A rituximab (RTx) indukció és az élődonáció hatása a vesetranszplantáció immunregulációjára és víruskontrolljára

Célkitűzés. A vércsoport-inkompatibilis (ABOi) LD vesetranszplantáció elismert kezelési mód Németországban. Ebben a környezetben az etikai megfontolások lehetővé teszik az Rtx-indukciós terápia rövid és hosszú távú immunológiai és virológiai hatásainak részletes tanulmányozását, beleértve a szekvenciális protokoll biopsziákat. A tervezett projektben perifériás vér, csípőnyirokcsomók és protokoll biopsziák elemzését végezzük. A giesseni és a freiburgi egyetemen a transzplantáció után 3 és 12 hónappal rutinszerűen protokollbiopsziát vesznek. Ebben a prospektív, nyílt kísérleti vizsgálatban a graft kimenetelének és a poliomavírus, EBV és CMV replikáció kontrolljának immunológiai paramétereit hasonlítják össze RTx-kezelt ABOi LD vesetranszplantált recipiensek (n=25-30, 1. csoport) és vércsoport-kompatibilis LD vese között. Rtx-indukcióval nem rendelkező transzplantációs recipiensek (n=25-30, 2. csoport), de egyébként összehasonlítható immunszuppresszív kezelés (MPS és Tacr, váltás Tacr-MR-re (módosított felszabadulás) a transzplantációt követő 2 héten belül; 5 éves követés). Ugyanezt az elemzést fogják elvégezni Tacr-rel (váltás Tacr-ME-re) és MPS-sel (n=25-30, 3. csoport) kezelt DD vesetranszplantált recipienseken. Ez a vizsgálati terv lehetővé teszi az élő adományozás hatásának elemzését az immunregulációra és a víruskontrollra (2-es és 3-as csoport).

Háttér. Egyre több bizonyíték van arra vonatkozóan, hogy a humorális mechanizmusok nagy szerepet játszanak a krónikus allograft diszfunkcióban, amelyről kimutatták, hogy szignifikánsan összefügg a humán leukocita antigének (HLA) elleni donor-specifikus antitestek de novo képződésével. Úgy tűnik azonban, hogy a B-sejtek nem csak a graft elleni humorális válaszokban hatnak, hanem jelentős szerepet játszhatnak a T-sejt által közvetített antidonor válaszokban, mivel hatékony antigénprezentáló sejtek. Ezt az a tény is sugallja, hogy az Rtx elsősorban T-sejtek által közvetített betegségekben hatékony, mint például a rheumatoid arthritis vagy a sclerosis multiplex.

Hipotézis/specifikus célok. Feltételezzük, hogy az Rtx indukció megváltoztathatja az immunregulációt rövid és hosszú távon a vesetranszplantáció után, ami javíthatja a hosszú távú eredményt. Az Rtx-indukció graftvédő hatását a B-sejtek kimerülése és az ebből eredő humorális, valamint T-sejtes válaszokra gyakorolt ​​hatások, valamint a B-sejt-repopuláció utáni megváltozott válaszok biztosíthatják. Elemezni fogják az Rtx lehetséges negatív hatásait a poliomavírusra és a CMV-kontrollra, valamint az EBV-replikációra, a de-novo monoklonális gammopathiára és a limfóma növekedési faktorok (interleukinek 6 és 10 (IL-6, IL-10)) szabályozására gyakorolt ​​​​védő hatásokat. Ezenkívül a perifériás vérben végzett B-sejt-alcsoport elemzése és az Rtx valószínűleg kapcsolódó hatása a B-sejt-fogyásra a graft-elvezető csípőnyirokcsomókban lehetővé teheti az optimalizált Rtx-dózis meghatározását, és ezáltal lehetővé teszi a sikeres ABOi veseátültetést a jelenleg megfigyelt 15%-os kiesés nélkül. .

Előzetes eredmények. Klinikai vizsgálatokat végeztünk, amelyek kimutatták az immunparaméterek, például a szabályozó anti-Fab autoantitestek, az sCD30, a CD4 (4-es differenciálódási klaszter) helper aktivitás és a CD4 sejt IL-4 (interleukin 4) és IL-10 (interleukin 10) előrejelző erejét. válaszok a graft eredményére. Elemezzük az Rtx indukciós terápia és az élődonáció hosszú távú hatását ezekre a paraméterekre.

Korábban azt találtuk, hogy a poliomavírus nefropátia kockázatának kitett betegek a transzplantáció korai szakaszában felismerhetők a poliomavírus vizeletben történő replikációjának szekvenciális reverz transzkriptáz polimeráz lánc (rt-PCR) vizsgálatával. A poliomavírus vizeletben és plazmában történő replikációjának szekvenciális rt-PCR vizsgálatát fogják használni az Rtx indukció poliomavírus kontrollra gyakorolt ​​hatásának elemzésére.

Javasolt módszerek. Az immunparamétereket főként a transzplantáció előtt, 3 hónappal és 1, 2 és 5 évvel a transzplantáció után elemezzük. Áramlási citometria (beleértve a szabályozó T-sejteket, B-sejt alcsoportokat, citokinreceptorok expresszióját, kostimuláló és adhéziós molekulákat), mitogén-stimulált allogén kokultúrák, protein-A plakk vizsgálat (B-sejtes válaszok, CD4 helper aktivitás), CD4+ intracelluláris citokin elemzése és CD8+ (8-as differenciálódási klaszter) T-sejteket, B-sejteket és monocitákat, rt-PCR-t a virológiai vizsgálatokhoz (BKV, JCV, CMV, EBV), valamint a csípőnyirokcsomók immunfluoreszcens festését (átültetéskor kapjuk) és protokoll biopsziákat használunk. . A donor-specifikus antitestek kimutatása limfocitotoxicitás, HLA I. és II. osztályú ELISA és Luminex vizsgálatok segítségével történik. A donor-specifitást a T- és B-sejtek donorsejtekkel való keresztezése igazolja. A szabályozó IgG (immunglobulin G) és IgA (immunglobulin A) anti-Fab autoantitesteket, a neopterint és az sCD30-at ELISA-val értékeljük.

Várható eredmények. Arra számítunk, hogy az Rtx indukció hatással lesz a graft kimenetelének immunológiai paramétereire, például a de-novo transzplantáció utáni antidonor HLA antitest képződésére. Ez a kísérleti tanulmány jobb hosszú távú veseátültetési eredményt tehet lehetővé immunológiai kockázati paraméterekkel rendelkező recipienseknél a páciensre szabott immunszuppresszív terápia révén. Az ABOi vesetranszplantációban ez a vizsgálat megakadályozhatja a jelenlegi 15%-os lemorzsolódási arányt azáltal, hogy lehetővé teszi az optimalizált Rtx-dózist a tervezett dózis-válasz elemzés alapján (B-sejt alcsoport elemzése vérben és graft-elvezető nyirokcsomókban). Ezenkívül ez a tanulmány lehetővé teszi az Rtx beadás kockázatának becslését a CMV és a poliomavírus replikációja tekintetében, és támpontokat adhat az EBV replikációja és a transzplantáció utáni limfoproliferatív betegség elleni védelemhez. Ez utóbbi pont nagy klinikai jelentőséggel bír azoknál a betegeknél, akiknél fokozott a PTLD (poszttranszplantációs limfoproliferatív betegség) kockázata, mint például az EBV-pozitív graftok EBV-negatív recipiensei.