Capacidad de respuesta de la hormona liberadora de corticotropina (CRH) en niños con dispepsia funcional

El objetivo principal de este estudio es evaluar si existen diferencias en la capacidad de respuesta de la CRH (hormona liberadora de corticotropina) en niños y adolescentes con DF (dispepsia funcional) en comparación con los controles. Además, tenemos la intención de explorar las relaciones entre la capacidad de respuesta de CRH, las citocinas inflamatorias, el estado y el rasgo de ansiedad y los síntomas autoinformados.

Los objetivos específicos del estudio son:

1. Determinar si los cambios en los perfiles de citocinas séricas, la variabilidad de la frecuencia cardíaca, los parámetros del perfil de estrés, el estado y el rasgo de ansiedad y los síntomas autoinformados difieren entre los pacientes con DF y los controles después de la infusión de CRH.
2. Determinar si los cambios en el suero de ACTH (hormona adrenocorticotrópica) o cortisol después de la infusión de CRH difieren entre pacientes con DF y controles o en función de la magnitud del estado o rasgo de ansiedad entre pacientes con DF.

Este estudio es un estudio piloto de un solo sitio.

Se explorará la respuesta bioquímica a la estimulación con CRH para cada una de las citoquinas, mediadores y hormonas detallados aquí mediante el cálculo de su tasa de formación, concentración máxima (Cmax), tiempo hasta la concentración máxima (Tmax), exposición corporal total (AUC) y tasa de recuperación (tan relevante). Los análisis farmacocinéticos se aplicarán a los datos en los que existan claras fases ascendentes y descendentes en el perfil de concentración frente al tiempo. Los datos de concentración versus tiempo se ajustarán a la curva utilizando un algoritmo de pelado para generar estimaciones iniciales de parámetros poliexponenciales. Las estimaciones finales de la tasa aparente de recuperación se determinarán a partir de un algoritmo de regresión iterativo no lineal de mínimos cuadrados ponderados. La evaluación de la bondad de ajuste del modelo farmacocinético se realizará utilizando criterios estándar (p. ej., los criterios de información de Akaike y Schwartz, la función objetivo y los coeficientes de variación de los parámetros estimados), la distribución de las estimaciones residuales ponderadas y la asociación entre lo observado y lo predicho. concentraciones Los parámetros farmacocinéticos independientes del modelo se calcularán utilizando técnicas estándar (es decir, teoría del momento estadístico). La Cmax y la Tmax individuales se estimarán mediante la inspección de los datos de concentración plasmática observados frente al tiempo. El área bajo la curva de concentración plasmática versus tiempo se determinará utilizando la regla trapezoidal logarítmica lineal mixta (no se realizará ninguna extrapolación del AUC al infinito). Estos análisis se realizarán en Kinetica v5.0 (ThermoElectron, Philadelphia, PA). Las diferencias entre los casos y los controles en las variables de respuesta continua se compararán mediante pruebas t de muestras independientes bilaterales. Las relaciones entre las variables de respuesta continua se evaluarán mediante análisis de varianza univariante, técnicas de regresión lineal y no lineal. Los factores categóricos del paciente y las variables de respuesta se compararán con la prueba exacta de Fisher en una tabulación cruzada de 2 x 2. Todos los análisis estadísticos se realizarán utilizando el paquete de software SSPS (versión 15.0, SPSS Inc., Chicago, IL).

Tamaño de la muestra

Se eligió un tamaño de muestra de 12 para cada grupo (controles y pacientes con DF). Doce pacientes por grupo proporciona un poder del 99 % para detectar una secreción de ACTH 1,5 veces mayor en pacientes con FD en comparación con los controles con una desviación estándar supuesta del 20 % según 2 estudios previos en adultos (ambos detectaron aproximadamente un aumento de 2 veces ). La potencia puede ser menor para el análisis secundario, sin embargo, esto se considera aceptable dada la naturaleza piloto de este estudio.

Habrá dos grupos formados por sujetos que han sido vistos en la Clínica de Dolor Abdominal por dolor abdominal de al menos 8 semanas de duración y que cumplen los criterios basados ​​en síntomas para DF y están programados para endoscopia y controles, que no tienen antecedentes recientes de dolor abdominal .

Ambos grupos se someterán a las mismas pruebas/procedimientos.

Los participantes ayunarán un mínimo de 8 horas antes de la evaluación, que comenzará entre las 8 y las 10 a. m. Las participantes femeninas > 10 años de edad recibirán un UCG como práctica estándar antes de recibir cualquier medicamento o fármaco. El padre y el niño completarán el BASC-2 y las versiones de estado y rasgo del STICSA-C. Se realizará un perfil de estrés de biorretroalimentación. A continuación, se colocará un catéter intravenoso y se permitirá que el participante se relaje durante 30 minutos antes de la siguiente parte del estudio. Luego, el participante se someterá a un control de referencia de la frecuencia cardíaca de 30 minutos antes de la prueba de estimulación con CRH. Después del período de referencia de 30 minutos, se obtendrá una muestra de sangre para citocinas séricas, ACTH, cortisol y CBG. El participante calificará la gravedad del dolor abdominal, las náuseas y la hinchazón, respectivamente, en escalas de 10 puntos.

Para la prueba de estimulación con CRH, se administrará corticorelina (un análogo de la CRH humana) a una dosis de 1 mcg por kg de peso corporal (hasta un máximo de 100 mcg) en 1 minuto. Se obtendrán muestras de sangre a intervalos de 15 minutos durante 60 minutos para determinar las concentraciones de ACTH, cortisol y CBG. Se obtendrá o registrará lo siguiente a los 15, 30 y 60 minutos: muestras de sangre para las concentraciones de citoquinas, calificaciones (en una escala de 10 puntos) de dolor abdominal, náuseas e hinchazón, parámetros del perfil de estrés y estado de ansiedad autoinformado (es decir. STICSA-C Tu Estado de Ánimo en este Momento). El control de la frecuencia cardíaca se llevará a cabo durante el período de 60 minutos.

La prueba de estimulación con CRH es una prueba diagnóstica de uso rutinario en Endocrino. Sin embargo, no es una rutina para ninguno de los dos grupos de participantes en este estudio.

Medidas

1. Variabilidad de la frecuencia cardíaca (VFC)

   Se registrará el electrocardiograma y se evaluará la HRV utilizando un fisiógrafo I-330 C2 (J & J Engineering, Poulsbo, WA) y el software Window USE Physiolab. Los cables de electrodos MC-5SGW se utilizarán para conectar 2 electrodos de muñeca (+ a la izquierda) y una conexión a tierra EDR que se colocará en un dedo.

   La señal HRV se derivará de los datos del ECG. Se aplicará un análisis espectral de potencia general a la señal HRV para extraer los parámetros simpatovagales: potencia en baja frecuencia (LF) y potencia en alta frecuencia (HF). LF se define como el área bajo la curva en el rango de frecuencia de 0.04-0.15 Hz y HF se define como el área bajo la curva en el rango de frecuencia de 0,15-0,50 Hz. La potencia en la banda LF (0,04-0,15 Hz) representa principalmente actividad simpática y la potencia en la banda HF (0,15-0,5 Hz) del espectro de potencia HRV representa actividad puramente parasimpática o vagal. La relación LF a HF también se calculará como una medida del equilibrio simpático vagal.

2. Perfil de tensión

   Las lecturas del perfil de estrés de biorretroalimentación se registrarán con un solo fisiógrafo I-330 C2 (J & J Engineering, Poulsbo, WA), utilizando el software Windows USE 3 Physiolab.

   Las siguientes modalidades serán monitoreadas en todos los pacientes:

   1. Electromiógrafo de superficie (sEMG): las lecturas se medirán en microvoltios (mcv) utilizando la colocación de banda ancha en el frontal; después de la preparación estándar de la piel, los sensores de parche Red Dot de plata/cloruro de plata pregelificados se colocarán a un dedo de ancho por encima de cada ceja y se conectarán a un cable MV-1L sEMG a través de pinzas de cocodrilo CL 50. También se colocarán sensores sEMG en los puntos de pulso en ambas muñecas para monitorear y retroalimentar los latidos del corazón.
   2. Temperatura de la piel periférica (TEMP): se medirá en grados Fahrenheit (F.) a través de un termistor (sensor RV-5 TEMP/EDR) conectado a la yema del dedo medio del participante (o sustituto del tercer dígito) en la mano dominante.
   3. Respuesta electrodérmica (EDR): la actividad de conductancia de la piel (SCA) se medirá en microohmios (µohm) mediante un (sensor RV-5 TEMP/EDR) conectado al dedo índice dominante mediante un disco de cloruro de plata/plata SE 35 EDG de 8 mm a presión. incrustado en un cierre de velcro con gel a base de solución salina en el disco, para asegurar el contacto con la piel.

3. Proteínas plasmáticas (citocinas/mediadores/hormonas)

   Se recolectarán aproximadamente 39 ml de sangre a través del catéter intravenoso para determinaciones de proteínas plasmáticas, incluidos TNF-α, IL-4, IL-5, IL-8, eotaxina-3, MCP-1, MMP-9, ECP, MBP, cortisol , ACTH y CBG. Las proteínas plasmáticas se medirán mediante kits de inmunoensayo disponibles comercialmente. La Tabla 1 presenta un desglose de la cantidad de sangre que se recolectará por cada punto de tiempo. La Tabla 2 presenta los requisitos de la muestra y el laboratorio de pruebas.

4. Cortisol plasmático libre

   El cortisol plasmático libre se calculará mediante la siguiente fórmula:

   U = √ Z2 + 0,0122 C - Z(media)M Donde U = concentración molar de cortisol libre, C = concentración molar de cortisol total, T= concentración molar de CBG y Z = 0,0167 + 0,182 (T-C)(media) M

   (0,0167 y 0,182 son constantes para la afinidad de CBG por el cortisol a 37 grados C y la proporción de cortisol unido a albúmina y no unido, respectivamente).

5. Perfil BASC-2 Las versiones para padres e hijos de la Escala de evaluación del comportamiento para niños - Segunda edición (BASC-2) serán completadas por el participante y uno de los padres, respectivamente. El BASC-2 es un sistema de calificación objetivo del funcionamiento psicológico en la juventud que proporciona descripciones estandarizadas de problemas y competencias. Hay diferentes versiones para niños (de 8 a 11 años), adolescentes (de 12 a 18 años) y padres (versión diferente para niños de 6 a 11 años y de 12 a 18 años). (36) Las puntuaciones brutas están estandarizadas como puntuaciones T (M=50, SD=10) según una muestra normativa de 3483 niños de 4 a 18 años estratificados según los datos del censo de EE. UU. Las subescalas individuales tienen buena confiabilidad (consistencia interna), a excepción de la subescala de Atipicidad en el BASC-PRS y las subescalas de Somatización y Autosuficiencia en el BASC-SRS (r< .70). El BASC también ha demostrado validez de criterio y de constructo. Las puntuaciones T para las subescalas de ansiedad (informes de los padres y de uno mismo) se utilizarán como una medida del rasgo de ansiedad para el análisis.

6. STICSA-C

   El Inventario Estado-Rasgo para la Ansiedad Cognitiva y Somática, Versión Infantil (STICSA-C) fue adaptado de la versión para adultos de la medida, el STICSA. (37) La STICSA-C consta de dos escalas de autoinforme separadas, cada una con 21 ítems, para medir dos conceptos distintos de ansiedad: ansiedad estado y ansiedad rasgo. Este último pide a los niños que respondan a los ítems indicando cómo se sienten, en general; el primero pide a los niños que respondan sobre cómo se sienten en este momento, en este mismo momento. Exclusivo del STICSA-C, los ítems de cada escala evalúan de forma clara y estable las manifestaciones cognitivas y somáticas de la ansiedad. Se les pide a los niños que proporcionen sus respuestas usando una escala de 4 puntos (es decir, de "Nunca" a "Casi siempre" en el formulario de Rasgo, y de "Nada" a Mucho" en el formulario de Estado). Las subescalas somática y cognitiva de la escala rasgo STICSA-C se utilizarán como medida de ansiedad rasgo, mientras que estas subescalas de la escala estado se utilizarán como medida de ansiedad estado, en el análisis estadístico.

7. Gravedad de los síntomas gastrointestinales

   La gravedad de los síntomas se determinará para el dolor, las náuseas y la hinchazón, respectivamente, en escalas de 10 puntos con 0 = ninguno y 10 = más grave con la Escala de respuesta global.

8. Histología

Para aquellos que se someten a una endoscopia, las biopsias de rutina obtenidas como parte de la atención habitual se evaluarán de manera ciega para determinar la densidad de eosinófilos. La evaluación inmunohistoquímica del tejido se realizará utilizando anti-triptasa y anti-CD4. Las densidades celulares para eosinófilos, células positivas para triptasa y células positivas para CD4, respectivamente, se determinarán para muestras del antro gástrico y del bulbo duodenal, respectivamente. Se evaluarán un mínimo de cinco campos de alta potencia con la determinación de los recuentos de células medios y máximos, respectivamente. Los diagnósticos patológicos serán determinados por la evaluación patológica como parte de la atención de rutina.