Análise Proteômica e Glico-Proteômica do Fluido Folicular
Análise proteômica e glicoproteômica de fluido folicular derivado de pacientes saudáveis/doadoras e pacientes com síndrome dos ovários policísticos
Tanto quanto é do conhecimento dos investigadores, a caracterização exaustiva das proteínas e glicoproteínas de baixa e alta abundância do Fluido Folicular (FF) ainda não foi alcançada. Tal análise pode fornecer dados moleculares críticos sobre o papel do FF na maturação do oócito e pode identificar alterações específicas no proteoma do FF de pacientes com problemas ginecológicos, como a Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP).
Objetivos Específicos
- Realizar uma análise abrangente de FF humano normal usando espectrometria de massa sensível em combinação com abordagens convencionais para avaliação proteômica e usando HPLC e Western blot para análise glicoproteômica.
- Caracterizar padrões proteômicos e glicoproteômicos diferenciais do FF em mulheres normais em comparação com mulheres magras e obesas com SOP.
- Para complementar a análise proteômica diferencial e glicoproteômica com análise de hormônio esteróide em todas as amostras FF.
Visão geral do estudo
Status
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Neste estudo, planejamos utilizar espectrometria de massa (MS) ultrassensível e outras abordagens proteômicas convencionais para identificar as proteínas de baixa e alta abundância presentes no FF humano. Além disso, planejamos usar técnicas de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e Western blot para avaliar as técnicas de ELISA baseadas em Neu5Gc e glicano para detectar o perfil de anticorpo anti-Neu5Gc em FF humano. Esta análise será realizada em amostras FF obtidas de mulheres normais submetidas a fertilização in vitro e transferência de embriões (FIV-ET) para um fator masculino isolado e doadores de oócitos de nosso programa de reprodução de terceiros e de mulheres magras e obesas com SOP. Este estudo fornecerá informações sobre a expressão de proteínas, glicoproteínas e hormônios esteróides durante a foliculogênese normal e durante a condição patológica da SOP, o que também deve fornecer informações científicas básicas sobre o desenvolvimento oocitário normal e anormal.
O FF humano banha o ovócito em desenvolvimento. Estudos anteriores indicam que o FF contém citocinas, hormônios esteróides e proteicos e fatores de crescimento. A presença de proteínas com propriedades biológicas tão significativas implica um papel parácrino e autócrino para o FF na promoção do desenvolvimento oocitário normal. Além disso, a presença de qualquer ácido siálico antigênico Neu5Gc e a presença de anticorpos direcionados a esses glicoconjugados antigênicos (glicolipídeos e glicoproteínas decoradas com ácido siálico) podem interferir no desenvolvimento do oócito, expressão hormonal, fertilização e possivelmente implantação. Aqui levantamos a hipótese de que uma caracterização proteômica e glicoproteômica exaustiva de FF humano é essencial para uma compreensão completa de seu significado biológico. Também levantamos a hipótese de que a SOP pode ter expressão diferencial da proteína FF e do meio glicoproteico, e que a expressão pode diferir ainda mais entre mulheres magras e obesas com SOP. A SOP representa um distúrbio heterogêneo. A gravidade do hiperandrogenismo, distúrbio metabólico e menstrual e obesidade é variável, com até 40% não expressando clinicamente sinais de hiperandrogenismo clássico. Por outro lado, essas mulheres atípicas, geralmente magras, com SOP podem ter intolerância à glicose e diabetes. Os relatórios sugerem que essas mulheres SOP magras têm IGFBP-1 sérico alterado, uma característica endócrina característica de pacientes com SOP obesa e relacionada à hiperinsulinemia e/ou obesidade. O fenótipo magro da SOP e seu significado não são claros, mas podem representar uma forma enigmática ou não expressa de SOP ou podem ser um prelúdio para indivíduos que mais tarde manifestarão sinais clínicos de SOP obesa/com sobrepeso. Alterações na expressão podem ser esperadas devido às diferentes quantidades de hormônios esteróides e marcadores inflamatórios no FF derivados de mulheres com SOP.
Tipo de estudo
Inscrição (Antecipado)
Contactos e Locais
Locais de estudo
-
-
Ohio
-
Cincinnati, Ohio, Estados Unidos, 45219
- Center for Reproductive Health
-
-
Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Gêneros Elegíveis para o Estudo
Método de amostragem
População do estudo
Mulheres submetidas à fertilização in vitro que tenham:
- diagnóstico de infertilidade somente por fator masculino ou são doadoras de ovócitos
- SOP
Descrição
Critérios de inclusão: Critérios de inclusão Todos
- Pacientes do sexo feminino submetidas a hiperestimulação ovariana controlada (COH), aspiração transvaginal de oócitos (TVA) e ultrassonografia com infusão salina (SIS) com coleta de UL
- Idade <35 anos no momento do ciclo de fertilização in vitro (FIV)
- Função ovariana normal definida Dia 3 Hormônio Folicular Estimulante (FSH) <8 pg/ml ou Hormônio Anti-Mulleriano (≥ 1,0 ng/ml)
Controles de critérios de inclusão:
- Pacientes do sexo feminino submetidas a COH e TVA doando seus ovócitos
- Pacientes do sexo feminino submetidas a COH e TVA apenas para infertilidade por fator masculino (ou seja, sem causas femininas de infertilidade)
- Ciclos menstruais normais
Critérios de inclusão Lean SOP:
- Diagnóstico de SOP pelos Critérios de Rotterdam
- IMC ≤ 25 kg/m2 Critérios de inclusão SOP clássica
1. Diagnóstico de SOP pelos Critérios de Rotterdam 2. IMC > 30 kg/m2
Critério de exclusão:
- Idade ≥ 35 anos
- Parceiros do sexo feminino com diagnóstico associado à infertilidade (ou seja, fator tubário, fator cervical, endometriose)
- Infertilidade inexplicável
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
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Pacientes normais
Mulheres com diagnóstico de infertilidade de fator masculino apenas ou mulheres que são doadoras de ovócitos
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Síndrome dos ovários policísticos, IMC alto
Mulheres com Síndrome do Ovário Policístico com IMC entre 30-35
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Síndrome dos ovários policísticos, IMC baixo
Mulheres com Síndrome do Ovário Policústico com IMC entre 20 e 25
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Análise proteômica
Prazo: As participantes serão acompanhadas por um ciclo de fertilização in vitro, incluindo os resultados da gravidez, em média, de 6 a 8 semanas.
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Para análise proteômica, as amostras de fluido folicular serão analisadas diretamente por MS ou serão processadas para esgotar a albumina, que provavelmente está presente em abundância muito alta no FF.
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As participantes serão acompanhadas por um ciclo de fertilização in vitro, incluindo os resultados da gravidez, em média, de 6 a 8 semanas.
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Análise hormonal
Prazo: As participantes serão acompanhadas por um ciclo de fertilização in vitro, incluindo os resultados da gravidez, em média, de 6 a 8 semanas.
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Uma alíquota de FF de cada paciente será analisada para os seguintes hormônios esteróides: progesterona, 17-alfa-hidroxiprogesterona, androstenediona, testosterona, estradiol e dihidrotestosterona.
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As participantes serão acompanhadas por um ciclo de fertilização in vitro, incluindo os resultados da gravidez, em média, de 6 a 8 semanas.
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Investigador principal: Steven Lindheim, MD, MMM, University of Cincinnati
Publicações e links úteis
Publicações Gerais
- Polson DW, Adams J, Wadsworth J, Franks S. Polycystic ovaries--a common finding in normal women. Lancet. 1988 Apr 16;1(8590):870-2. doi: 10.1016/s0140-6736(88)91612-1.
- Farquhar CM, Birdsall M, Manning P, Mitchell JM, France JT. The prevalence of polycystic ovaries on ultrasound scanning in a population of randomly selected women. Aust N Z J Obstet Gynaecol. 1994 Feb;34(1):67-72. doi: 10.1111/j.1479-828x.1994.tb01041.x.
- Carmina E, Lobo RA. Do hyperandrogenic women with normal menses have polycystic ovary syndrome? Fertil Steril. 1999 Feb;71(2):319-22. doi: 10.1016/s0015-0282(98)00455-5.
- Carmina E, Wong L, Chang L, Paulson RJ, Sauer MV, Stanczyk FZ, Lobo RA. Endocrine abnormalities in ovulatory women with polycystic ovaries on ultrasound. Hum Reprod. 1997 May;12(5):905-9. doi: 10.1093/humrep/12.5.905.
- Clayton RN, Ogden V, Hodgkinson J, Worswick L, Rodin DA, Dyer S, Meade TW. How common are polycystic ovaries in normal women and what is their significance for the fertility of the population? Clin Endocrinol (Oxf). 1992 Aug;37(2):127-34. doi: 10.1111/j.1365-2265.1992.tb02296.x.
- Mendoza C, Ruiz-Requena E, Ortega E, Cremades N, Martinez F, Bernabeu R, Greco E, Tesarik J. Follicular fluid markers of oocyte developmental potential. Hum Reprod. 2002 Apr;17(4):1017-22. doi: 10.1093/humrep/17.4.1017.
- Suikkari AM, Koivisto VA, Rutanen EM, Yki-Jarvinen H, Karonen SL, Seppala M. Insulin regulates the serum levels of low molecular weight insulin-like growth factor-binding protein. J Clin Endocrinol Metab. 1988 Feb;66(2):266-72. doi: 10.1210/jcem-66-2-266.
- Conover CA, Lee PD, Kanaley JA, Clarkson JT, Jensen MD. Insulin regulation of insulin-like growth factor binding protein-1 in obese and nonobese humans. J Clin Endocrinol Metab. 1992 Jun;74(6):1355-60. doi: 10.1210/jcem.74.6.1375600.
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo
Conclusão Primária (Antecipado)
Conclusão do estudo (Antecipado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Estimativa)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Estimativa)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- Proteomics of FF in PCOS
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