Kortikotropiinia vapauttavan hormonin (CRH) vaste lapsilla, joilla on toiminnallinen dyspepsia

Tämän tutkimuksen ensisijaisena tarkoituksena on arvioida, onko CRH:n (Corticotropin Releasing Hormone) vasteessa eroja FD:tä (Functional Dyspepsia) sairastavilla lapsilla ja nuorilla verrokkeihin verrattuna. Lisäksi aiomme tutkia yhteyksiä CRH-vasteen, tulehduksellisten sytokiinien, tila- ja piirreahdistuksen ja itse ilmoittamien oireiden välillä.

Tutkimuksen erityistavoitteet ovat:

1. Sen määrittämiseksi, eroavatko muutokset seerumin sytokiiniprofiileissa, sydämen lyöntitiheyden vaihtelussa, stressiprofiilin parametreissa, tilan ja luonteenomaisen ahdistuneisuuden sekä itse ilmoittamien oireiden välillä FD-potilaiden ja kontrollien välillä CRH-infuusion jälkeen.
2. Sen määrittämiseksi, eroavatko muutokset seerumin ACTH:ssa (adrenokortikotrooppinen hormoni) tai kortisolissa CRH-infuusion jälkeen FD-potilaiden ja kontrollien välillä tai FD-potilaiden ahdistuneisuuden tilan tai piirteen suuruuden funktiona.

Tämä tutkimus on yhden sivuston pilottitutkimus.

Biokemiallista vastetta CRH-stimulaatioon tutkitaan jokaiselle tässä kuvatulle sytokiinille, välittäjälle ja hormonille laskemalla niiden muodostumisnopeus, maksimipitoisuus (Cmax), maksimipitoisuuteen kuluva aika (Tmax), kehon kokonaisaltistus (AUC) ja palautumisnopeus. (sopivuuden mukaan). Farmakokineettisiä analyyseja sovelletaan tietoihin, joissa pitoisuuden ja ajan profiilissa on selkeät nousevat ja laskevat vaiheet. Pitoisuus vs. aika -tiedot sovitetaan käyrälle käyttämällä kuorinta-algoritmia alkuperäisten polyeksponentiaalisten parametrien arvioiden luomiseksi. Lopulliset arviot näennäisestä palautumisnopeudesta määritetään iteratiivisella, epälineaarisella painotetulla pienimmän neliösumman regressioalgoritmilla. Farmakokineettisen mallin sopivuuden arviointi tehdään käyttämällä vakiokriteereitä (esim. Akaiken ja Schwartzin tietokriteerit, tavoitefunktio ja estimoitujen parametrien variaatiokertoimet), painotettujen jäännösestimaattien jakaumaa sekä havaitun ja ennustetun välistä yhteyttä. pitoisuudet. Mallista riippumattomat farmakokineettiset parametrit lasketaan käyttämällä standardi (eli tilastollinen momenttiteoria) tekniikoita. Yksilöllinen Cmax ja Tmax arvioidaan tarkastelemalla havaittuja plasmapitoisuuksia ajan funktiona. Plasman pitoisuus vs. aika -käyrän alla oleva pinta-ala määritetään käyttämällä sekoitettua log-lineaarista puolisuunnikkaan muotoista sääntöä (AUC:n ekstrapolointia äärettömään ei suoriteta). Nämä analyysit suoritetaan Kinetica v5.0:ssa (ThermoElectron, Philadelphia, PA). Jatkuvien vastemuuttujien tapausten ja kontrollien välisiä eroja verrataan käyttämällä kaksipuolista riippumatonta otoksen t-testiä. Jatkuvien vastemuuttujien välisiä suhteita arvioidaan yksimuuttujalla varianssianalyysillä, lineaarisella ja epälineaarisella regressiotekniikalla. Kategorisia potilastekijöitä ja vastemuuttujia verrataan Fisherin tarkkaan testiin 2 x 2 -ristitaulukossa. Kaikki tilastolliset analyysit suoritetaan käyttämällä SSPS-ohjelmistopakettia (versio 15.0, SPSS Inc., Chicago, IL).

Otoskoko

Otoskoko 12 kullekin ryhmälle (kontrollit ja FD-potilaat) valittiin. Kaksitoista potilasta ryhmää kohden tarjoaa 99 %:n tehon havaita 1,5-kertainen ACTH-eritys FD-potilailla verrattuna kontrolleihin, joiden keskihajonnan oletetaan olevan 20 % kahden aikaisemman aikuistutkimuksen perusteella (molemmat havaitsivat noin 2-kertaisen lisäyksen ). Teho voi olla pienempi toissijaisessa analyysissä, mutta tätä pidetään hyväksyttävänä tämän tutkimuksen pilottiluonteen vuoksi.

Mukana on kaksi ryhmää, jotka koostuvat henkilöistä, jotka ovat olleet vatsakipuklinikalla vähintään 8 viikkoa kestäneen vatsakipujen vuoksi ja jotka täyttävät FD:n oireisiin perustuvat kriteerit ja joille on määrä tehdä endoskopia ja kontrollit ja joilla ei ole lähiaikoina ollut vatsakipuja. .

Molemmat ryhmät käyvät läpi samat testit/toimenpiteet.

Osallistujat paastoavat vähintään 8 tuntia ennen arviointia, joka alkaa klo 8-10. Yli 10-vuotiaille naispuolisille osallistujille annetaan UCG normaalikäytäntönä ennen lääkkeiden tai lääkkeiden saamista. Vanhempi ja lapsi suorittavat BASC-2:n ja STICSA-C:n tila- ja ominaisuusversiot. Biofeedback-stressiprofiili tehdään. Seuraavaksi asetetaan IV-katetri ja osallistujan annetaan rentoutua 30 minuuttia ennen tutkimuksen seuraavaa osaa. Tämän jälkeen osallistujan sykettä seurataan 30 minuutin ajan ennen CRH-stimulaatiotestiä. 30 minuutin perusjakson jälkeen otetaan verinäyte seerumin sytokiinien, ACTH:n, kortisolin ja CBG:n varalta. Osallistuja arvioi vatsakivun, pahoinvoinnin ja turvotuksen vakavuuden 10 pisteen asteikoilla.

CRH-stimulaatiotestissä kortikoreliinia (ihmisen CRH:n analogi) annetaan annoksella 1 mikrogrammaa painokiloa kohden (enintään 100 mikrogrammaan) 1 minuutin aikana. Verinäytteet otetaan 15 minuutin välein 60 minuutin ajan ACTH-, kortisoli- ja CBG-pitoisuuksien määrittämiseksi. Seuraavat tiedot otetaan tai tallennetaan 15, 30 ja 60 minuutin kohdalla: verinäytteitä sytokiinipitoisuuksista, arvioita (10 pisteen asteikolla) vatsakipuista, pahoinvointia ja turvotusta, stressiprofiiliparametrit ja itse ilmoittama ahdistuneisuus (eli STICSA-C Mieliallasi tällä hetkellä). Sykettä seurataan 60 minuutin ajan.

CRH-stimulaatiotesti on rutiininomaisesti käytetty diagnostinen testi endokriinisessa. Se ei kuitenkaan ole rutiinia kummallekaan tämän tutkimuksen osallistujaryhmästä.

Toimenpiteitä

1. Sykevaihtelu (HRV)

   Elektrokardiogrammi tallennetaan ja HRV arvioidaan käyttämällä I-330 C2 Physiograph -laitetta (J & J Engineering, Poulsbo, WA) ja Window USE Physiolab -ohjelmistoa. MC-5SGW-elektrodikaapeleita käytetään yhdistämään 2 ranneelektrodia (+ vasemmalla) ja EDR-maahan, joka asetetaan sormelle.

   HRV-signaali johdetaan EKG-tiedoista. Kokonaistehospektrianalyysiä sovelletaan HRV-signaaliin sympatovaalisten parametrien erottamiseksi: teho matalataajuuksisella (LF) ja teho korkeataajuudella (HF). LF määritellään käyrän alla olevaksi alueeksi taajuusalueella 0,04-0,15 Hz ja HF määritellään käyrän alla olevaksi alueeksi taajuusalueella 0,15-0,50 Hz. Teho LF-kaistalla (0,04-0,15 Hz) edustaa pääasiassa sympaattista aktiivisuutta ja teho HF-kaistalla (0,15-0,5 Hz) HRV-tehospektrissä edustaa puhtaasti parasympaattista tai vagaalista aktiivisuutta. LF:n ja HF:n välinen suhde lasketaan myös sympathovagaalisen tasapainon mittana.

2. Stressiprofiili

   Biofeedback-stressiprofiilin lukemat tallennetaan yhdellä I-330 C2 Physiographilla (J & J Engineering, Poulsbo, WA) käyttäen Windows USE 3 Physiolab -ohjelmistoa.

   Seuraavia menetelmiä seurataan kaikilla potilailla:

   1. Pintaelektromyografi (sEMG) - lukemat mitataan mikrovoltteina (mcv) käyttämällä laajakaistaista sijoittelua otsaluun; normaalin ihon valmistelun jälkeen esigeeliytetty hopea/hopeakloridi Red Dot patch -anturit sijoitetaan sormen leveydelle kunkin kulmakarvan yläpuolelle ja kiinnitetään MV-1L sEMG -kaapeliin CL 50 alligaattoriklipsien kautta. sEMG-anturit sijoitetaan myös molempien ranteiden pulssipisteisiin tarkkailemaan ja palauttamaan sydämen sykettä.
   2. Perifeerinen ihon lämpötila (TEMP) – mitataan Fahrenheit-asteina (F.) termistorilla (RV-5 TEMP/EDR-anturi), joka on kiinnitetty osallistujan keskisormen tyynyyn (tai korvaavaan 3. numeroon) hallitsevassa kädessä.
   3. Elektrodermaalinen vaste (EDR) - ihon johtavuusaktiivisuus (SCA) mitataan mikroohmeina (µohmeina) (RV-5 TEMP/EDR-anturi), joka on kiinnitetty hallitsevaan etusormeen SE 35 EDG 8 mm:n snap-tyylisellä hopea/hopeakloridilevyllä. upotettu tarrakiinnitykseen, jossa on suolaliuospohjaista geeliä levyssä ihokosketuksen varmistamiseksi.

3. Plasman proteiinit (sytokiinit / välittäjät / hormonit)

   Noin 39 ml verta kerätään IV-katetrin kautta plasman proteiinimäärityksiä varten, mukaan lukien TNF-α, IL-4, IL-5, IL-8, eotaksiini-3, MCP-1, MMP-9, ECP, MBP, kortisoli. , ACTH ja CBG. Plasman proteiinit mitataan kaupallisesti saatavilla immunomäärityspakkauksilla. Taulukossa 1 on erittely kutakin aikapistettä kohden kerättävästä verimäärästä. Taulukossa 2 on esitetty näytevaatimukset ja testauslaboratorio.

4. Ilmainen plasma kortisoli

   Vapaa plasman kortisoli lasketaan seuraavalla kaavalla:

   U = √ Z2 + 0,0122 C - Z(keskiarvo)M jossa U = sitoutumattoman kortisolin molaarinen pitoisuus, C = kokonaiskortisolin molaarinen pitoisuus, T = CBG:n molaarinen pitoisuus ja Z = 0,0167 + 0,182 (T-C) (keskiarvo) M

   (0,0167 ja 0,182 ovat vakioita CBG:n affiniteetille kortisoliin 37 asteessa ja albumiinin sitoutuneelle kortisoliin sitoutumattomaan kortisoliin, vastaavasti.)

5. BASC-2-profiili Osallistuja ja toinen vanhempi täydentävät lasten käyttäytymisarviointiasteikon (BASC-2) vanhemman ja lapsiversion. BASC-2 on objektiivinen nuorten psykologisen toiminnan luokitusjärjestelmä, joka tarjoaa standardoituja kuvauksia ongelmista ja osaamisesta. Lapsille (8-11-vuotiaille), nuorille (12-18-vuotiaille) ja vanhemmille (eri versio 6-11-vuotiaille ja 12-18-vuotiaille lapsille) on eri versioita. (36) Raakapisteet on standardoitu T-pisteiksi (M=50, SD=10) perustuen 3 483 4–18-vuotiaan lapsen normatiiviseen otokseen, jotka on ositettu Yhdysvaltain väestönlaskentatietojen mukaan. Yksittäisten aliasteikkojen luotettavuus (sisäinen johdonmukaisuus) on hyvä, lukuun ottamatta BASC-PRS:n epätyypillisyyden alaasteikkoa ja BASC-SRS:n somatisaatio- ja itseluottamusasteikkoja (r<.70). BASC on myös osoittanut kriteeriin liittyvän ja konstruktion validiteetin. Ahdistuneisuuden ala-asteikkojen T-pisteitä (vanhemmat ja omat ilmoitukset) käytetään ominaisuusahdistuksen mittana analyysissä.

6. STICSA-C

   Kognitiivisen ja somaattisen ahdistuksen tila-ominaisuusluettelo, lasten versio (STICSA-C) on mukautettu toimenpiteen aikuisten versiosta, STICSA:sta. (37) STICSA-C koostuu kahdesta erillisestä itseraportointiasteikosta, joissa kussakin on 21 kohtaa ja jotka mittaavat kahta erillistä ahdistuneisuuskäsitettä: tilaahdistus ja ominaisuusahdistus. Jälkimmäinen pyytää lapsia vastaamaan asioihin ilmaisemalla, miltä heistä yleensä tuntuu; edellinen pyytää lapsia vastaamaan siitä, miltä heistä tuntuu juuri nyt, juuri tällä hetkellä. Ainutlaatuista STICSA-C:lle, kunkin asteikon kohteet arvioivat selvästi ja vakaasti ahdistuksen kognitiivisia ja somaattisia ilmenemismuotoja. Lapsia pyydetään antamaan vastauksensa 4-pisteen asteikolla (eli "Ei koskaan" - "Melkein aina" Piirre-lomakkeessa ja "Ei ollenkaan" - "Erittäin" Tila-lomakkeessa). STICSA-C:n ominaisuusasteikon somaattisia ja kognitiivisia alaasteikkoja käytetään ominaisuusahdistuksen mittana, kun taas näitä tila-asteikon ala-asteikkoja käytetään tilaahdistuksen mittana tilastollisessa analyysissä.

7. GI-oireiden vakavuus

   Oireiden vakavuus määritetään kivun, pahoinvoinnin ja turvotuksen osalta 10 pisteen asteikolla, jossa 0 = ei mitään ja 10 = vakavin Global Response Scale -asteikolla.

8. Histologia

Niille, joille tehdään endoskopia, tavanomaisen hoidon osana otetut rutiinibiopsiat arvioidaan sokeutetulla tavalla eosinofiilien tiheyden suhteen. Kudoksen immunohistokemiallinen arviointi suoritetaan käyttämällä anti-tryptaasia ja anti-CD4:ää. Eosinofiilien, tryptaasipositiivisten solujen ja CD4-positiivisten solujen solutiheydet määritetään mahalaukun antrumista ja pohjukaissuolen sipulista otettujen näytteiden osalta. Vähintään viisi suuren tehon kenttää arvioidaan määrittämällä vastaavasti keskimääräinen ja huippusolumäärä. Patologiset diagnoosit määritetään patologin arvioinnissa osana rutiinihoitoa.