Reakce hormonu uvolňujícího kortikotropin (CRH) u dětí s funkční dyspepsií

Primárním účelem této studie je vyhodnotit, zda existují rozdíly ve schopnosti reagovat na CRH (hormón uvolňující kortikotropin) u dětí a dospívajících s FD (funkční dyspepsií) ve srovnání s kontrolami. Dále máme v úmyslu prozkoumat vztahy mezi citlivostí na CRH, zánětlivými cytokiny, stavovou úzkostí a úzkostí po rysech a symptomy hlášenými samotnými pacienty.

Konkrétní cíle studie jsou:

1. Stanovit, zda se změny v profilech sérových cytokinů, variabilitě srdeční frekvence, parametrech profilu stresu, úzkostném stavu a vlastnostech a symptomy hlášené pacienty liší mezi pacienty s FD a kontrolami po infuzi CRH.
2. Zjistit, zda se změny sérového ACTH (adreno-kortikotropního hormonu) nebo kortizolu po infuzi CRH liší mezi pacienty s FD a kontrolami nebo jako funkce velikosti stavu nebo úzkosti u FD pacientů.

Tato studie je pilotní studií na jednom místě.

Biochemická odezva na stimulaci CRH bude zkoumána pro každý z cytokinů, mediátorů a hormonů podrobně popsaných v tomto dokumentu výpočtem jejich rychlosti tvorby, maximální koncentrace (Cmax), doby do dosažení maximální koncentrace (Tmax), celkové tělesné expozice (AUC) a rychlosti zotavení. (jako relevantní). Farmakokinetické analýzy budou aplikovány na data, kde jsou zřetelné vzestupné a sestupné fáze na profilu koncentrace versus čas. Údaje o koncentraci versus čas budou proloženy křivkou pomocí odlupovacího algoritmu pro vytvoření počátečních odhadů polyexponenciálních parametrů. Konečné odhady zdánlivé míry obnovy budou určeny z iterativního, nelineárního váženého regresního algoritmu nejmenších čtverců. Posouzení dobré shody pro farmakokinetický model bude provedeno pomocí standardních kritérií (např. Akaike a Schwartzova informační kritéria, objektivní funkce a variační koeficienty pro odhadované parametry), distribuce vážených reziduálních odhadů a souvislost mezi pozorovanými a předpokládanými koncentrace. Farmakokinetické parametry nezávislé na modelu budou vypočteny za použití standardních technik (tj. teorie statistického momentu). Individuální Cmax a Tmax budou odhadnuty kontrolou pozorovaných plazmatických koncentrací v závislosti na čase. Plocha pod křivkou koncentrace v plazmě versus čas bude stanovena pomocí smíšeného log-lineárního lichoběžníkového pravidla (nebude prováděna žádná extrapolace AUC do nekonečna). Tyto analýzy budou provedeny v Kinetica v5.0 (ThermoElectron, Philadelphia, PA). Rozdíly mezi případy a kontrolami na proměnných spojité odezvy budou porovnány pomocí dvoustranných nezávislých výběrových t-testů. Vztahy mezi proměnnými spojité odezvy budou hodnoceny pomocí jednorozměrné analýzy rozptylu, lineárních a nelineárních regresních technik. Kategorické faktory pacienta a proměnné odezvy budou porovnány s Fisherovým přesným testem na křížové tabulce 2 x 2. Všechny statistické analýzy budou prováděny pomocí softwarového balíku SSPS (verze 15.0, SPSS Inc., Chicago, IL).

Velikost vzorku

Byla zvolena velikost vzorku 12 pro každou skupinu (kontroly a pacienti s FD). Dvanáct pacientů na skupinu poskytuje 99% schopnost detekovat 1,5krát vyšší sekreci ACTH u pacientů s FD ve srovnání s kontrolami se směrodatnou odchylkou předpokládanou na 20% na základě 2 předchozích studií u dospělých (obě zjistily přibližně 2násobné zvýšení ). Výkon může být nižší pro sekundární analýzu, ale vzhledem k pilotní povaze této studie je to považováno za přijatelné.

Budou dvě skupiny sestávající z jedinců, kteří byli sledováni na klinice bolesti břicha pro bolest břicha trvající alespoň 8 týdnů a splňující kritéria založená na symptomech pro FD a jsou naplánováni na endoskopii a kontroly, kteří v nedávné minulosti neměli bolest břicha .

Obě skupiny podstoupí stejné testy/procedury.

Účastníci se postí minimálně 8 hodin před vyhodnocením, které začne mezi 8. a 10. hodinou. Účastnicím starším 10 let bude standardně před podáním jakékoli medikace nebo drogy provedeno UCG. Rodič a dítě dokončí BASC-2 a státní a rysové verze STICSA-C. Bude proveden biofeedback stresový profil. Dále bude zaveden IV katétr a účastník bude mít před další částí studie možnost relaxovat po dobu 30 minut. Účastník poté podstoupí 30minutové základní monitorování srdeční frekvence před stimulačním testem CRH. Po 30 minutách základního období bude odebrán vzorek krve na sérové ​​cytokiny, ACTH, kortizol a CBG. Účastník bude hodnotit závažnost bolesti břicha, nevolnosti a nadýmání na 10bodové škále.

Pro test stimulace CRH bude podáván korticorelin (analog lidského CRH) v dávce 1 mcg na kg tělesné hmotnosti (maximálně 100 mcg) podané během 1 minuty. Vzorky krve budou odebírány v 15minutových intervalech po dobu 60 minut pro stanovení koncentrací ACTH, kortizolu a CBG. Následující údaje budou získány nebo zaznamenány po 15, 30 a 60 minutách: krevní vzorky na koncentrace cytokinů, hodnocení (na 10bodové stupnici) bolesti břicha, nevolnosti a nadýmání, parametry stresového profilu a stav úzkosti hlášený sám (tj. STICSA-C Vaše nálada v tuto chvíli). Monitorování srdeční frekvence bude prováděno po dobu 60 minut.

Stimulační test CRH je rutinně používaný diagnostický test v endokrinní oblasti. Není to však rutina pro žádnou ze dvou skupin účastníků této studie.

Opatření

1. Variabilita srdeční frekvence (HRV)

   Elektrokardiogram bude zaznamenán a HRV hodnocena pomocí I-330 C2 Physiograph (J & J Engineering, Poulsbo, WA) a softwaru Window USE Physiolab. Elektrodové kabely MC-5SGW se použijí pro připojení 2 zápěstních elektrod (+ vlevo) a uzemnění EDR, které se umístí na prst.

   Signál HRV bude odvozen z dat EKG. Celková výkonová spektrální analýza bude aplikována na HRV signál pro extrakci sympatovagálních parametrů: výkon při nízké frekvenci (LF) a výkon při vysoké frekvenci (HF). LF je definována jako plocha pod křivkou ve frekvenčním rozsahu 0,04-0,15 Hz a HF jsou definovány jako plocha pod křivkou ve frekvenčním rozsahu 0,15-0,50 Hz. Výkon v pásmu LF (0,04-0,15 Hz) představuje hlavně aktivitu sympatiku a výkon v pásmu HF (0,15-0,5 Hz) výkonového spektra HRV představuje čistě parasympatiku nebo aktivitu vagu. Poměr LF k HF bude také vypočítán jako míra sympatovagální rovnováhy.

2. Stresový profil

   Hodnoty profilu zátěže biologické zpětné vazby budou zaznamenávány pomocí jediného Physiographu I-330 C2 (J & J Engineering, Poulsbo, WA) s využitím softwaru Windows USE 3 Physiolab.

   U všech pacientů budou sledovány následující modality:

   1. Povrchový elektromyograf (sEMG) – hodnoty budou měřeny v mikrovoltech (mcv) pomocí širokopásmového umístění na frontalis; po standardní přípravě pokožky se předgelované stříbro/chlorid stříbrný umístí náplastové senzory Red Dot na šířku prstu nad každé obočí a připojí se ke kabelu MV-1L sEMG pomocí aligátorových svorek CL 50. Senzory sEMG budou také umístěny na pulsních bodech na obou zápěstích, aby monitorovaly a poskytovaly zpětnou vazbu srdečního tepu.
   2. Periferní teplota kůže (TEMP) – bude měřena ve stupních Fahrenheita (F.) pomocí termistoru (snímač RV-5 TEMP/EDR) připojeného k podložce prostředního prstu účastníka (nebo náhradní 3. číslice) na dominantní ruce.
   3. Elektrodermální odezva (EDR) – kožní vodivostní aktivita (SCA) bude měřena v mikroohmech (µohm) pomocí (snímače RV-5 TEMP/EDR) připojeného k dominantnímu ukazováčku pomocí 8mm zaklapávacího kotouče SE 35 EDG stříbro/chlorid stříbrný zapuštěné do suchého zipu s gelem na bázi fyziologického roztoku na disku, aby byl zajištěn kontakt s pokožkou.

3. Plazmatické proteiny (cytokiny/mediátory/hormony)

   Přibližně 39 ml krve bude odebráno IV katétrem pro stanovení plazmatických proteinů včetně TNF-α, IL-4, IL-5, IL-8, eotaxinu-3, MCP-1, MMP-9, ECP, MBP, kortizolu , ACTH a CBG. Plazmatické proteiny budou měřeny komerčně dostupnými imunoanalytickými soupravami. Tabulka 1 uvádí rozpis množství krve, které bude odebráno za každý časový bod. Tabulka 2 uvádí požadavky na vzorky a zkušební laboratoř.

4. Plazmový kortizol zdarma

   Volný plazmatický kortizol se vypočítá pomocí následujícího vzorce:

   U = √ Z2 + 0,0122 C - Z(průměr)M Kde U = molární koncentrace nevázaného kortizolu, C = molární koncentrace celkového kortizolu, T= molární koncentrace CBG a Z = 0,0167 + 0,182 (T-C)(průměr) M

   (0,0167 a 0,182 jsou konstanty pro afinitu CBG ke kortizolu při 37 stupních C a podíl albuminu vázaného na nevázaný kortizol, v tomto pořadí.)

5. Profil BASC-2 Rodičovská a dětská verze škály hodnocení chování pro děti – druhé vydání (BASC-2) vyplní účastník a jeden rodič. BASC-2 je objektivní hodnotící systém psychologického fungování u mládeže, který poskytuje standardizované popisy problémů a kompetencí. Existují různé verze pro děti (8–11 let), dospívající (12–18 let) a rodiče (různá verze pro děti ve věku 6–11 a 12–18 let). (36) Hrubé skóre je standardizováno jako T-skóre (M=50, SD=10) na základě normativního vzorku 3 483 dětí ve věku 4 - 18 let stratifikovaných podle údajů amerického sčítání lidu. Jednotlivé subškály mají dobrou spolehlivost (vnitřní konzistenci), s výjimkou subškály Atypickost na BASC-PRS a subškály Somatizace a soběstačnost na BASC-SRS (r< ,70). BASC také prokázal validitu související s kritériem a konstruktem. T-skóre pro subškály úzkosti (výkaz rodičů a sebehodnocení) budou použity jako měřítko úzkosti rysů pro analýzu.

6. STICSA-C

   Inventář stavu kognitivní a somatické úzkosti, dětská verze (STICSA-C) byl upraven z verze pro dospělé, STICSA. (37) STICSA-C se skládá ze dvou samostatných škál, z nichž každá má 21 položek, pro měření dvou odlišných konceptů úzkosti: stavové úzkosti a povahové úzkosti. Ten žádá děti, aby reagovaly na položky tím, že uvedly, jak se obecně cítí; první žádá děti, aby odpověděly na to, jak se cítí právě teď, v tuto chvíli. Jedinečné pro STICSA-C, položky na každé škále zřetelně a stabilně hodnotí kognitivní a somatické projevy úzkosti. Děti jsou požádány, aby uvedly své odpovědi pomocí 4bodové škály (tj. od „nikdy“ po „téměř vždy“ ve formuláři Vlastnosti a od „vůbec ne“ po velmi mnoho“ ve státním formuláři). Somatické a kognitivní subškály škály vlastností STICSA-C budou použity jako měřítko rysové úzkosti, zatímco tyto subškály stavové škály budou použity jako měřítko stavové úzkosti ve statistické analýze.

7. Závažnost příznaků GI

   Závažnost příznaků bude stanovena pro bolest, nevolnost a nadýmání na 10 bodových škálách s 0 = žádné a 10 = nejzávažnější pomocí škály Global Response Scale.

8. Histologie

U těch, kteří podstoupí endoskopii, budou rutinní biopsie získané jako součást obvyklé péče hodnoceny zaslepeným způsobem na hustotu eozinofilů. Imunohistochemické hodnocení tkáně bude provedeno s využitím anti-tryptázy a anti-CD4. Buněčné hustoty pro eozinofily, buňky pozitivní na tryptázu a buňky pozitivní na CD4 budou stanoveny pro vzorky z antra žaludku a bulbu duodena, v tomto pořadí. Bude vyhodnoceno minimálně pět vysoce výkonných polí s určením středního a maximálního počtu buněk. Patologické diagnózy budou stanoveny patologem jako součást běžné péče.