서 중요한 역할을 할 수 있습니다. 이는 Rtx가 류마티스 관절염 또는 다발성 경화증과 같은 주로 T 세포 매개 질병에 효과적이라는 사실에 의해 추가로 제안됩니다.

가설/특정 목표. 우리는 Rtx 유도가 장기 결과를 개선할 가능성이 있는 신장 이식 후 단기 및 장기 면역 조절을 변경할 수 있다는 가설을 세웁니다. Rtx 유도의 이식편 보호 효과는 B 세포 고갈 및 T 세포 반응뿐만 아니라 체액성 반응에 대한 결과적인 효과 및 B 세포 재증식 후 변경된 반응에 의해 제공될 수 있습니다. 폴리오마바이러스 및 CMV 제어에 대한 Rtx의 가능한 부정적인 영향뿐만 아니라 EBV 복제에 대한 보호 효과, de-novo 단클론 감마병증 및 림프종 성장 인자(인터루킨 6 및 10(IL-6, IL-10))의 조절을 분석할 것입니다. 또한, 말초 혈액의 B 세포 하위 집합 분석 및 이식편 배액 장골 림프절에서 B 세포 고갈에 대한 Rtx의 관련 영향은 최적화된 Rtx 용량을 설정하여 현재 관찰된 15% 드롭아웃 없이 성공적인 ABOi 신장 이식을 가능하게 할 수 있습니다. .

예비 결과. 규제 항-Fab 자가항체, sCD30, CD4(분화 클러스터 4) 도우미 활동, CD4 세포 IL-4(인터루킨 4) 및 IL-10(인터루킨 10)과 같은 면역 매개변수의 예측력을 보여주는 임상 연구를 수행했습니다. 이식 결과에 대한 반응. 이러한 매개변수에 대한 Rtx 유도 요법 및 생체 기증의 장기 효과를 분석할 것입니다.

이전에 우리는 폴리오마바이러스 신병증의 위험이 있는 환자가 소변에서 폴리오마바이러스 복제의 순차 역전사 중합효소 사슬(rt-PCR) 평가에 의해 이식 후 초기에 인식될 수 있음을 발견했습니다. 소변 및 혈장에서 폴리오마바이러스 복제의 순차적 rt-PCR 테스트는 폴리오마바이러스 제어에 대한 Rtx 유도의 효과를 분석하는 데 사용됩니다.

제안된 방법. 면역 매개변수는 주로 이식 전, 이식 3개월 및 이식 후 1년, 2년 및 5년에 분석됩니다. 유세포분석(조절 T 세포, B 세포 하위 집합, 사이토카인 수용체 발현, 공동자극 및 부착 분자 포함), 미토겐 자극 동종이계 공동 배양, 단백질 A 플라크 분석(B 세포 반응, CD4 헬퍼 활성), CD4+의 세포내 사이토카인 분석 및 CD8+(분화군 8) T 세포, B 세포 및 단핵구, 바이러스 연구용 rt-PCR(BKV, JCV, CMV, EBV) 및 장골 림프절의 면역형광 염색(이식 시 획득) 및 프로토콜 생검이 사용됩니다. . 기증자 특정 항체는 림프세포독성, HLA 클래스 I 및 II ELISA 및 Luminex 분석을 사용하여 검출됩니다. 기증자 특이성은 기증자 세포와의 T 및 B 세포 교차 일치에 의해 확인됩니다. 조절 IgG(면역글로불린 G) 및 IgA(면역글로불린 A) 항-Fab 자가항체, 네오프테린 및 sCD30은 ELISA에 의해 평가될 것입니다.

예상 결과. 우리는 Rtx 유도가 de-novo posttransplant antidonor HLA 항체 형성과 같은 이식 결과의 면역학적 매개변수에 영향을 미칠 것으로 기대합니다. 이 파일럿 연구는 환자 맞춤형 면역억제 요법 덕분에 면역학적 위험 매개변수가 있는 수용자의 장기 신장 이식 결과를 개선할 수 있습니다. ABOi 신장 이식에서 이 연구는 의도된 용량 반응 분석(혈액 및 이식편 배액 림프절에서 B 세포 하위 집합 분석)을 기반으로 최적화된 Rtx 용량을 허용함으로써 현재 15% 탈락률을 방지할 수 있습니다. 또한, 이 연구는 CMV 및 폴리오마바이러스 복제와 관련하여 Rtx 투여의 위험 평가를 허용하고 EBV 복제 및 이식 후 림프증식성 질환에 대한 보호에 관한 단서를 제공할 수 있습니다. 후자의 요점은 EBV 양성 이식편의 EBV 음성 수용자와 같은 PTLD(이식 후 림프증식성 질환) 위험이 증가된 환자에서 임상적으로 매우 중요합니다.