Реакция на кортикотропин-рилизинг-гормон (CRH) у детей с функциональной диспепсией

Основная цель этого исследования — оценить, существуют ли различия в чувствительности к КРГ (кортикотропин-высвобождающему гормону) у детей и подростков с ФД (функциональной диспепсией) по сравнению с контрольной группой. Кроме того, мы намерены изучить взаимосвязь между реакцией на КРГ, воспалительными цитокинами, состоянием и личностной тревогой, а также симптомами, о которых сообщают сами пациенты.

Конкретными целями исследования являются:

1. Определить, различаются ли изменения в профилях цитокинов сыворотки, вариабельность сердечного ритма, параметры профиля стресса, состояние и тревожность, а также симптомы, о которых сообщают сами пациенты с БФ и контрольной группой после инфузии КРГ.
2. Определить, различаются ли изменения уровня АКТГ (адренокортикотропного гормона) или кортизола в сыворотке после инфузии КРГ у пациентов с БФ и контрольной группой, или как функция выраженности состояния или личностной тревожности у пациентов с БФ.

Это исследование является пилотным исследованием на одном сайте.

Биохимический ответ на стимуляцию CRH будет изучен для каждого из цитокинов, медиаторов и гормонов, подробно описанных здесь, путем расчета их скорости образования, максимальной концентрации (Cmax), времени достижения максимальной концентрации (Tmax), общего воздействия на организм (AUC) и скорости восстановления. (при необходимости). Фармакокинетический анализ будет применяться к данным, в которых четко прослеживаются фазы роста и снижения концентрации в зависимости от времени. Данные зависимости концентрации от времени будут аппроксимироваться кривой с использованием алгоритма пилинга для получения исходных полиэкспоненциальных оценок параметров. Окончательные оценки кажущейся скорости восстановления будут определяться с помощью итеративного нелинейного взвешенного алгоритма регрессии наименьших квадратов. Оценка согласия для фармакокинетической модели будет проводиться с использованием стандартных критериев (например, информационных критериев Акаике и Шварца, целевой функции и коэффициентов вариации для оцениваемых параметров), распределения взвешенных остаточных оценок и связи между наблюдаемыми и прогнозируемыми концентрации. Независимые от модели фармакокинетические параметры будут рассчитываться с использованием стандартных методов (т. е. теории статистического момента). Индивидуальные Cmax и Tmax будут оцениваться путем проверки наблюдаемой концентрации в плазме в зависимости от данных времени. Площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени будет определяться с использованием смешанного логарифмически-линейного правила трапеций (экстраполяция AUC в бесконечность не выполняется). Эти анализы будут выполняться в Kinetica v5.0 (ThermoElectron, Philadelphia, PA). Различия между случаями и контролями по непрерывным переменным отклика будут сравниваться с использованием двусторонних независимых выборочных t-тестов. Отношения между непрерывными переменными отклика будут оцениваться с помощью одномерного дисперсионного анализа, методов линейной и нелинейной регрессии. Категориальные факторы пациента и переменные ответа будут сравниваться с точным критерием Фишера в перекрестной таблице 2 x 2. Все статистические анализы будут проводиться с использованием программного пакета SSPS (версия 15.0, SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс).

Размер образца

Был выбран размер выборки 12 человек для каждой группы (контрольная группа и пациенты с БФ). Двенадцать пациентов в группе обеспечивают 99-процентную мощность для обнаружения в 1,5 раза большей секреции АКТГ у пациентов с БФ по сравнению с контрольной группой, при этом стандартное отклонение предполагается равным 20% на основании двух предыдущих исследований у взрослых (оба из которых выявили примерно двукратное увеличение секреции АКТГ). ). Мощность может быть ниже для вторичного анализа, однако это считается приемлемым, учитывая экспериментальный характер этого исследования.

Будут две группы, состоящие из субъектов, которые были замечены в Клинике абдоминальной боли по поводу боли в животе продолжительностью не менее 8 недель и соответствуют критериям, основанным на симптомах БФ, и которым запланировано эндоскопическое исследование, и контрольная группа, у которых в недавнем анамнезе не было болей в животе. .

Обе группы будут проходить одинаковые тесты/процедуры.

Участники будут голодать не менее 8 часов до оценки, которая начнется с 8 до 10 утра. Участникам женского пола старше 10 лет в качестве стандартной практики будет назначена UCG перед получением каких-либо лекарств или наркотиков. Родитель и ребенок заполнят BASC-2, а также версии состояния и признаков STICSA-C. Будет выполнен профиль стресса биологической обратной связи. Затем будет установлен внутривенный катетер, и участнику будет разрешено расслабиться в течение 30 минут перед следующей частью исследования. Затем участник будет подвергаться 30-минутному базовому мониторингу частоты сердечных сокращений перед тестом стимуляции CRH. По истечении 30-минутного базового периода будет взят образец крови для определения сывороточных цитокинов, АКТГ, кортизола и CBG. Участник будет оценивать тяжесть болей в животе, тошноты и вздутия соответственно по 10-балльной шкале.

Для теста стимуляции CRH кортикорелин (аналог человеческого CRH) будет вводиться в дозе 1 мкг на кг массы тела (максимум 100 мкг) в течение 1 минуты. Образцы крови будут браться с 15-минутными интервалами в течение 60 минут для определения концентрации АКТГ, кортизола и CBG. Следующее будет получено или записано через 15, 30 и 60 минут: образцы крови для определения концентрации цитокинов, оценки (по 10-балльной шкале) боли в животе, тошноты и вздутия живота, параметры профиля стресса и самооценка состояния тревоги. (т.е. STICSA-C Ваше настроение в данный момент). Мониторинг сердечного ритма будет проводиться в течение 60-минутного периода.

Тест стимуляции CRH является рутинно используемым диагностическим тестом в эндокринологии. Однако это не является рутиной ни для одной из двух групп участников этого исследования.

Меры

1. Вариабельность сердечного ритма (ВСР)

   Будет записана электрокардиограмма и оценена ВСР с использованием физиографа I-330 C2 (J & J Engineering, Poulsbo, WA) и программного обеспечения Window USE Physiolab. Электродные кабели MC-5SGW будут использоваться для подключения к 2 наручным электродам (+ слева) и заземлению EDR, которое будет размещено на пальце.

   Сигнал ВСР будет получен из данных ЭКГ. Спектральный анализ общей мощности будет применен к сигналу ВСР для извлечения симпатовагальных параметров: мощности на низких частотах (НЧ) и мощности на высоких частотах (ВЧ). НЧ определяется как площадь под кривой в диапазоне частот 0,04-0,15 Гц и ВЧ определяется как площадь под кривой в диапазоне частот 0,15-0,50 Гц. Мощность в НЧ-диапазоне (0,04-0,15 Гц) представляет в основном симпатическую активность, а мощность в ВЧ-диапазоне (0,15-0,5 Гц) спектра мощности ВСР представляет чисто парасимпатическую или блуждающую активность. Соотношение LF-HF также будет рассчитываться как мера симпатовагального баланса.

2. Профиль стресса

   Показания профиля стресса биологической обратной связи будут записаны с помощью одного физиографа I-330 C2 (J & J Engineering, Poulsbo, WA) с использованием программного обеспечения Windows USE 3 Physiolab.

   У всех пациентов будут контролироваться следующие методы:

   1. Поверхностный электромиограф (пЭМГ) — показания будут измеряться в микровольтах (мкВ) с использованием широкого диапазона, наложенного на лобную мышцу; после стандартной подготовки кожи предварительно гелеобразные датчики Red Dot из серебра/хлорида серебра помещают на ширину пальца над каждой бровью и прикрепляют к кабелю MV-1L sEMG с помощью зажимов типа «крокодил» CL 50. Датчики sEMG также будут размещены на точках пульса на обоих запястьях, чтобы контролировать и получать обратную связь от сердечного ритма.
   2. Периферическая температура кожи (TEMP) - будет измеряться в градусах Фаренгейта (F.) с помощью термистора (датчик RV-5 TEMP/EDR), прикрепленного к подушечке среднего пальца участника (или заменяющего 3-ю цифру) на ведущей руке.
   3. Электродермальная реакция (EDR) - активность проводимости кожи (SCA) будет измеряться в микроомах (мкОм) с помощью (датчика RV-5 TEMP/EDR), прикрепленного к доминирующему указательному пальцу с помощью диска SE 35 EDG 8 мм с защелкой из серебра/хлорида серебра. встроен в застежку-липучку с гелем на основе физиологического раствора на диске, чтобы обеспечить контакт с кожей.

3. Белки плазмы (цитокины/медиаторы/гормоны)

   Приблизительно 39 мл крови будет собрано через внутривенный катетер для определения белков плазмы, включая TNF-α, IL-4, IL-5, IL-8, эотаксин-3, MCP-1, MMP-9, ECP, MBP, кортизол. , АКТГ и КБГ. Белки плазмы будут измеряться с помощью имеющихся в продаже наборов для иммуноанализа. В таблице 1 представлена ​​разбивка количества крови, которое будет собрано в каждый момент времени. В таблице 2 представлены требования к образцам и испытательная лаборатория.

4. Свободный кортизол плазмы

   Свободный кортизол плазмы будет рассчитываться по следующей формуле:

   U = √ Z2 + 0,0122 C - Z (среднее) M, где U = молярная концентрация несвязанного кортизола, C = молярная концентрация общего кортизола, T = молярная концентрация CBG и Z = 0,0167 + 0,182 (T-C) (среднее) M

   (0,0167 и 0,182 являются константами сродства КБГ к кортизолу при 37°С и доли связанного альбумина с несвязанным кортизолом соответственно.)

5. Профиль BASC-2 Родительская и дочерняя версии Шкалы поведенческой оценки для детей - второе издание (BASC-2) заполняются участником и одним из родителей соответственно. BASC-2 представляет собой объективную систему оценки психологического функционирования молодежи, которая обеспечивает стандартизированные описания проблем и компетенций. Существуют разные версии для детей (8-11 лет), подростков (12-18 лет) и родителей (другие версии для детей 6-11 лет и 12-18 лет). (36) Необработанные баллы стандартизированы как T-баллы (M=50, SD=10) на основе нормативной выборки из 3483 детей в возрасте от 4 до 18 лет, стратифицированных в соответствии с данными переписи населения США. Отдельные подшкалы имеют хорошую надежность (внутреннюю согласованность), за исключением подшкалы Атипичность в BASC-PRS и подшкалы Соматизация и Уверенность в себе в BASC-SRS (r<0,70). BASC также продемонстрировал связанную с критериями и конструктную валидность. Т-баллы для подшкал тревожности (отчет родителей и самоотчет) будут использоваться в качестве меры личностной тревожности для анализа.

6. СТИКСА-С

   Опросник состояний и признаков когнитивной и соматической тревожности, детская версия (STICSA-C) был адаптирован из взрослой версии меры, STICSA. (37) STICSA-C состоит из двух отдельных шкал самоотчетов, каждая из которых содержит 21 пункт, для измерения двух различных концепций тревожности: тревожности состояния и личностной тревожности. Последний просит детей реагировать на вопросы, указывая, как они себя чувствуют в целом; первый просит детей ответить о том, что они чувствуют прямо сейчас, в этот самый момент. Уникальные для STICSA-C пункты по каждой шкале четко и стабильно оценивают когнитивные и соматические проявления тревоги. Детей просят дать свои ответы по 4-балльной шкале (т. е. от «Никогда» до «Почти всегда» в анкете «Характеристика» и от «Никогда» до «Очень сильно» в анкете «Состояние»). Соматические и когнитивные подшкалы шкалы признаков STICSA-C будут использоваться в качестве меры личностной тревожности, в то время как эти подшкалы шкалы состояний будут использоваться в качестве меры тревожности состояния при статистическом анализе.

7. выраженность желудочно-кишечных симптомов

   Тяжесть симптомов будет определяться для боли, тошноты и вздутия живота, соответственно, по 10-балльной шкале, где 0 = отсутствие и 10 = самая тяжелая форма по Шкале общего ответа.

8. гистология

Для тех, кто проходит эндоскопию, рутинные биопсии, полученные как часть обычного ухода, будут оцениваться слепым методом на плотность эозинофилов. Иммуногистохимическая оценка ткани будет проводиться с использованием антитриптазы и анти-CD4. Плотность клеток для эозинофилов, триптаза-положительных клеток и CD4-положительных клеток соответственно будет определяться для образцов из антрального отдела желудка и луковицы двенадцатиперстной кишки соответственно. Будет оцениваться как минимум пять полей высокой мощности с определением среднего и пикового количества клеток соответственно. Патологические диагнозы будут определяться патологоанатомом в рамках обычного лечения.