化妆品彩色有色隐形眼镜对眼表的影响

3.方法要求所有受试者在佩戴隐形眼镜前后填写基本信息并进行问卷调查。 在使用裂隙灯生物显微镜和荧光素染色（德国海格海峡）、通过肺压计 (Topcon® CT-80)、折光仪 (Topcon® KR-8900) 测量眼内压之前，将对受试者进行检查和测试、未矫正和最佳矫正 Snellen 视力（UCVA 和 BCVA）、Schirmir 测试 1、泪膜破裂时间（TBUT）、角膜地形图（Bausch & Lomb® Orb IIz）和通过镜面显微镜测量的内皮细胞密度（Konan Noncon Robo-Sp-9000，美国）。 还在镜片佩戴 1 周、1、3 和 6 个月时进行检查。 每次就诊时都会为所有受试者填写一张特殊图表 在每次检查期间，将观察受试者是否有结膜充血、结膜乳头状肥大、血管翳形成和角膜上皮病变的迹象。 这些标志的分级如下表所示。

体征 0=正常 1=轻度 2=中度 3=重度 结膜充血 无 最小 明显弥漫性乳头大小 无 <0.25mm 0.25-0.5mm >0.5mm 浅表血管翳 无血管翳 1 象限 2 象限 >=3 象限 点状上皮病变 无 <1/3 角膜 1/3-1/2 角膜 融合或有上皮缺损

Schirmir 测试 1（基础分泌测试）进行 5 分钟，如果滤纸条润湿长度 <5 毫米，则视为异常。 小于 10 秒的 TBUT 被认为是异常的。

印模细胞学检查将在镜片佩戴前以及镜片佩戴后 3 个月和 6 个月在国立台湾大学进行。 将孔径为 0.22 μm 的硝酸纤维素滤纸（Millipore GSWP 04700, Billerica, MA, U.S.A.）切成条状（约 4x8 mm）。 滴一滴局部麻醉剂（丙美卡因 0.5%）后，用无菌棉签轻轻吸收多余的眼泪。 将硝酸纤维素条置于角膜缘结膜表面。 轻压后，剥离纸条并立即固定在 95% 的酒精中。 然后使用高碘酸席夫 (PAS; Sigma 395132, Hattiesburg, MS, USA) 对条带进行染色，并在光学显微镜下以 40 倍放大倍数进行检查，并由面罩观察员按照 Saini 等人的标准 21 进行分级，如下所示。 1 级：小圆形上皮细胞，核质比为 1:2。 存在大量深阳性细胞。 通常会获得良好融合的细胞片。 Grade2：良好的细胞片，由较大的多边形上皮细胞组成，核质比降低至 1:3。 杯状细胞数量减少，但 PAS 仍呈深度阳性。 3 级：较大的多边形细胞，核质比进一步降低。 杯状细胞数量减少，染色减少。 4 级：较大的多边形嗜碱性细胞，核固缩。 细胞内角蛋白通常是可证实的。 杯状细胞缺失。 只能获得一些松散的团块。 杯状细胞密度也通过计算至少四个高倍视野 (HPF) 中每 100 个上皮细胞的平均细胞数来分级。 1 级：>30 个杯状细胞/4 个 HPF。 2 级：15-30 个杯状细胞/4 个 HPF。 3 级：5-15 个杯状细胞/4 个 HPF。 4 级：<5 个杯状细胞/4 HPF。

角膜的体内共聚焦显微镜成像将在镜片佩戴前以及镜片佩戴后 3 个月和 6 个月由一名蒙面检查员对国立台湾大学的所有受试者进行。 每次检查前立即滴入一滴 0.5% 丙美卡因溶液和人工泪液。 在要求患者直视前方后，体内共聚焦显微镜（Confoscan 3.4.1； Nidek Technologies, Padova, Italy) 配备了标准的 40 倍水浸式前镜头，可自动捕捉中央角膜全层的图像。 每次检查大约需要 1 到 3 分钟，并在连续图像之间的 z 轴上以 1.5 和 4 μm 的距离记录 350 张图像。 在每次访问期间，以 4 um z 间隔重复测量 3 次，然后以 1.5 um z 间隔重复 3 次。 Chen 等人 22-24 发表了上皮细胞形态、上皮厚度和基质反应的分析。 还将记录和分析角膜神经形态和密度。

用过的隐形眼镜将放在提供的储物盒中，然后带回来检查镜片的完整性，没有撕裂或碎裂的碎片。 然后，镜片用于通过扫描电子显微镜 (SEM) 和个人资助的细菌粘附测定进行进一步的材料分析。 对于 SEM，用过的镜片在温和洗涤后固定在半强度 Karnovskys 固定剂（2% 多聚甲醛和 2.5% 戊二醛）中。 除去固定剂，加入蒸馏水漂洗。 在真空下放置过夜之前，先用液氮浸入快速冷冻。 将样品的凹面安装在铝短柱上，并在 SEM（JEOL Ltd，JSM 5300，日本）下以 15kV 的各种放大倍率进行检查。 对于细菌粘附测定，将用过的镜片收集在无菌平板中，并在放入含有 1ml PBS 的 eppendorf 管之前轻轻浸入 PBS 中 3 次。 然后将镜片浸软并连续稀释至 105，然后接种到 Muller-Hinton 琼脂上。 琼脂平板孵育过夜，第二天计数菌落形成单位。 菌落数乘以稀释因子除以镀层体积将得出 CFU/ml/每个隐形眼镜。

所有数据都将输入到 Excel 电子表格（Microsoft, Inc.）中，并使用适用于 Windows 的 SPSS 软件（11.0, SPSS, Inc.）进行分析。 配对 t 检验将用于比较彩色隐形眼镜佩戴前后的所有参数。