功能性消化不良儿童的促肾上腺皮质激素释放激素 (CRH) 反应

本研究的主要目的是评估与对照组相比，患有 FD（功能性消化不良）的儿童和青少年的 CRH（促肾上腺皮质激素释放激素）反应性是否存在差异。 此外，我们打算探索 CRH 反应性、炎性细胞因子、状态和特质焦虑以及自我报告的症状之间的关系。

研究的具体目标是：

1. 确定 FD 患者和对照组在 CRH 输注后血清细胞因子谱、心率变异性、压力谱参数、状态和特质焦虑以及自我报告症状的变化是否不同。
2. 确定 CRH 输注后血清 ACTH（促肾上腺皮质激素）或皮质醇的变化在 FD 患者和对照组之间是否不同，或者作为 FD 患者状态或特质焦虑程度的函数。

本研究是单中心试点研究。

将通过计算本文详述的每种细胞因子、介质和激素的形成率、最大浓度 (Cmax)、达到最大浓度的时间 (Tmax)、全身暴露 (AUC) 和恢复率来探索对 CRH 刺激的生化反应（相关）。 药代动力学分析将应用于浓度与时间曲线上有明显上升和下降阶段的数据。 浓度与时间数据将使用剥离算法进行曲线拟合以生成初始多指数参数估计值。 表观恢复率的最终估计值将由迭代的非线性加权最小二乘回归算法确定。 将使用标准标准（例如，Akaike 和 Schwartz 信息标准、目标函数和估计参数的变异系数）、加权残差估计的分布以及观察和预测之间的关联来评估药代动力学模型的拟合优度浓度。 将使用标准（即统计矩理论）技术计算与模型无关的药代动力学参数。 将通过检查观察到的血浆浓度与时间数据来估计个体的 Cmax 和 Tmax。 血浆浓度与时间曲线下的面积将使用混合对数线性梯形法则确定（不会将 AUC 外推到无穷大）。 这些分析将在 Kinetica v5.0（ThermoElectron，Philadelphia，PA）中进行。 将使用双侧独立样本 t 检验比较病例和对照之间对连续响应变量的差异。 连续响应变量之间的关系将通过单变量方差分析、线性和非线性回归技术进行评估。 分类患者因素和响应变量将与 Fisher 在 2 x 2 交叉表上的精确检验进行比较。 所有统计分析将使用 SSPS 软件包（版本 15.0，SPSS Inc.，Chicago，IL）进行。

样本量

选择每组（对照组和 FD 患者）的样本量为 12。 每组 12 名患者提供 99% 的能力检测 FD 患者的 ACTH 分泌与对照组相比增加 1.5 倍，根据之前的 2 项成人研究假设标准偏差为 20%（两者都检测到大约增加 2 倍). 二次分析的功效可能较低，但是，鉴于本研究的试点性质，这被认为是可以接受的。

将有两组受试者在腹痛门诊就诊，腹痛至少持续 8 周，并且符合基于症状的 FD 标准，并安排进行内窥镜检查，而对照组则没有近期腹痛病史.

两组都将接受相同的测试/程序。

参与者将在评估前至少禁食 8 小时，评估将在上午 8 点到 10 点之间开始。 年龄大于 10 岁的女性参与者将在接受任何药物治疗之前接受 UCG 作为标准做法。 父母和孩子将完成 BASC-2 和 STICSA-C 的状态和特征版本。 将进行生物反馈压力分析。 接下来，将放置 IV 导管，并允许参与者在下一部分研究之前放松 30 分钟。 然后，参与者将在 CRH 刺激测试之前接受 30 分钟的心率基线监测。 在 30 分钟的基线期之后，将获取血样用于血清细胞因子、ACTH、皮质醇和 CBG。 参与者将分别在 10 分制上对腹痛、恶心和腹胀的严重程度进行评分。

对于 CRH 刺激试验，皮质醇（人类 CRH 的类似物）将以每公斤体重 1 微克（最大 100 微克）的剂量给药，给药时间超过 1 分钟。 每隔 15 分钟采集一次血样，持续 60 分钟，用于测定 ACTH、皮质醇和 CBG 的浓度。 在 15、30 和 60 分钟时将获取或记录以下内容：细胞因子浓度的血样、腹痛、恶心和腹胀的评分（10 分制）、压力概况参数和自我报告的焦虑状态（IE。 STICSA-C 你此刻的心情）。 将在 60 分钟的时间内进行心率监测。

CRH 刺激试验是内分泌中常规使用的诊断试验。 然而，对于本研究中的两组参与者而言，这都不是例行公事。

措施

1. 心率变异性 (HRV)

   使用 I-330 C2 生理描记器（J & J Engineering，Poulsbo，WA）和 Window USE Physiolab 软件记录心电图并评估 HRV。 MC-5SGW 电极电缆将用于连接到 2 个手腕电极（左侧的 +）和将放置在手指上的 EDR 接地。

   HRV 信号将从 ECG 数据中导出。 整体功率谱分析将应用于 HRV 信号以提取交感迷走神经参数：低频功率 (LF) 和高频功率 (HF)。 LF定义为0.04-0.15频率范围内曲线下的面积 Hz和HF定义为0.15-0.50频率范围内曲线下的面积 赫兹。 LF 波段 (0.04-0.15 Hz) 中的功率主要代表交感神经活动，HRV 功率谱的 HF 波段 (0.15-0.5 Hz) 中的功率代表纯粹的副交感神经或迷走神经活动。 LF-to-HF 比率也将计算为交感迷走神经平衡的量度。

2. 压力概况

   生物反馈应激曲线读数将使用 Windows USE 3 Physiolab 软件用单个 I-330 C2 生理记录仪（J & J Engineering，Poulsbo，WA）记录。

   将对所有患者进行以下监测：

   1. 表面肌电图 (sEMG) - 将使用额肌上的宽带放置以微伏 (mcv) 为单位测量读数；在标准皮肤准备后，预胶化银/氯化银红点贴片传感器将放置在每个眉毛上方一个手指的宽度，并通过 CL 50 鳄鱼夹连接到 MV-1L sEMG 电缆。 sEMG 传感器也将放置在双腕的脉搏点上，以监测和反馈心跳。
   2. 周边皮肤温度 (TEMP) - 将通过连接到参与者惯用手的中指（或替代的第 3 指）垫上的热敏电阻（RV-5 TEMP/EDR 传感器）以华氏度 (F.) 为单位进行测量。
   3. 皮肤电反应 (EDR) - 皮肤电导活动 (SCA) 将通过（RV-5 TEMP/EDR 传感器）通过 SE 35 EDG 8 毫米按扣式银/氯化银圆盘连接到主食指，以微欧 (µohm) 为单位进行测量嵌入 Velcro 紧固件中，圆盘上带有基于盐水的凝胶，以确保与皮肤接触。

3. 血浆蛋白（细胞因子/介质/激素）

   将通过 IV 导管收集约 39 mL 血液用于血浆蛋白测定，包括 TNF-α、IL-4、IL-5、IL-8、eotaxin-3、MCP-1、MMP-9、ECP、MBP、皮质醇、ACTH 和 CBG。 血浆蛋白将通过市售的免疫测定试剂盒进行测量。 表 1 显示了每个时间点将收集的血液量的细目分类。 表 2 列出了样品要求和测试实验室。

4. 游离血浆皮质醇

   将使用以下公式计算游离血浆皮质醇：

   U = √ Z2 + 0.0122 C - Z（平均值）M 其中 U = 未结合皮质醇的摩尔浓度，C = 总皮质醇的摩尔浓度，T = CBG 的摩尔浓度，Z = 0.0167 + 0.182 (T-C)（平均值）M

   （0.0167 和 0.182 分别是 37 摄氏度时 CBG 对皮质醇的亲和力常数以及结合白蛋白与未结合皮质醇的比例。）

5. BASC-2 简介 父母和儿童版本的儿童行为评估量表 - 第二版 (BASC-2) 将分别由参与者和一位家长完成。 BASC-2 是一种客观的青少年心理功能评级系统，提供对问题和能力的标准化描述。 有针对儿童（8-11 岁）、青少年（12-18 岁）和父母（针对 6-11 岁和 12 -18 岁儿童的不同版本）的不同版本。 (36) 基于根据美国人口普查数据分层的 3,483 名 4 - 18 岁儿童的规范样本，原始分数被标准化为 T 分数（M=50，SD=10）。 除了 BASC-PRS 上的非典型性子量表和 BASC-SRS 上的躯体化和自力更生子量表 (r< .70) 之外，各个分量表具有良好的可靠性（内部一致性）。 BASC 还证明了标准相关效度和结构效度。 焦虑分量表（父母和自我报告）的 T 分数将用作分析特质焦虑的量度。

6. STICSA-C型

   认知和躯体焦虑的状态特质清单，儿童版 (STICSA-C) 改编自该措施的成人版 STICSA。 (37) STICSA-C 由两个独立的自我报告量表组成，每个量表有 21 个项目，用于测量两个不同的焦虑概念：状态焦虑和特质焦虑。 后者一般要求孩子们通过表明他们的感受来回应物品；前者要求孩子们就此时此刻的感受做出回应。 STICSA-C 的独特之处在于，每个量表上的项目都可以清楚而稳定地评估焦虑的认知和躯体表现。 要求儿童使用 4 点量表（即，在特征表上从“从不”到“几乎总是”，在状态表上从“一点也不”到“非常多”）提供他们的回答。 在统计分析中，STICSA-C 特质量表的躯体和认知分量表将用作特质焦虑的量度，而状态量表的这些分量表将用作状态焦虑的量度。

7. 胃肠道症状严重程度

   疼痛、恶心和腹胀的症状严重程度将分别在 10 点量表上确定，其中 0 = 无和 10 = 最严重与全球反应量表。

8. 组织学

对于那些接受内窥镜检查的人，作为常规护理的一部分获得的常规活检将以盲法评估嗜酸性粒细胞密度。 将利用抗类胰蛋白酶和抗 CD4 对组织进行免疫组织化学评估。 嗜酸性粒细胞、类胰蛋白酶阳性细胞和 CD4 阳性细胞的细胞密度将分别针对来自胃窦和十二指肠球部的标本进行测定。 至少五个高倍视野将分别通过平均和峰值细胞计数的测定来评估。 病理诊断将由病理学家评估确定，作为常规护理的一部分。