Follikuláris folyadék proteomika és glikoproteomikai elemzése

Ebben a tanulmányban ultraszenzitív tömegspektrometriát (MS) és más hagyományos proteomikai megközelítéseket kívánunk alkalmazni a humán FF-ben jelenlévő alacsony és magas fehérjék azonosítására. Ezenkívül nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás (HPLC) és Western blot technikák alkalmazását tervezzük a Neu5Gc és glikán tömb alapú ELISA technikák értékelésére az anti-Neu5Gc antitest profil kimutatására humán FF-ben. Ezt az elemzést olyan FF-mintákon fogják elvégezni, akik in vitro megtermékenyítésen és embriótranszferen (IVF-ET) estek át kizárólag férfi faktorral, valamint a harmadik fél reprodukciós programunkból származó petesejtek donoraitól, valamint PCOS-ben szenvedő sovány és elhízott nőktől. Ez a tanulmány információt nyújt a fehérje-, glikoprotein- és szteroidhormon-expresszióról a normál folliculogenezis és a PCOS kóros állapota során, és alapvető tudományos információkat is nyújt a normál és abnormális petesejtek fejlődéséről.

Az emberi FF fürdeti a fejlődő petesejteket. Korábbi tanulmányok azt mutatják, hogy az FF citokineket, szteroid- és fehérjehormonokat, valamint növekedési faktorokat tartalmaz. Az ilyen jelentős biológiai tulajdonságokkal rendelkező fehérjék jelenléte azt jelenti, hogy az FF parakrin és autokrin szerepet játszik a normál petesejtek fejlődésében. Továbbá bármely antigén sziálsav Neu5Gc jelenléte és az ezeket az antigén glikokonjugátumokat célzó antitestek jelenléte (glikolipid és sziálsavval díszített glikoproteinek) megzavarhatja a petesejtek fejlődését, a hormonális expressziót, a megtermékenyítést és esetleg az implantációt. Itt azt feltételezzük, hogy az emberi FF kimerítő proteomikai és glikoproteomikai jellemzése elengedhetetlen biológiai jelentőségének alapos megértéséhez. Feltételezzük azt is, hogy a PCOS-ban az FF-fehérje és a glikoprotein-környezet eltérő expressziója lehet, és az expresszió tovább különbözhet a PCOS-ben szenvedő sovány és elhízott nők között. A PCOS heterogén rendellenességet jelent. A hiperandrogenizmus, az anyagcsere- és menstruációs zavarok, valamint az elhízás súlyossága változó, akár 40%-ban a klasszikus hiperandrogenizmus klinikailag nem kifejeződő jelei is előfordulhatnak. Másrészt ezeknek az atipikus, gyakran sovány PCOS-es nőknek csökkent glükóztoleranciája és cukorbetegsége lehet. A jelentések arra utalnak, hogy ezeknek a sovány PCOS-es nőknek megváltozott a szérum IGFBP-1-je, amely az elhízott PCOS-ban szenvedő betegek endokrin jellemzője, és hiperinzulinémiához és/vagy elhízáshoz kapcsolódik. A PCOS sovány fenotípusa és jelentősége nem tisztázott, de a PCOS rejtélyes vagy kifejezetlen formája lehet, vagy előjátéka lehet azoknak az egyéneknek, akik később az elhízott/túlsúlyos PCOS klinikai tüneteit mutatják. Az expresszió változásai várhatók a szteroid hormonok és a gyulladásos markerek eltérő mennyisége miatt a PCOS-ben szenvedő nőkből származó FF-ben.