Impacto de la inducción con rituximab (RTx) y la donación en vida sobre la inmunorregulación y el control del virus en el trasplante renal

Objetivo. El trasplante renal de LD incompatible con el grupo sanguíneo (ABOi) representa una modalidad de tratamiento reconocida en Alemania. En este contexto, las consideraciones éticas permiten un estudio detallado de los efectos inmunológicos y virológicos a corto y largo plazo de la terapia de inducción de Rtx, incluidas las biopsias de protocolo secuencial. En el proyecto propuesto realizaremos análisis de sangre periférica, ganglios linfáticos ilíacos y biopsias de protocolo. Las biopsias de protocolo se obtienen de forma rutinaria 3 y 12 meses después del trasplante en las Universidades de Giessen y Freiburg. En este estudio piloto abierto y prospectivo, los parámetros inmunológicos del resultado del injerto y el control de la replicación del poliomavirus, EBV y CMV se compararán entre los receptores de trasplante renal ABOi LD tratados con RTx (n = 25-30, grupo 1) y los receptores renales LD compatibles con el grupo sanguíneo. receptores de trasplante sin inducción de Rtx (n = 25-30, grupo 2) pero por lo demás tratamiento inmunosupresor comparable (MPS y Tacr, cambio a Tacr-MR (liberación modificada) dentro de las 2 semanas posteriores al trasplante; seguimiento de 5 años). Los mismos análisis se realizarán en los receptores de trasplante renal DD tratados con Tacr (cambio a Tacr-ME) y MPS (n = 25-30, grupo 3). Este diseño de estudio permite analizar el impacto de la donación en vida sobre la inmunorregulación y el control del virus (grupos 2 versus 3).

Fondo. Cada vez hay más pruebas de que los mecanismos humorales desempeñan un papel importante en la disfunción crónica del aloinjerto, que se demostró que está significativamente asociada con la formación de novo de anticuerpos específicos del donante contra los antígenos leucocitarios humanos (HLA). Sin embargo, las células B parecen actuar no solo en las respuestas humorales contra el injerto, sino que también pueden desempeñar un papel importante en las respuestas antidonante mediadas por células T debido a su papel como células presentadoras de antígeno eficaces. Esto se sugiere además por el hecho de que Rtx es eficaz principalmente en enfermedades mediadas por células T, como la artritis reumatoide o la esclerosis múltiple.

Hipótesis/objetivos específicos. Presumimos que la inducción de Rtx puede alterar la inmunorregulación a corto y largo plazo después del trasplante renal con el potencial de mejorar el resultado a largo plazo. Los efectos protectores del injerto de la inducción de Rtx pueden ser proporcionados por el agotamiento de las células B y los efectos resultantes en las respuestas humorales y de células T, y también por respuestas alteradas después de la repoblación de células B. Se analizarán los posibles efectos negativos de Rtx en el control de poliomavirus y CMV, así como los efectos protectores en la replicación de EBV, la gammapatía monoclonal de novo y la regulación de los factores de crecimiento del linfoma (interleucinas 6 y 10 (IL-6, IL-10)). Además, el análisis de subconjuntos de células B en sangre periférica y el impacto probablemente asociado de Rtx en el agotamiento de células B en los ganglios linfáticos ilíacos que drenan el injerto pueden permitirnos establecer una dosis de Rtx optimizada y, por lo tanto, permitir un trasplante renal ABOi exitoso sin el 15% de abandonos actualmente observado. .

Resultados preliminares. Hemos realizado estudios clínicos que muestran el poder predictivo de parámetros inmunitarios como los autoanticuerpos reguladores anti-Fab, sCD30, CD4 (grupo de diferenciación 4) actividad auxiliar y células CD4 IL-4 (interleucina 4) e IL-10 (interleucina 10) respuestas sobre el resultado del injerto. Se analizará el efecto a largo plazo de la terapia de inducción de Rtx y de la donación de vivo sobre estos parámetros.

Anteriormente, descubrimos que los pacientes con riesgo de nefropatía por poliomavirus pueden reconocerse temprano después del trasplante mediante la evaluación secuencial de la cadena de polimerasa con transcriptasa inversa (rt-PCR) de la replicación del poliomavirus en la orina. Se utilizarán pruebas secuenciales de rt-PCR de replicación de poliomavirus en orina y plasma para analizar los efectos de la inducción de Rtx en el control de poliomavirus.

Métodos propuestos. Se analizarán parámetros inmunológicos principalmente pretrasplante, 3 meses y 1, 2 y 5 años postrasplante. Citometría de flujo (incluidas células T reguladoras, subconjuntos de células B, expresión de receptores de citocinas, moléculas coestimuladoras y de adhesión), cocultivos alogénicos estimulados por mitógenos, ensayo de placa de proteína A (respuestas de células B, actividad auxiliar de CD4), análisis de citocinas intracelulares de CD4+ y Se utilizarán células T, células B y monocitos CD8+ (grupo de diferenciación 8), rt-PCR para estudios virológicos (BKV, JCV, CMV, EBV) y tinción inmunofluorescente de ganglios linfáticos ilíacos (obtenidos en el momento del trasplante) y biopsias de protocolo. . Los anticuerpos específicos del donante se detectarán utilizando ensayos de linfocitotoxicidad, HLA clase I y II ELISA y Luminex. La especificidad del donante se confirmará mediante pruebas cruzadas de células T y B con células del donante. Los autoanticuerpos reguladores IgG (inmunoglobulina G) e IgA (inmunoglobulina A) anti-Fab, neopterina y sCD30 se evaluarán mediante ELISA.

Resultados previstos. Esperamos que la inducción de Rtx muestre un impacto en los parámetros inmunológicos del resultado del injerto, como la formación de anticuerpos anti-HLA postrasplante de novo. Este estudio piloto puede permitir mejorar el resultado del injerto renal a largo plazo en receptores con parámetros de riesgo inmunológico en virtud de la terapia inmunosupresora adaptada al paciente. En el trasplante renal ABOi, este estudio puede evitar las tasas actuales de abandono del 15 % al permitir una dosificación de Rtx optimizada basada en el análisis de respuesta a la dosis previsto (análisis de subconjuntos de células B en sangre y ganglios linfáticos de drenaje del injerto). Además, este estudio permitirá estimar el riesgo de la administración de Rtx con respecto a la replicación de CMV y poliomavirus, y puede proporcionar pistas sobre la protección contra la replicación de EBV y la enfermedad linfoproliferativa posterior al trasplante. Este último punto es de gran importancia clínica en pacientes con un mayor riesgo de PTLD (enfermedad linfoproliferativa postrasplante), como los receptores negativos para EBV de injertos positivos para EBV.