Proteomik und glykoproteomische Analyse von Follikelflüssigkeit

In dieser Studie planen wir, ultraempfindliche Massenspektrometrie (MS) und andere konventionelle proteomische Ansätze zu nutzen, um die in menschlichem FF vorhandenen Proteine ​​mit geringer und hoher Häufigkeit zu identifizieren. Darüber hinaus planen wir den Einsatz von Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) und Western-Blot-Techniken zur Evaluierung der auf Neu5Gc und Glykan-Arrays basierenden ELISA-Techniken zum Nachweis des Anti-Neu5Gc-Antikörperprofils in menschlichem FF. Diese Analyse wird an FF-Proben von normalen Frauen durchgeführt, die sich einer In-vitro-Fertilisation und einem Embryotransfer (IVF-ET) nur für einen männlichen Faktor unterziehen, und von Eizellenspendern aus unserem Reproduktionsprogramm Dritter sowie von schlanken und fettleibigen Frauen mit PCOS. Diese Studie wird Informationen über die Expression von Proteinen, Glykoproteinen und Steroidhormonen während der normalen Follikulogenese und während des pathologischen Zustands von PCOS liefern, die auch grundlegende wissenschaftliche Informationen über die normale und abnormale Eizellenentwicklung liefern sollten.

Menschliches FF badet die sich entwickelnde Eizelle. Frühere Studien weisen darauf hin, dass die FF Zytokine, Steroid- und Proteinhormone sowie Wachstumsfaktoren enthält. Das Vorhandensein von Proteinen mit solch bedeutenden biologischen Eigenschaften impliziert eine parakrine und autokrine Rolle des FF bei der Förderung der normalen Eizellenentwicklung. Darüber hinaus kann das Vorhandensein von antigener Sialinsäure Neu5Gc und das Vorhandensein von Antikörpern, die auf diese antigenen Glykokonjugate (mit Sialinsäure verzierte Glykolipide und Glykoproteine) abzielen, die Eizellenentwicklung, die Hormonexpression, die Befruchtung und möglicherweise die Implantation beeinträchtigen. Hier gehen wir davon aus, dass eine umfassende proteomische und glykoproteomische Charakterisierung des menschlichen FF für ein umfassendes Verständnis seiner biologischen Bedeutung unerlässlich ist. Wir gehen auch davon aus, dass PCOS eine unterschiedliche Expression des FF-Proteins und des Glykoprotein-Milieu aufweisen könnte und dass sich die Expression zwischen schlanken und fettleibigen Frauen mit PCOS weiter unterscheiden könnte. PCOS stellt eine heterogene Erkrankung dar. Der Schweregrad von Hyperandrogenismus, Stoffwechsel- und Menstruationsstörungen sowie Fettleibigkeit ist unterschiedlich, wobei bis zu 40 % klinisch keine Anzeichen eines klassischen Hyperandrogenismus aufweisen. Andererseits können diese atypischen, oft schlanken PCOS-Frauen eine beeinträchtigte Glukosetoleranz und Diabetes haben. Berichten zufolge haben diese schlanken PCOS-Frauen einen veränderten Serum-IGFBP-1-Wert, ein charakteristisches endokrines Merkmal von Patienten mit fettleibigem PCOS, das mit Hyperinsulinämie und/oder Fettleibigkeit zusammenhängt. Der schlanke Phänotyp von PCOS und seine Bedeutung sind unklar, können jedoch eine kryptische oder unausgesprochene Form von PCOS darstellen oder ein Vorspiel für Personen sein, die später klinische Anzeichen von fettleibigem/übergewichtigem PCOS zeigen. Aufgrund der unterschiedlichen Mengen an Steroidhormonen und Entzündungsmarkern im FF von Frauen mit PCOS sind Veränderungen in der Expression zu erwarten.