Corticotropin-Releasing-Hormon (CRH)-Reaktionsfähigkeit bei Kindern mit funktioneller Dyspepsie

Der Hauptzweck dieser Studie besteht darin, zu bewerten, ob es Unterschiede in der Reaktion auf CRH (Corticotropin Releasing Hormone) bei Kindern und Jugendlichen mit FD (Funktionelle Dyspepsie) im Vergleich zu Kontrollen gibt. Darüber hinaus beabsichtigen wir, die Beziehungen zwischen CRH-Reaktionsfähigkeit, entzündlichen Zytokinen, Zustands- und Eigenschaftsangst und selbstberichteten Symptomen zu untersuchen.

Die konkreten Ziele des Studiums sind:

1. Um zu bestimmen, ob sich Änderungen der Serumzytokinprofile, der Herzfrequenzvariabilität, der Stressprofilparameter, der Zustands- und Eigenschaftsangst und der selbstberichteten Symptome zwischen Patienten mit FD und Kontrollen nach einer CRH-Infusion unterscheiden.
2. Um zu bestimmen, ob sich Änderungen im Serum-ACTH (Adreno-corticotropes Hormon) oder Cortisol nach einer CRH-Infusion zwischen Patienten mit FD und Kontrollen oder als Funktion des Ausmaßes der Zustands- oder Eigenschaftsangst bei FD-Patienten unterscheiden.

Diese Studie ist eine Einzelstandort-Pilotstudie.

Die biochemische Reaktion auf die CRH-Stimulation wird für jedes der hier aufgeführten Zytokine, Mediatoren und Hormone untersucht, indem ihre Bildungsrate, maximale Konzentration (Cmax), Zeit bis zur maximalen Konzentration (Tmax), Gesamtkörperexposition (AUC) und Erholungsrate berechnet werden (soweit zutreffend). Pharmakokinetische Analysen werden auf Daten angewendet, bei denen es klare ansteigende und absteigende Phasen im Konzentrations-gegen-Zeit-Profil gibt. Konzentrations-gegen-Zeit-Daten werden unter Verwendung eines Peeling-Algorithmus kurvenangepasst, um anfängliche polyexponentielle Parameterschätzungen zu generieren. Endgültige Schätzungen der scheinbaren Wiederherstellungsrate werden aus einem iterativen, nichtlinearen gewichteten Regressionsalgorithmus der kleinsten Quadrate bestimmt. Die Bewertung der Anpassungsgüte für das pharmakokinetische Modell erfolgt anhand von Standardkriterien (z. B. Akaike- und Schwartz-Informationskriterien, objektive Funktion und Variationskoeffizienten für geschätzte Parameter), der Verteilung gewichteter Residualschätzungen und der Assoziation zwischen dem Beobachteten und dem Vorausgesagten Konzentrationen. Modellunabhängige pharmakokinetische Parameter werden unter Verwendung von Standardtechniken (d. h. der statistischen Momententheorie) berechnet. Individuelle Cmax und Tmax werden durch Untersuchung der beobachteten Plasmakonzentration im Vergleich zur Zeit abgeschätzt. Die Fläche unter der Plasmakonzentrations-Zeit-Kurve wird nach der gemischt logarithmisch-linearen Trapezregel bestimmt (es wird keine Extrapolation der AUC ins Unendliche durchgeführt). Diese Analysen werden in Kinetica v5.0 (ThermoElectron, Philadelphia, PA) durchgeführt. Unterschiede zwischen Fällen und Kontrollen bei kontinuierlichen Response-Variablen werden unter Verwendung eines zweiseitigen unabhängigen Stichproben-t-Tests verglichen. Beziehungen zwischen kontinuierlichen Antwortvariablen werden durch univariate Varianzanalyse, lineare und nichtlineare Regressionstechniken bewertet. Kategoriale Patientenfaktoren und Antwortvariablen werden mit dem exakten Fisher-Test in einer 2 x 2-Kreuztabelle verglichen. Alle statistischen Analysen werden unter Verwendung des SSPS-Softwarepakets (Version 15.0, SPSS Inc., Chicago, IL) durchgeführt.

Probengröße

Eine Stichprobengröße von 12 für jede Gruppe (Kontrollen und FD-Patienten) wurde gewählt. Zwölf Patienten pro Gruppe bieten eine 99 %ige Aussagekraft, um eine 1,5-fach höhere ACTH-Sekretion bei FD-Patienten im Vergleich zu Kontrollen zu erkennen, wobei die Standardabweichung auf 20 % basierend auf 2 früheren Studien mit Erwachsenen angenommen wird (beide haben eine ungefähr 2-fache Zunahme festgestellt ). Die Aussagekraft für die Sekundäranalyse kann geringer sein, dies wird jedoch angesichts des Pilotcharakters dieser Studie als akzeptabel angesehen.

Es wird zwei Gruppen geben, die aus Probanden bestehen, die in der Abdominal Pain Clinic wegen Bauchschmerzen von mindestens 8 Wochen Dauer gesehen wurden und die symptombasierten Kriterien für FD erfüllen und für Endoskopie und Kontrollen vorgesehen sind, die keine aktuelle Vorgeschichte von Bauchschmerzen haben .

Beide Gruppen werden denselben Tests/Verfahren unterzogen.

Die Teilnehmer fasten mindestens 8 Stunden vor der Bewertung, die zwischen 8 und 10 Uhr beginnt. Teilnehmerinnen > 10 Jahre erhalten standardmäßig eine UCG, bevor sie Medikamente oder Medikamente erhalten. Der Elternteil und das Kind vervollständigen den BASC-2 und die State- und Trait-Versionen des STICSA-C. Es wird ein Biofeedback-Belastungsprofil erstellt. Als nächstes wird ein IV-Katheter platziert und der Teilnehmer darf sich vor dem nächsten Teil der Studie 30 Minuten lang entspannen. Der Teilnehmer wird dann vor dem CRH-Stimulationstest einer 30-minütigen Grundlinienüberwachung der Herzfrequenz unterzogen. Nach der 30-minütigen Basisperiode wird eine Blutprobe für Serumzytokine, ACTH, Cortisol und CBG entnommen. Der Teilnehmer bewertet die Schwere von Bauchschmerzen, Übelkeit bzw. Blähungen auf einer 10-Punkte-Skala.

Für den CRH-Stimulationstest wird Corticorelin (ein Analogon von humanem CRH) in einer Dosis von 1 µg pro kg Körpergewicht (bis maximal 100 µg) über 1 Minute verabreicht. Zur Bestimmung der ACTH-, Cortisol- und CBG-Konzentrationen werden 60 Minuten lang in 15-Minuten-Intervallen Blutproben entnommen. Folgendes wird nach 15, 30 und 60 Minuten erhalten oder aufgezeichnet: Blutproben für Zytokinkonzentrationen, Bewertungen (auf einer 10-Punkte-Skala) von Bauchschmerzen, Übelkeit und Blähungen, Stressprofilparameter und selbstberichteter Angstzustand (d.h. STICSA-C Ihre Stimmung in diesem Moment). Die Herzfrequenzüberwachung wird für die Dauer des 60-Minuten-Zeitraums durchgeführt.

Der CRH-Stimulationstest ist ein routinemäßig verwendeter diagnostischer Test in der Endokrinologie. Es ist jedoch für keine der beiden Teilnehmergruppen dieser Studie Routine.

Mittel

1. Herzfrequenzvariabilität (HRV)

   Das Elektrokardiogramm wird aufgezeichnet und die HRV unter Verwendung eines I-330 C2 Physiograph (J & J Engineering, Poulsbo, WA) und der Window USE Physiolab-Software bewertet. MC-5SGW-Elektrodenkabel werden zum Anschluss an 2 Handgelenkselektroden (+ links) und eine EDR-Erdung verwendet, die an einem Finger angebracht wird.

   Das HRV-Signal wird aus den EKG-Daten abgeleitet. Eine Gesamtleistungsspektralanalyse wird auf das HRV-Signal angewendet, um die sympathovagalen Parameter zu extrahieren: Leistung in Niederfrequenz (LF) und Leistung in Hochfrequenz (HF). LF ist definiert als die Fläche unter der Kurve im Frequenzbereich von 0,04–0,15 Hz und HF ist definiert als die Fläche unter der Kurve im Frequenzbereich von 0,15–0,50 Hertz. Die Leistung im LF-Band (0,04–0,15 Hz) repräsentiert hauptsächlich sympathische Aktivität und die Leistung im HF-Band (0,15–0,5 Hz) des HRV-Leistungsspektrums repräsentiert rein parasympathische oder vagale Aktivität. Das LF-zu-HF-Verhältnis wird auch als Maß für die sympathovagale Balance berechnet.

2. Belastungsprofil

   Die Messwerte des Biofeedback-Belastungsprofils werden mit einem einzelnen I-330 C2 Physiograph (J & J Engineering, Poulsbo, WA) unter Verwendung der Windows USE 3 Physiolab-Software aufgezeichnet.

   Die folgenden Modalitäten werden bei allen Patienten überwacht:

   1. Oberflächenelektromyograph (sEMG) – Messwerte werden in Mikrovolt (mcv) unter Verwendung einer Breitbandplatzierung auf dem Frontalis gemessen; Nach der standardmäßigen Hautvorbereitung werden vorgelierte Red Dot Patch-Sensoren aus Silber/Silberchlorid eine Fingerbreite über jeder Augenbraue platziert und über CL 50-Krokodilklemmen an einem MV-1L sEMG-Kabel befestigt. sEMG-Sensoren werden auch an den Pulspunkten an beiden Handgelenken platziert, um den Herzschlag zu überwachen und Feedback zu geben.
   2. Die periphere Hauttemperatur (TEMP) wird in Grad Fahrenheit (F.) über einen Thermistor (RV-5 TEMP/EDR-Sensor) gemessen, der an der Fläche des Mittelfingers des Teilnehmers (oder der 3. Ziffer des Ersatzes) an der dominanten Hand befestigt ist.
   3. Elektrodermale Reaktion (EDR) – Die Hautleitfähigkeitsaktivität (SCA) wird in Mikroohm (µOhm) mit einem (RV-5 TEMP/EDR-Sensor) gemessen, der mit einer SE 35 EDG 8-mm-Schnappscheibe aus Silber/Silberchlorid am dominanten Zeigefinger befestigt ist eingebettet in einen Klettverschluss mit Gel auf Kochsalzbasis auf der Scheibe, um Hautkontakt zu gewährleisten.

3. Plasmaproteine ​​(Zytokine/ Mediatoren/ Hormone)

   Ungefähr 39 ml Blut werden durch den IV-Katheter für Plasmaproteinbestimmungen gesammelt, einschließlich TNF-α, IL-4, IL-5, IL-8, Eotaxin-3, MCP-1, MMP-9, ECP, MBP, Cortisol , ACTH und CBG. Plasmaproteine ​​werden mit im Handel erhältlichen Immunoassay-Kits gemessen. Tabelle 1 zeigt eine Aufschlüsselung der Blutmenge, die zu jedem Zeitpunkt gesammelt wird. Tabelle 2 zeigt Musteranforderungen und Prüflabor.

4. Freies Plasma-Cortisol

   Freies Plasmacortisol wird anhand der folgenden Formel berechnet:

   U = √ Z2 + 0,0122 C - Z (Mittelwert) M Wobei U = molare Konzentration von ungebundenem Cortisol, C = molare Konzentration von Gesamtcortisol, T = molare Konzentration von CBG und Z = 0,0167 + 0,182 (T-C) (Mittelwert) M

   (0,0167 und 0,182 sind Konstanten für die Affinität von CBG zu Cortisol bei 37 Grad C bzw. das Verhältnis von albumingebundenem zu ungebundenem Cortisol.)

5. BASC-2-Profil Die Eltern- und Kinderversionen der Verhaltensbewertungsskala für Kinder – Zweite Ausgabe (BASC-2) werden vom Teilnehmer bzw. einem Elternteil ausgefüllt. Das BASC-2 ist ein objektives Bewertungssystem der psychischen Funktionsfähigkeit bei Jugendlichen, das standardisierte Beschreibungen von Problemen und Kompetenzen liefert. Es gibt unterschiedliche Versionen für Kinder (8–11 Jahre), Jugendliche (12–18 Jahre) und Eltern (unterschiedliche Versionen für Personen mit Kindern im Alter von 6–11 und 12–18 Jahren). (36) Die Rohwerte sind als T-Werte (M=50, SD=10) standardisiert, basierend auf einer normativen Stichprobe von 3.483 Kindern im Alter von 4 bis 18 Jahren, stratifiziert nach US-Volkszählungsdaten. Einzelne Subskalen haben eine gute Reliabilität (interne Konsistenz), mit Ausnahme der Subskala Atypischität auf der BASC-PRS und der Subskalen Somatisierung und Selbstvertrauen auf der BASC-SRS (r < 0,70). Die BASC hat auch kriteriumsbezogene und Konstruktvalidität gezeigt. Die T-Werte für die Angst-Subskalen (Eltern- und Selbstbericht) werden als Maß für die Eigenschaftsangst für die Analyse verwendet.

6. STICSA-C

   Das State-Trait Inventory for Cognitive and Somatic Anxiety, Child Version (STICSA-C) wurde von der Erwachsenenversion der Maßnahme, der STICSA, übernommen. (37) Die STICSA-C besteht aus zwei separaten Selbstbeurteilungsskalen mit jeweils 21 Items zur Messung von zwei unterschiedlichen Angstkonzepten: Zustandsangst und Eigenschaftsangst. Letzteres fordert die Kinder auf, auf Items zu antworten, indem sie angeben, wie sie sich im Allgemeinen fühlen; Ersteres bittet die Kinder zu antworten, wie sie sich gerade in diesem Moment fühlen. Einzigartig bei STICSA-C, bewerten Items auf jeder Skala eindeutig und stabil kognitive und somatische Manifestationen von Angst. Die Kinder werden gebeten, ihre Antworten auf einer 4-Punkte-Skala anzugeben (d. h. von „nie“ bis „fast immer“ auf dem Eigenschaftsformular und von „überhaupt nicht“ bis sehr“ auf dem Zustandsformular). Die somatischen und kognitiven Subskalen der STICSA-C-Merkmalsskala werden als Maß für Trait-Angst verwendet, während diese Subskalen der State-Skala als Maß für State-Angst in der statistischen Analyse verwendet werden.

7. Schweregrad der GI-Symptome

   Die Schwere der Symptome wird für Schmerzen, Übelkeit bzw. Blähungen auf 10-Punkte-Skalen bestimmt, wobei 0 = keine und 10 = am stärksten mit der Global Response Scale.

8. Histologie

Für diejenigen, die sich einer Endoskopie unterziehen, werden routinemäßige Biopsien, die im Rahmen der üblichen Versorgung entnommen werden, verblindet auf Eosinophilendichte ausgewertet. Die immunhistochemische Auswertung des Gewebes wird unter Verwendung von Anti-Tryptase und Anti-CD4 durchgeführt. Die Zelldichten für Eosinophile, Tryptase-positive Zellen bzw. CD4-positive Zellen werden für Proben aus der Magenhöhle bzw. dem Bulbus duodeni bestimmt. Mindestens fünf Hochleistungsfelder werden mit der Bestimmung der mittleren bzw. maximalen Zellzahl bewertet. Pathologische Diagnosen werden im Rahmen der routinemäßigen Versorgung durch einen Pathologen festgestellt.