Analyse protéomique et glyco-protéomique du liquide folliculaire

Dans cette étude, nous prévoyons d'utiliser la spectrométrie de masse ultrasensible (MS) et d'autres approches protéomiques conventionnelles pour identifier les protéines abondantes faibles et élevées présentes dans le FF humain. De plus, nous prévoyons d'utiliser des techniques de chromatographie liquide à haute performance (HPLC) et de Western blot pour évaluer les techniques ELISA basées sur Neu5Gc et glycan array pour détecter le profil d'anticorps anti-Neu5Gc dans le FF humain. Cette analyse sera effectuée sur des échantillons FF obtenus à partir de femmes normales subissant une fécondation in vitro et des transferts d'embryons (FIV-ET) pour un facteur masculin seul et des donneurs d'ovocytes de notre programme de reproduction tiers et de femmes maigres et obèses atteintes du SOPK. Cette étude fournira des informations sur l'expression des protéines, des glycoprotéines et des hormones stéroïdes pendant la folliculogenèse normale et pendant l'état pathologique du SOPK, ce qui devrait également fournir des informations scientifiques de base sur le développement normal et anormal des ovocytes.

Le FF humain baigne l'ovocyte en développement. Des études antérieures indiquent que le FF contient des cytokines, des hormones stéroïdiennes et protéiques et des facteurs de croissance. La présence de protéines aux propriétés biologiques aussi importantes implique un rôle paracrine et autocrine pour la FF dans la promotion du développement normal des ovocytes. De plus, la présence de tout acide sialique antigénique Neu5Gc et la présence d'anticorps ciblant ces glycoconjugués antigéniques (glycolipides et glycoprotéines décorées avec de l'acide sialique) peuvent interférer avec le développement des ovocytes, l'expression hormonale, la fécondation et éventuellement l'implantation. Ici, nous émettons l'hypothèse qu'une caractérisation protéomique et glyco-protéomique exhaustive de la FF humaine est essentielle pour une compréhension approfondie de sa signification biologique. Nous émettons également l'hypothèse que le SOPK peut avoir une expression différentielle de la protéine FF et du milieu glycoprotéique, et que l'expression peut différer davantage entre les femmes maigres et obèses atteintes du SOPK. Le SOPK représente un trouble hétérogène. La sévérité de l'hyperandrogénisme, des troubles métaboliques et menstruels et de l'obésité est variable, jusqu'à 40 % n'exprimant pas cliniquement de signes d'hyperandrogénie classique. D'autre part, ces femmes atypiques, souvent maigres, atteintes du SOPK peuvent avoir une tolérance au glucose altérée et un diabète. Les rapports suggèrent que ces femmes maigres atteintes du SOPK présentent une IGFBP-1 sérique altérée, une caractéristique endocrinienne caractéristique des patients obèses atteints du SOPK et liée à l'hyperinsulinémie et/ou à l'obésité. Le phénotype maigre du SOPK et sa signification ne sont pas clairs, mais peuvent représenter une forme cryptique ou inexprimée du SOPK ou peuvent être un prélude aux personnes qui manifesteront plus tard des signes cliniques de SOPK obèse/en surpoids. Des changements d'expression peuvent être attendus en raison des différentes quantités d'hormones stéroïdiennes et de marqueurs inflammatoires dans le FF provenant de femmes atteintes du SOPK.