Reattività dell'ormone di rilascio della corticotropina (CRH) nei bambini con dispepsia funzionale

Lo scopo principale di questo studio è valutare se ci sono differenze nella risposta al CRH (Corticotropin Releasing Hormone) nei bambini e negli adolescenti con FD (Dispepsia Funzionale) rispetto ai controlli. Inoltre, intendiamo esplorare le relazioni tra reattività al CRH, citochine infiammatorie, ansia di stato e di tratto e sintomi auto-riferiti.

Gli obiettivi specifici dello studio sono:

1. Per determinare se i cambiamenti nei profili delle citochine sieriche, la variabilità della frequenza cardiaca, i parametri del profilo dello stress, l'ansia di stato e di tratto e i sintomi auto-riferiti differiscono tra i pazienti con FD e i controlli dopo l'infusione di CRH.
2. Per determinare se i cambiamenti nell'ACTH sierico (ormone adreno-corticotropo) o nel cortisolo dopo l'infusione di CRH differiscono tra i pazienti con FD e i controlli o in funzione dell'entità dello stato o dell'ansia di tratto tra i pazienti con FD.

Questo studio è uno studio pilota a sito singolo.

La risposta biochimica alla stimolazione del CRH sarà esplorata per ciascuna delle citochine, mediatori e ormoni qui descritti calcolando il loro tasso di formazione, concentrazione massima (Cmax), tempo alla concentrazione massima (Tmax), esposizione corporea totale (AUC) e tasso di recupero (se pertinente). Le analisi farmacocinetiche saranno applicate ai dati in cui sono presenti chiare fasi ascendenti e discendenti sul profilo concentrazione/tempo. I dati di concentrazione rispetto al tempo saranno adattati alla curva utilizzando un algoritmo di peeling per generare stime iniziali dei parametri poliesponenziale. Le stime finali del tasso di recupero apparente saranno determinate da un algoritmo di regressione dei minimi quadrati pesati iterativo e non lineare. La valutazione della bontà di adattamento per il modello farmacocinetico sarà effettuata utilizzando criteri standard (ad esempio, criteri informativi di Akaike e Schwartz, funzione obiettivo e coefficienti di variazione per i parametri stimati), la distribuzione delle stime residue ponderate e l'associazione tra il valore osservato e quello previsto concentrazioni. I parametri farmacocinetici indipendenti dal modello saranno calcolati utilizzando tecniche standard (ad esempio, teoria del momento statistico). La Cmax e la Tmax individuali saranno stimate mediante ispezione della concentrazione plasmatica osservata rispetto ai dati temporali. L'area sotto la curva della concentrazione plasmatica in funzione del tempo sarà determinata utilizzando la regola trapezoidale log-lineare mista (non verrà eseguita alcuna estrapolazione dell'AUC all'infinito). Queste analisi saranno eseguite in Kinetica v5.0 (ThermoElectron, Philadelphia, PA). Le differenze tra casi e controlli sulle variabili di risposta continua saranno confrontate utilizzando un t-test campione indipendente a due code. Le relazioni tra le variabili di risposta continua saranno valutate mediante analisi univariata della varianza, tecniche di regressione lineare e non lineare. I fattori categorici del paziente e le variabili di risposta saranno confrontati con il test esatto di Fisher su una tabella incrociata 2 x 2. Tutte le analisi statistiche saranno condotte utilizzando il pacchetto software SSPS (versione 15.0, SPSS Inc., Chicago, IL).

Misura di prova

È stata scelta una dimensione del campione di 12 per ciascun gruppo (controlli e pazienti con FD). Dodici pazienti per gruppo forniscono una potenza del 99% per rilevare una secrezione di ACTH 1,5 volte maggiore nei pazienti con FD rispetto ai controlli con la deviazione standard considerata pari al 20% sulla base di 2 precedenti studi sugli adulti (entrambi i quali hanno rilevato un aumento di circa 2 volte ). La potenza può essere inferiore per l'analisi secondaria, tuttavia, ciò è considerato accettabile data la natura pilota di questo studio.

Ci saranno due gruppi composti da soggetti che sono stati visti nella clinica del dolore addominale per dolore addominale della durata di almeno 8 settimane e che soddisfano i criteri basati sui sintomi per FD e sono programmati per l'endoscopia e controlli, che non hanno una storia recente di dolore addominale .

Entrambi i gruppi saranno sottoposti agli stessi test/procedure.

I partecipanti digiuneranno per un minimo di 8 ore prima della valutazione, che inizierà tra le 8:00 e le 10:00. Alle partecipanti di sesso femminile > 10 anni verrà somministrato un UCG come pratica standard prima di ricevere qualsiasi farmaco o droga. Il genitore e il figlio completeranno il BASC-2 e le versioni di stato e di tratto del STICSA-C. Verrà eseguito un profilo di stress biofeedback. Successivamente, verrà posizionato un catetere IV e il partecipante potrà rilassarsi per 30 minuti prima della parte successiva dello studio. Il partecipante verrà quindi sottoposto a un monitoraggio di base di 30 minuti della frequenza cardiaca prima del test di stimolazione CRH. Dopo il periodo basale di 30 minuti, verrà prelevato un campione di sangue per citochine sieriche, ACTH, cortisolo e CBG. Il partecipante valuterà la gravità del dolore addominale, nausea e gonfiore, rispettivamente, su scale a 10 punti.

Per il test di stimolazione del CRH, verrà somministrata corticorelina (un analogo del CRH umano) alla dose di 1 mcg per kg di peso corporeo (fino a un massimo di 100 mcg) somministrata in 1 minuto. I campioni di sangue saranno prelevati a intervalli di 15 minuti per 60 minuti per la determinazione delle concentrazioni di ACTH, cortisolo e CBG. Quanto segue sarà ottenuto o registrato a 15, 30 e 60 minuti: campioni di sangue per concentrazioni di citochine, valutazioni (su una scala a 10 punti) di dolore addominale, nausea e gonfiore, parametri del profilo di stress e ansia di stato auto-riportata (cioè. STICSA-C Il tuo stato d'animo in questo momento). Il monitoraggio della frequenza cardiaca sarà condotto per la durata del periodo di 60 minuti.

Il test di stimolazione CRH è un test diagnostico utilizzato di routine in Endocrino. Non è, tuttavia, routine per nessuno dei due gruppi di partecipanti a questo studio.

Le misure

1. Variabilità della frequenza cardiaca (HRV)

   L'elettrocardiogramma verrà registrato e l'HRV valutato utilizzando un fisiografo I-330 C2 (J & J Engineering, Poulsbo, WA) e il software Window USE Physiolab. I cavi degli elettrodi MC-5SGW verranno utilizzati per collegare 2 elettrodi da polso (+ a sinistra) e una massa EDR che verrà posizionata su un dito.

   Il segnale HRV sarà derivato dai dati ECG. L'analisi spettrale della potenza complessiva sarà applicata al segnale HRV per estrarre i parametri simpaticovagali: potenza in bassa frequenza (LF) e potenza in alta frequenza (HF). LF è definito come l'area sotto la curva nell'intervallo di frequenza di 0,04-0,15 Hz e HF sono definiti come l'area sotto la curva nell'intervallo di frequenza di 0,15-0,50 Hz. La potenza nella banda LF (0,04-0,15 Hz) rappresenta principalmente l'attività simpatica e la potenza nella banda HF (0,15-0,5 Hz) dello spettro di potenza HRV rappresenta l'attività puramente parasimpatica o vagale. Il rapporto LF/HF sarà calcolato anche come misura dell'equilibrio simpaticovagale.

2. Profilo di stress

   Le letture del profilo di stress del biofeedback saranno registrate con un singolo fisiografo I-330 C2 (J & J Engineering, Poulsbo, WA), utilizzando il software Windows USE 3 Physiolab.

   Le seguenti modalità saranno monitorate su tutti i pazienti:

   1. Elettromiografo di superficie (sEMG): le letture saranno misurate in microvolt (mcv) utilizzando il posizionamento a banda larga sul frontale; dopo la preparazione standard della pelle, i sensori patch Red Dot in argento/cloruro d'argento pregellati verranno posizionati a un dito sopra ogni sopracciglio e collegati a un cavo sEMG MV-1L tramite clip a coccodrillo CL 50. I sensori sEMG verranno inoltre posizionati sui punti di impulso su entrambi i polsi per monitorare e fornire feedback sul battito cardiaco.
   2. Temperatura cutanea periferica (TEMP) - sarà misurata in gradi Fahrenheit (F.) tramite un termistore (sensore RV-5 TEMP/EDR) attaccato al polpastrello del dito medio del partecipante (o sostituire la terza cifra) sulla mano dominante.
   3. Risposta elettrodermica (EDR) - l'attività di conduttanza cutanea (SCA) sarà misurata in microohm (µohm) da un (sensore RV-5 TEMP/EDR) collegato al dito indice dominante da un disco SE 35 EDG da 8 mm in argento/cloruro d'argento incorporato in una chiusura in velcro con gel a base salina sul disco, per garantire il contatto con la pelle.

3. Proteine ​​plasmatiche (citochine/ mediatori/ ormoni)

   Saranno raccolti circa 39 mL di sangue attraverso il catetere IV per la determinazione delle proteine ​​plasmatiche tra cui TNF-α, IL-4, IL-5, IL-8, eotassina-3, MCP-1, MMP-9, ECP, MBP, cortisolo , ACTH e CBG. Le proteine ​​plasmatiche saranno misurate mediante kit immunologici disponibili in commercio. La tabella 1 presenta una suddivisione della quantità di sangue che verrà raccolta per ciascun punto temporale. La tabella 2 presenta i requisiti del campione e il laboratorio di prova.

4. Cortisolo plasmatico libero

   Il cortisolo plasmatico libero sarà calcolato utilizzando la seguente formula:

   U = √ Z2 + 0,0122 C - Z(media)M Dove U = concentrazione molare di cortisolo non legato, C = concentrazione molare di cortisolo totale, T= concentrazione molare di CBG e Z = 0,0167 + 0,182 (T-C)(media) M

   (0,0167 e 0,182 sono costanti per l'affinità del CBG per il cortisolo a 37 gradi C e la proporzione di albumina legata a cortisolo non legato, rispettivamente.)

5. Profilo BASC-2 Le versioni genitore e figlio della Scala di valutazione comportamentale per bambini - Seconda edizione (BASC-2) saranno completate rispettivamente dal partecipante e da un genitore. Il BASC-2 è un sistema di valutazione oggettiva del funzionamento psicologico nei giovani che fornisce descrizioni standardizzate di problemi e competenze. Ci sono diverse versioni per bambini (età 8-11), adolescenti (età 12-18) e genitori (versione diversa per chi ha bambini di età 6-11 e 12-18). (36) I punteggi grezzi sono standardizzati come punteggi T (M=50, DS=10) basati su un campione normativo di 3.483 bambini di età compresa tra 4 e 18 anni stratificati in base ai dati del censimento statunitense. Le sottoscale individuali hanno una buona affidabilità (coerenza interna), con l'eccezione della sottoscala Atipicità del BASC-PRS e delle sottoscale Somatizzazione e Autosufficienza del BASC-SRS (r< .70). Il BASC ha anche dimostrato la validità dei criteri e dei costrutti. I punteggi T per le sottoscale dell'ansia (parent- e self-report) saranno usati come misura dell'ansia di tratto per l'analisi.

6. STICSA-C

   Lo State-Trait Inventory for Cognitive and Somatic Anxiety, Child Version (STICSA-C) è stato adattato dalla versione per adulti della misura, la STICSA. (37) Lo STICSA-C è composto da due scale self-report separate, ciascuna con 21 item, per misurare due distinti concetti di ansia: ansia di stato e ansia di tratto. Quest'ultimo chiede ai bambini di rispondere agli item indicando come si sentono, in generale; il primo chiede ai bambini di rispondere su come si sentono in questo momento, proprio in questo momento. Unici per lo STICSA-C, gli item di ciascuna scala valutano in modo distinto e stabile le manifestazioni cognitive e somatiche dell'ansia. Ai bambini viene chiesto di fornire le loro risposte utilizzando una scala a 4 punti (vale a dire, da "Mai" a "Quasi sempre" nel modulo Tratto, e da "Per niente" a Molto" nel modulo Stato). Le sottoscale somatiche e cognitive della scala di tratto STICSA-C saranno utilizzate come misura dell'ansia di tratto, mentre queste sottoscale della scala di stato saranno utilizzate come misura dell'ansia di stato, nell'analisi statistica.

7. Gravità dei sintomi gastrointestinali

   La gravità dei sintomi sarà determinata rispettivamente per dolore, nausea e gonfiore su scale a 10 punti con 0 = nessuno e 10 = più grave con la scala di risposta globale.

8. Istologia

Per coloro che si sottopongono a endoscopia, le biopsie di routine ottenute come parte delle cure abituali saranno valutate in cieco per la densità degli eosinofili. La valutazione immunoistochimica del tessuto sarà eseguita utilizzando anti-triptasi e anti-CD4. Le densità cellulari per gli eosinofili, le cellule triptasi-positive e le cellule CD4-positive, rispettivamente, saranno determinate rispettivamente per i campioni prelevati dall'antro gastrico e dal bulbo duodenale. Verranno valutati un minimo di cinque campi ad alta potenza con la determinazione rispettivamente della conta cellulare media e di picco. Le diagnosi patologiche saranno determinate dalla valutazione del patologo come parte delle cure di routine.