Kortikotropin-felszabadító hormon (CRH) válaszkészség funkcionális dyspepsiában szenvedő gyermekeknél

Ennek a vizsgálatnak az elsődleges célja annak értékelése, hogy vannak-e különbségek a CRH (Corticotropin Releasing Hormone) válaszkészségében FD-ben (funkcionális dyspepsiában) szenvedő gyermekek és serdülők esetében a kontrollokhoz képest. Továbbá fel kívánjuk tárni az összefüggéseket a CRH-reszponzivitás, a gyulladásos citokinek, az állapot- és vonásszorongás, valamint a saját maguk által jelentett tünetek között.

A tanulmány konkrét céljai a következők:

1. Annak megállapítására, hogy a szérum citokinprofilok változásai, a szívfrekvencia variabilitása, a stresszprofil paraméterei, az állapot- és szorongásos állapotok, valamint az önbeszámolt tünetek különböznek-e az FD-ben szenvedő betegek és a kontrollcsoportok között a CRH infúziót követően.
2. Annak meghatározására, hogy a szérum ACTH (adreno-kortikotrop hormon) vagy kortizol változásai a CRH infúziót követően különböznek-e az FD-ben szenvedő betegek és a kontrollok között, vagy az állapot vagy a szorongás jellemzőinek függvényében az FD-betegek között.

Ez a tanulmány egy helyszíni kísérleti tanulmány.

A CRH-stimulációra adott biokémiai választ az itt részletezett mindegyik citokin, mediátor és hormon esetében megvizsgáljuk a képződési sebességük, a maximális koncentrációjuk (Cmax), a maximális koncentrációig eltelt idő (Tmax), a teljes testexpozíció (AUC) és a gyógyulási sebességük kiszámításával. (amennyire releváns). Farmakokinetikai elemzéseket alkalmaznak azokra az adatokra, ahol egyértelmű növekvő és csökkenő fázisok vannak a koncentráció-idő profilban. A koncentráció és idő közötti adatok görbeillesztésre kerülnek egy leválasztó algoritmus segítségével a kezdeti poliexponenciális paraméterbecslések generálására. A látszólagos helyreállítási ráta végső becslését egy iteratív, nemlineáris súlyozott legkisebb négyzetek regressziós algoritmusával határozzuk meg. A farmakokinetikai modellhez való illeszkedés jóságának értékelése standard kritériumok (például Akaike és Schwartz információs kritériumok, célfüggvény és a becsült paraméterek variációs együtthatói), a súlyozott reziduális becslések eloszlása, valamint a megfigyelt és előrejelzett összefüggések alapján történik. koncentrációk. A modelltől független farmakokinetikai paramétereket standard (azaz statisztikai momentumelmélet) technikákkal számítjuk ki. Az egyéni Cmax és Tmax a megfigyelt plazmakoncentráció idő függvényében történő vizsgálatával kerül becslésre. A plazmakoncentráció idő függvényében görbe alatti területet a vegyes log-lineáris trapézszabály segítségével határozzák meg (az AUC végtelenre történő extrapolálása nem történik meg). Ezeket az elemzéseket a Kinetica v5.0 (ThermoElectron, Philadelphia, PA) verziójában hajtják végre. A folyamatos válaszváltozókra vonatkozó esetek és kontrollok közötti különbségeket kétoldalú független t-próbák segítségével hasonlítjuk össze. A folyamatos válaszváltozók közötti kapcsolatokat egyváltozós varianciaanalízissel, lineáris és nemlineáris regressziós technikákkal értékeljük. A kategorikus betegtényezőket és válaszváltozókat a Fisher-féle egzakt teszttel egy 2 x 2-es kereszttáblázaton hasonlítjuk össze. Valamennyi statisztikai elemzés az SSPS szoftvercsomag (15.0-s verzió, SPSS Inc., Chicago, IL) használatával történik.

Minta nagysága

Minden csoporthoz (kontroll és FD-betegek) 12 mintát választottunk. Csoportonként 12 beteg 99%-os teljesítményt biztosít a 1,5-szer nagyobb ACTH-szekréció kimutatására FD-betegeknél a kontrollokhoz képest, ahol a standard eltérés 20%-os volt 2 korábbi felnőttvizsgálat alapján (mindkettő körülbelül 2-szeres növekedést mutatott ki) ). A teljesítmény alacsonyabb lehet a másodlagos elemzéshez, azonban ez elfogadhatónak tekinthető a tanulmány kísérleti jellege miatt.

Két csoportot alkotnak majd azok az alanyok, akiket a Hasi Fájdalom Klinikán legalább 8 hetes hasi fájdalom miatt láttak, és akik megfelelnek az FD tüneti kritériumainak, és endoszkópiára és kontrollokra tervezik, akiknek a közelmúltban nem volt hasi fájdalma. .

Mindkét csoport ugyanazon a teszteken/eljárásokon megy keresztül.

A résztvevők legalább 8 órát böjtölnek az értékelés előtt, amely reggel 8 és 10 óra között kezdődik. A 10 évesnél idősebb női résztvevők szokásos gyakorlatként UCG-t kapnak, mielőtt bármilyen gyógyszert vagy gyógyszert kapnának. A szülő és a gyermek elvégzi a BASC-2-t, valamint a STICSA-C állapot- és jellemzőváltozatait. Biofeedback stresszprofil készül. Ezután egy IV katétert helyeznek be, és a résztvevőt 30 percig pihentetik a vizsgálat következő része előtt. A résztvevő ezután 30 perces alapvonali szívfrekvencia-monitorozáson esik át a CRH stimulációs teszt előtt. A 30 perces kiindulási időszakot követően vérmintát vesznek a szérum citokinek, ACTH, kortizol és CBG kimutatására. A résztvevő 10 pontos skálán értékeli a hasi fájdalom, hányinger és puffadás súlyosságát.

A CRH-stimulációs teszthez a corticolelint (a humán CRH analógját) 1 mcg/testtömeg-kilogramm dózisban (maximum 100 mcg-ig) adják be 1 perc alatt. 15 perces időközönként 60 percig vérmintákat vesznek az ACTH, kortizol és CBG koncentrációjának meghatározásához. A következőket veszik vagy rögzítik 15, 30 és 60 percben: vérminta citokinkoncentrációra, hasi fájdalom, hányinger és puffadás értékelése (10 pontos skálán), stresszprofil paraméterek és önbevallott szorongás. (azaz. STICSA-C Hangulatod ebben a pillanatban). A 60 perces periódus időtartama alatt pulzusfigyelést végeznek.

A CRH stimulációs teszt egy rutinszerűen alkalmazott diagnosztikai teszt az endokrin rendszerben. Ez azonban nem rutin a jelen tanulmány résztvevőinek egyik csoportja számára sem.

Intézkedések

1. Szívritmus-variabilitás (HRV)

   Az elektrokardiogramot rögzítik és a HRV-t egy I-330 C2 Physiograph (J & J Engineering, Poulsbo, WA) és a Window USE Physiolab szoftver segítségével értékelik. Az MC-5SGW elektródakábeleket 2 csuklóelektródához (+ a bal oldalon) és egy ujjra helyezett EDR-földeléshez kell használni.

   A HRV-jel az EKG-adatokból származik. A teljes teljesítmény spektrális analízist alkalmazzák a HRV jelre a szimpatikus paraméterek kinyerése érdekében: teljesítmény alacsony frekvencián (LF) és teljesítmény magas frekvencián (HF). Az LF a görbe alatti terület a 0,04-0,15 frekvenciatartományban A Hz és a HF a görbe alatti terület a 0,15-0,50 frekvenciatartományban. Hz. Az LF sáv teljesítménye (0,04-0,15 Hz) főként a szimpatikus aktivitást, a HRV teljesítményspektrum HF sávjában (0,15-0,5 Hz) lévő teljesítmény pedig tisztán paraszimpatikus vagy vagális aktivitást jelent. Az LF-HF arányt a szimpathovaális egyensúly mértékeként is kiszámítják.

2. Stressz profil

   A biofeedback stresszprofil leolvasásait egyetlen I-330 C2 Physiograph (J & J Engineering, Poulsbo, WA) segítségével rögzíti a Windows USE 3 Physiolab szoftver használatával.

   A következő módozatokat minden betegnél ellenőrizni fogják:

   1. Felületi elektromiográf (sEMG) – a leolvasásokat mikrovoltokban (mcv) mérik, széles sávos elhelyezéssel a frontalison; A szokásos bőrelőkészítést követően az előgélesített ezüst/ezüst-klorid Red Dot tapasz-érzékelők ujjnyi szélességben helyezkednek el minden szemöldök felett, és egy MV-1L sEMG kábelhez csatlakoznak CL 50 aligátorkapcsokon keresztül. Mindkét csukló pulzuspontjaira sEMG érzékelőket helyeznek el a szívverés figyelésére és visszajelzésére.
   2. Perifériás bőrhőmérséklet (TEMP) – Fahrenheit-fokban (F.) mérjük egy termisztoron (RV-5 TEMP/EDR érzékelő) keresztül, amely a résztvevő középső ujjának párnájához (vagy helyettesítő 3. számjegyhez) van csatlakoztatva a domináns kezén.
   3. Elektrodermális válasz (EDR) – a bőr vezetőképességi aktivitását (SCA) mikroohmokban (µohm) méri egy (RV-5 TEMP/EDR érzékelő), amely a domináns mutatóujjhoz van csatlakoztatva egy SE 35 EDG 8 mm-es, snap stílusú ezüst/ezüst-klorid koronggal. tépőzárba ágyazva sóoldat alapú géllel a korongon, hogy biztosítsa a bőrrel való érintkezést.

3. Plazmafehérjék (citokinek/mediátorok/hormonok)

   Körülbelül 39 ml vért kell gyűjteni az IV katéteren keresztül a plazmafehérje meghatározásához, beleértve a TNF-α, IL-4, IL-5, IL-8, eotaxin-3, MCP-1, MMP-9, ECP, MBP, kortizolt. , ACTH és CBG. A plazmafehérjéket a kereskedelemben kapható immunoassay kitekkel mérjük. Az 1. táblázat az egyes időpontokban összegyűjtött vér mennyiségét mutatja be. A 2. táblázat a mintakövetelményeket és a vizsgálólaboratóriumot mutatja be.

4. Ingyenes plazma kortizol

   A szabad plazma kortizolt a következő képlettel számítjuk ki:

   U = √ Z2 + 0,0122 C - Z(átlag)M ahol U = a nem kötött kortizol moláris koncentrációja, C = a teljes kortizol moláris koncentrációja, T = a CBG moláris koncentrációja és Z = 0,0167 + 0,182 (T-C) (átlag) M

   (0,0167 és 0,182 a CBG kortizolhoz való affinitásának állandója 37 °C-on, illetve az albuminhoz kötött kortizolhoz viszonyított arányához.)

5. BASC-2 profil A Gyermekek Viselkedésértékelési Skála – Második Kiadás (BASC-2) szülő és gyermek verzióját a résztvevő, illetve az egyik szülő tölti ki. A BASC-2 a fiatalok pszichológiai működésének objektív minősítési rendszere, amely szabványosított leírásokat ad a problémákról és a kompetenciákról. Különböző verziók léteznek gyerekeknek (8-11 éves korig), serdülőknek (12-18 éves korig) és szülőknek (különböző változat a 6-11 és 12-18 éves gyerekeknek). (36) A nyers pontszámokat T-pontszámként standardizálják (M=50, SD=10) egy 3483, 4–18 éves gyermekből álló normatív mintán, az Egyesült Államok népszámlálási adatai szerint rétegezve. Az egyes alskálák jó megbízhatósággal (belső konzisztenciával) rendelkeznek, kivéve a BASC-PRS-en az Atipikusság alskálát, a BASC-SRS-en pedig a Szomatizáció és az Önellátás alskáláit (r< ,70). A BASC a kritériumokhoz kapcsolódó és a konstrukció érvényességét is kimutatta. A szorongásos alskálák (szülői és önbevallási) T-pontszámait a tulajdonságok szorongásának mértékeként fogják használni az elemzéshez.

6. STICSA-C

   A kognitív és szomatikus szorongás állapot-jellemzői, gyermeki változata (STICSA-C) az intézkedés felnőttkori változatából, a STICSA-ból készült. (37) A STICSA-C két különálló önbevallási skálából áll, amelyek mindegyike 21 elemből áll, két különálló szorongásfogalom mérésére: állapotszorongás és vonásszorongás. Ez utóbbi arra kéri a gyerekeket, hogy válaszoljanak a tételekre úgy, hogy jelezzék, hogyan érzik magukat, általában; az előbbi arra kéri a gyerekeket, hogy válaszoljanak arra, hogyan érzik magukat most, ebben a pillanatban. A STICSA-C egyedülálló módon minden skálán egyértelműen és stabilan értékelik a szorongás kognitív és szomatikus megnyilvánulásait. A gyerekeket arra kérik, hogy válaszaikat egy 4 fokozatú skála segítségével adják meg (azaz a „Soha”-tól a „Majdnem mindig”-ig a Tulajdonság űrlapon, és a „Soha”-tól a „Majdnem mindig”-ig, és az „Egyáltalán nem”-től a Nagyonig az Állapot űrlapon). A STICSA-C vonásskála szomatikus és kognitív alskáláit a vonásszorongás mértékeként, míg az állapotskála ezen alskáláit az állapotszorongás mértékeként használjuk a statisztikai elemzés során.

7. A GI tünet súlyossága

   A tünetek súlyosságát a fájdalom, hányinger és puffadás esetén 10 pontos skálán határozzák meg, ahol 0 = nincs és 10 = legsúlyosabb a Globális válaszskálával.

8. Szövettan

Az endoszkópos vizsgálaton átesettek esetében a szokásos ellátás részeként kapott rutin biopsziát vak módszerrel értékelik az eozinofil sűrűség szempontjából. A szövetek immunhisztokémiai értékelését anti-triptáz és anti-CD4 felhasználásával végezzük. Az eozinofilek sejtsűrűségét, a triptáz-pozitív sejtek és a CD4-pozitív sejtek sejtsűrűségét a gyomor antrumból és a duodenális bulbból származó mintákon határozzák meg. Legalább öt nagy teljesítményű mezőt értékelnek az átlagos és csúcssejtszám meghatározásával. A patológiás diagnózist a patológus értékelése határozza meg a rutin ellátás részeként.