卵泡液的蛋白质组学和糖蛋白组学分析

在这项研究中，我们计划利用超灵敏质谱 (MS) 和其他常规蛋白质组学方法来鉴定人类 FF 中存在的低丰度和高丰度蛋白质。 此外，我们计划使用高效液相色谱 (HPLC) 和蛋白质印迹技术来评估基于 Neu5Gc 和聚糖阵列的 ELISA 技术，以检测人 FF 中的抗 Neu5Gc 抗体谱。 该分析将对 FF 样本进行，这些样本来自接受体外受精和胚胎移植 (IVF-ET) 的正常女性，仅针对男性因素，以及来自我们的第 3 方生殖计划的卵母细胞捐献者，以及患有 PCOS 的瘦和肥胖女性。 本研究将提供有关正常卵泡发生和 PCOS 病理状况期间蛋白质、糖蛋白和类固醇激素表达的信息，这也应提供关于正常和异常卵母细胞发育的基本科学信息。

人类 FF 沐浴发育中的卵母细胞。 以前的研究表明，FF 含有细胞因子、类固醇和蛋白质激素以及生长因子。 具有如此重要生物学特性的蛋白质的存在意味着 FF 在促进正常卵母细胞发育方面的旁分泌和自分泌作用。 此外，任何抗原性唾液酸 Neu5Gc 的存在和针对这些抗原性糖缀合物（糖脂和唾液酸修饰的糖蛋白）的抗体的存在可能会干扰卵母细胞发育、激素表达、受精，并可能干扰植入。 在这里，我们假设对人类 FF 进行详尽的蛋白质组学和糖蛋白组学表征对于透彻了解其生物学意义至关重要。 我们还假设 PCOS 可能具有 FF 蛋白和糖蛋白环境的差异表达，并且患有 PCOS 的苗条和肥胖女性之间的表达可能进一步不同。 PCOS 代表一种异质性疾病。 高雄激素血症、代谢和月经紊乱以及肥胖的严重程度各不相同，高达 40% 的患者没有临床表现出典型的高雄激素血症的迹象。 另一方面，这些非典型的、通常较瘦的 PCOS 女性可能患有糖耐量降低和糖尿病。 报告表明，这些苗条的 PCOS 女性已经改变了血清 IGFBP-1，这是肥胖 PCOS 患者的特征性内分泌特征，并且与高胰岛素血症和/或肥胖有关。 PCOS 的瘦表型及其意义尚不清楚，但可能代表 PCOS 的一种隐蔽或未表达形式，或者可能是后来表现出肥胖/超重 PCOS 临床症状的个体的前奏。 由于 PCOS 女性 FF 中类固醇激素和炎症标志物的含量不同，可能会出现表达变化。