Reactiviteit van corticotropine-afgevend hormoon (CRH) bij kinderen met functionele dyspepsie

Het primaire doel van deze studie is om te evalueren of er verschillen zijn in CRH (Corticotropin Releasing Hormone) responsiviteit bij kinderen en adolescenten met FD (Functionele Dyspepsie) in vergelijking met controles. Verder zijn we van plan relaties te onderzoeken tussen CRH-responsiviteit, inflammatoire cytokines, toestands- en trekangst en zelfgerapporteerde symptomen.

De specifieke doelstellingen van de studie zijn:

1. Om te bepalen of veranderingen in serumcytokineprofielen, hartslagvariabiliteit, stressprofielparameters, toestands- en trekangst en zelfgerapporteerde symptomen verschillen tussen patiënten met FD en controles na CRH-infusie.
2. Om te bepalen of veranderingen in serum ACTH (adreno-corticotroop hormoon) of cortisol na CRH-infusie verschillen tussen patiënten met FD en controles of als een functie van de omvang van de toestand of angst voor kenmerken bij FD-patiënten.

Deze studie is een pilotstudie op één locatie.

Biochemische respons op CRH-stimulatie zal worden onderzocht voor elk van de hierin beschreven cytokines, mediatoren en hormonen door hun vormingssnelheid, maximale concentratie (Cmax), tijd tot maximale concentratie (Tmax), totale lichaamsblootstelling (AUC) en herstelsnelheid te berekenen. (indien van toepassing). Farmacokinetische analyses zullen worden toegepast op gegevens waar er duidelijke stijgende en dalende fasen zijn in het concentratie-versus-tijdprofiel. Concentratie-versus-tijdgegevens zullen curve-fit zijn met behulp van een peeling-algoritme om initiële polyexponentiële parameterschattingen te genereren. Definitieve schattingen van de schijnbare herstelsnelheid zullen worden bepaald op basis van een iteratief, niet-lineair gewogen kleinste-kwadratenregressie-algoritme. Beoordeling van geschiktheid voor het farmacokinetische model zal worden uitgevoerd met behulp van standaardcriteria (bijv. Akaike en Schwartz informatiecriteria, objectieve functie en de variatiecoëfficiënten voor geschatte parameters), de verdeling van gewogen resterende schattingen en de associatie tussen de waargenomen en voorspelde concentraties. Modelonafhankelijke farmacokinetische parameters zullen worden berekend met behulp van standaardtechnieken (d.w.z. statistische momenttheorie). Individuele Cmax en Tmax zullen worden geschat door inspectie van de waargenomen plasmaconcentratie versus tijdgegevens. De oppervlakte onder de curve van de plasmaconcentratie versus de tijd wordt bepaald met behulp van de gemengde log-lineaire trapeziumregel (er wordt geen extrapolatie van de AUC naar oneindig uitgevoerd). Deze analyses zullen worden uitgevoerd in Kinetica v5.0 (ThermoElectron, Philadelphia, PA). Verschillen tussen gevallen en controles op continue responsvariabelen zullen worden vergeleken met behulp van tweezijdige onafhankelijke steekproef t-tests. Relaties tussen continue responsvariabelen zullen worden geëvalueerd door middel van univariate variantieanalyse, lineaire en niet-lineaire regressietechnieken. Categorische patiëntfactoren en responsvariabelen zullen worden vergeleken met de Fisher's exact-test op een 2 x 2 kruistabel. Alle statistische analyses worden uitgevoerd met behulp van het SSPS-softwarepakket (versie 15.0, SPSS Inc., Chicago, IL).

Steekproefgrootte

Er werd een steekproefomvang van 12 voor elke groep (controles en FD-patiënten) gekozen. Twaalf patiënten per groep bieden 99% vermogen om een ​​1,5 keer grotere ACTH-secretie te detecteren bij FD-patiënten in vergelijking met controles met een standaarddeviatie die wordt verondersteld 20% te zijn op basis van 2 eerdere onderzoeken bij volwassenen (die beide ongeveer een 2-voudige toename detecteerden ). Het vermogen kan lager zijn voor secundaire analyse, maar dit wordt acceptabel geacht gezien het pilotkarakter van dit onderzoek.

Er zullen twee groepen zijn bestaande uit proefpersonen die in de Abdominal Pain Clinic zijn gezien voor buikpijn van ten minste 8 weken en die voldoen aan op symptomen gebaseerde criteria voor FD en die zijn ingepland voor endoscopie en controles, die geen recente voorgeschiedenis van buikpijn hebben .

Beide groepen ondergaan dezelfde tests/procedures.

Deelnemers vasten minimaal 8 uur voorafgaand aan de evaluatie, die begint tussen 8 en 10 uur. Vrouwelijke deelnemers ouder dan 10 jaar krijgen standaard een UCG voordat ze medicatie of medicijnen krijgen. De ouder en het kind zullen de BASC-2 en de status- en kenmerkversies van de STICSA-C voltooien. Er wordt een biofeedback-stressprofiel uitgevoerd. Vervolgens wordt een IV-katheter geplaatst en mag de deelnemer 30 minuten ontspannen voorafgaand aan het volgende deel van het onderzoek. De deelnemer ondergaat vervolgens 30 minuten basislijnmonitoring van de hartslag voorafgaand aan de CRH-stimulatietest. Na de basislijnperiode van 30 minuten wordt een bloedmonster afgenomen voor serumcytokines, ACTH, cortisol en CBG. De deelnemer beoordeelt respectievelijk de ernst van buikpijn, misselijkheid en een opgeblazen gevoel op 10-puntsschalen.

Voor de CRH-stimulatietest wordt corticoreline (een analoog van humaan CRH) toegediend in een dosis van 1 mcg per kg lichaamsgewicht (tot een maximum van 100 mcg) toegediend gedurende 1 minuut. Bloedmonsters worden genomen met tussenpozen van 15 minuten gedurende 60 minuten voor het bepalen van ACTH-, cortisol- en CBG-concentraties. Het volgende wordt verkregen of geregistreerd na 15, 30 en 60 minuten: bloedmonsters voor cytokineconcentraties, beoordelingen (op een schaal van 10 punten) van buikpijn, misselijkheid en een opgeblazen gevoel, stressprofielparameters en zelfgerapporteerde toestandsangst (d.w.z. STICSA-C Uw stemming op dit moment). Gedurende de periode van 60 minuten wordt de hartslag gemeten.

De CRH-stimulatietest is een routinematig gebruikte diagnostische test in endocriene. Het is echter geen routine voor een van de twee groepen deelnemers aan dit onderzoek.

Maatregelen

1. Hartslagvariabiliteit (HRV)

   Het elektrocardiogram wordt opgenomen en de HRV wordt beoordeeld met behulp van een I-330 C2 Physiograph (J & J Engineering, Poulsbo, WA) en Window USE Physiolab-software. MC-5SGW-elektrodekabels worden gebruikt om verbinding te maken met 2 polselektroden (+ aan de linkerkant) en een EDR-aarding die op een vinger wordt geplaatst.

   Het HRV-signaal wordt afgeleid van de ECG-gegevens. Totale spectrale vermogensanalyse zal worden toegepast op het HRV-signaal om de sympathovagale parameters te extraheren: vermogen in lage frequentie (LF) en vermogen in hoge frequentie (HF). LF wordt gedefinieerd als het gebied onder de curve in het frequentiebereik van 0,04-0,15 Hz en HF wordt gedefinieerd als het gebied onder de curve in het frequentiebereik van 0,15-0,50 Hz. Het vermogen in de LF-band (0,04-0,15 Hz) vertegenwoordigt voornamelijk sympathische activiteit en het vermogen in de HF-band (0,15-0,5 Hz) van het HRV-vermogensspectrum vertegenwoordigt puur parasympathische of vagale activiteit. De LF-tot-HF-ratio zal ook worden berekend als een maat voor de sympathovagale balans.

2. Stressprofiel

   De metingen van het biofeedback-stressprofiel worden geregistreerd met een enkele I-330 C2-fysiograaf (J & J Engineering, Poulsbo, WA), met behulp van Windows USE 3 Physiolab-software.

   De volgende modaliteiten zullen bij alle patiënten worden gecontroleerd:

   1. Oppervlakte-elektromyograaf (sEMG) - metingen worden gemeten in microvolt (mcv) met behulp van brede bandplaatsing op de frontalis; na standaard huidvoorbereiding zullen voorgegeleerde zilver/zilverchloride Red Dot-patchsensoren een vingerbreedte boven elke wenkbrauw worden geplaatst en via CL 50 krokodillenklemmen aan een MV-1L sEMG-kabel worden bevestigd. Er zullen ook sEMG-sensoren op de polspunten op beide polsen worden geplaatst om de hartslag te controleren en terug te koppelen.
   2. Perifere huidtemperatuur (TEMP) - wordt gemeten in graden Fahrenheit (F.) via een thermistor (RV-5 TEMP/EDR-sensor) die is bevestigd aan het kussentje van de middelvinger van de deelnemer (of vervangend derde cijfer) op de dominante hand.
   3. Elektrodermale respons (EDR) - huidgeleidingsactiviteit (SCA) wordt gemeten in microohm (μohm) door een (RV-5 TEMP/EDR-sensor) bevestigd aan de dominante wijsvinger door een SE 35 EDG 8 mm snapstijl zilver/zilverchloride schijf ingebed in een klittenbandsluiting met op zoutoplossing gebaseerde gel op de schijf, om huidcontact te verzekeren.

3. Plasma-eiwitten (cytokines/mediatoren/hormonen)

   Er wordt ongeveer 39 ml bloed verzameld via de IV-katheter voor plasma-eiwitbepalingen, waaronder TNF-α, IL-4, IL-5, IL-8, eotaxin-3, MCP-1, MMP-9, ECP, MBP, cortisol , ACTH en CBG. Plasma-eiwitten zullen worden gemeten met in de handel verkrijgbare immunoassaykits. Tabel 1 geeft een uitsplitsing van de hoeveelheid bloed die per tijdspunt zal worden afgenomen. Tabel 2 geeft de monstervereisten en het testlaboratorium weer.

4. Gratis plasma-cortisol

   Vrij plasma cortisol wordt berekend met behulp van de volgende formule:

   U = √ Z2 + 0,0122 C - Z(gemiddelde)M Waarbij U = molaire concentratie van ongebonden cortisol, C = molaire concentratie van totaal cortisol, T= molaire concentratie van CBG, en Z = 0,0167 + 0,182 (T-C)(gemiddelde) M

   (0,0167 en 0,182 zijn constanten voor respectievelijk de affiniteit van CBG voor cortisol bij 37°C en de verhouding albuminegebonden tot ongebonden cortisol.)

5. BASC-2-profiel De ouder- en kindversie van de Gedragsbeoordelingsschaal voor kinderen - Tweede editie (BASC-2) wordt ingevuld door respectievelijk de deelnemer en één ouder. De BASC-2 is een objectief beoordelingssysteem van psychisch functioneren bij jongeren dat gestandaardiseerde beschrijvingen van problemen en competenties geeft. Er zijn verschillende versies voor kinderen (8-11 jaar), adolescenten (12-18 jaar) en ouders (verschillende versies voor mensen met kinderen van 6-11 jaar en 12-18 jaar). (36) Ruwe scores zijn gestandaardiseerd als T-scores (M=50, SD=10) op basis van een normatieve steekproef van 3.483 kinderen van 4 tot 18 jaar, gestratificeerd volgens de US Census-gegevens. Individuele subschalen hebben een goede betrouwbaarheid (interne consistentie), met uitzondering van de subschaal Atypicaliteit op de BASC-PRS en de subschalen Somatisatie en Zelfredzaamheid op de BASC-SRS (r< .70). De BASC heeft ook criterium- en constructvaliditeit aangetoond. De T-scores voor de angst-subschalen (ouder- en zelfrapportage) zullen worden gebruikt als een maat voor trekangst voor analyse.

6. STICSA-C

   De State-Trait Inventory for Cognitive and Somatic Anxiety, Child Version (STICSA-C) is aangepast van de volwassen versie van de maatregel, de STICSA. (37) De STICSA-C bestaat uit twee afzonderlijke zelfrapportageschalen, elk met 21 items, voor het meten van twee verschillende angstconcepten: toestandsangst en trekangst. De laatste vraagt ​​kinderen om op items te reageren door in het algemeen aan te geven hoe ze zich voelen; de eerste vraagt ​​kinderen te reageren op hoe ze zich nu voelen, op dit moment. Uniek voor de STICSA-C, items op elke schaal beoordelen duidelijk en stabiel cognitieve en somatische manifestaties van angst. Kinderen wordt gevraagd hun antwoorden te geven met behulp van een 4-puntsschaal (d.w.z. van "nooit" tot "bijna altijd" op het eigenschapsformulier en van "helemaal niet" tot zeer veel "op het staatsformulier). De somatische en cognitieve subschalen van de STICSA-C eigenschapsschaal zullen worden gebruikt als een maat voor trekangst, terwijl deze subschalen van de toestandsschaal zullen worden gebruikt als een maat voor toestandsangst, in de statistische analyse.

7. Ernst van GI-symptomen

   De ernst van de symptomen wordt bepaald voor respectievelijk pijn, misselijkheid en een opgeblazen gevoel op een 10-puntsschaal met 0=geen en 10=zeer ernstig met de Global Response Scale.

8. Histologie

Voor degenen die een endoscopie ondergaan, zullen routinematige biopsieën die zijn verkregen als onderdeel van de gebruikelijke zorg, op een geblindeerde manier worden beoordeeld op eosinofielendichtheid. Immunohistochemische evaluatie van weefsel zal worden uitgevoerd met behulp van anti-tryptase en anti-CD4. Celdichtheden voor respectievelijk eosinofielen, tryptase-positieve cellen en CD4-positieve cellen zullen worden bepaald voor monsters uit respectievelijk het antrum van de maag en de bulbus duodeni. Er zullen minimaal vijf velden met hoog vermogen worden geëvalueerd met de bepaling van respectievelijk het gemiddelde en het piekaantal cellen. Pathologische diagnoses zullen worden bepaald door patholoog-evaluatie als onderdeel van routinematige zorg.