Proteomics & Glyco-Proteomic Analysis of Follicular Fluid
Proteomik och glyko-proteomisk analys av follikulär vätska som härrör från hälsopatienter/donatorer och patienter med polycystiskt ovariesyndrom
Så vitt forskarna vet har uttömmande karakterisering av proteiner och glykoproteiner med låg och hög riklighet i Follicular Fluid (FF) ännu inte uppnåtts. En sådan analys kan ge kritiska molekylära data om FF:s roll i oocytmognad och kan identifiera specifika förändringar i FF-proteomet hos patienter med gynekologiska problem, såsom polycystiskt ovariesyndrom (PCOS).
Specifika mål
- Att utföra en omfattande analys av normal human FF med användning av känslig masspektrometri i kombination med konventionella metoder för proteomisk utvärdering och användning av HPLC och Western blot för glykoproteomisk analys.
- Karakterisera differentiella proteomiska och glykoproteomiska mönster av FF hos normala kvinnor jämfört med magra och feta kvinnor med PCOS.
- Att komplettera den differentiella proteomiska och glykoproteomiska analysen med steroidhormonanalys i alla FF-prover.
Studieöversikt
Status
Betingelser
Intervention / Behandling
Detaljerad beskrivning
I denna studie planerar vi att använda ultrakänslig masspektrometri (MS) och andra konventionella proteomiska tillvägagångssätt för att identifiera de låga och höga rikliga proteinerna som finns i mänsklig FF. Dessutom planerar vi att använda högpresterande vätskekromatografi (HPLC) och Western blot-tekniker för att utvärdera Neu5Gc- och glycan array-baserade ELISA-tekniker för att detektera anti-Neu5Gc-antikroppsprofil i humant FF. Denna analys kommer att utföras på FF-prover som erhållits från normala kvinnor som genomgår provrörsbefruktning och embryoöverföringar (IVF-ET) för enbart en manlig faktor och oocytdonatorer från vårt tredje parts reproduktionsprogram och från magra och feta kvinnor med PCOS. Denna studie kommer att ge information om protein-, glykoprotein- och steroidhormonuttryck under normal follikulogenes och under det patologiska tillståndet av PCOS, vilket också bör ge grundläggande vetenskaplig information om normal och onormal oocytutveckling.
Human FF badar den utvecklande oocyten. Tidigare studier tyder på att FF innehåller cytokiner, steroid- och proteinhormoner och tillväxtfaktorer. Närvaron av proteiner med sådana betydande biologiska egenskaper innebär en parakrin och autokrin roll för FF för att främja normal oocytutveckling. Dessutom kan närvaron av antigen sialinsyra Neu5Gc och närvaron av antikroppar som riktar sig mot dessa antigena glykokonjugat (glykolipider och glykoproteiner dekorerade med sialinsyra) störa oocytutveckling, hormonellt uttryck, befruktning och möjligen implantation. Här antar vi att en uttömmande proteomisk och glykoproteomisk karakterisering av mänsklig FF är väsentlig för en grundlig förståelse av dess biologiska betydelse. Vi antar också att PCOS kan ha differentiellt uttryck av FF-proteinet och glykoproteinmiljön, och att uttrycket kan skilja sig ytterligare mellan magra och feta kvinnor med PCOS. PCOS representerar en heterogen sjukdom. Svårighetsgraden av hyperandrogensim, metabolisk och menstruationsstörning och fetma varierar med upp till 40 % som inte kliniskt uttrycker tecken på klassisk hyperandrogenism. Å andra sidan kan dessa atypiska, ofta magra, PCOS-kvinnor ha nedsatt glukostolerans och diabetes. Rapporter tyder på att dessa magra PCOS-kvinnor har förändrat serum IGFBP-1, en karakteristisk endokrin egenskap hos patienter med feta PCOS, och relaterad till hyperinsulinemi och/eller fetma. Den magra fenotypen av PCOS och dess betydelse är oklar men kan representera en kryptisk eller outtryckt form av PCOS eller kan vara ett förspel till individer som senare kommer att visa kliniska tecken på feta/överviktiga PCOS. Förändringar i uttrycket kan förväntas på grund av de olika mängderna steroidhormoner och inflammatoriska markörer i FF härrörande från kvinnor med PCOS.
Studietyp
Inskrivning (Förväntat)
Kontakter och platser
Studieorter
-
-
Ohio
-
Cincinnati, Ohio, Förenta staterna, 45219
- Center for Reproductive Health
-
-
Deltagandekriterier
Urvalskriterier
Åldrar som är berättigade till studier
Tar emot friska volontärer
Kön som är behöriga för studier
Testmetod
Studera befolkning
Kvinnor som genomgår provrörsbefruktning som har:
- manlig faktor endast infertilitetsdiagnos eller är oocytdonatorer
- PCOS
Beskrivning
Inklusionskriterier: Inklusionskriterier Alla
- Kvinnliga patienter som genomgår kontrollerad ovariell hyperstimulering (COH), transvaginal oocytaspiration (TVA) och saltlösningsinfunderad sonografi (SIS) med UL-insamling
- Ålder <35 år vid tidpunkten för provrörsbefruktning (IVF) cykel
- Normal ovariefunktion definierad Dag 3 follikulärt stimulerande hormon (FSH) <8 pg/ml eller anti-mullerian hormon (≥ 1,0 ng/ml)
Inklusionskriterier kontroller:
- Kvinnliga patienter som genomgår COH och TVA som donerar hennes oocyter
- Kvinnliga patienter som genomgår COH och TVA endast för manlig faktor infertilitet (dvs. inga kvinnliga orsaker till infertilitet)
- Normala menstruationscykler
Inklusionskriterier Lean PCOS:
- Diagnos av PCOS av Rotterdam Criteria
- BMI ≤ 25 kg/m2 Inklusionskriterier Klassisk PCOS
1. Diagnos av PCOS av Rotterdam Kriterier 2. BMI > 30 kg/m2
Exklusions kriterier:
- Ålder ≥ 35 år
- Kvinnliga partners med infertilitetsrelaterad diagnos (dvs. tubal faktor, cervikal faktor, endometrios)
- Oförklarlig infertilitet
Studieplan
Hur är studien utformad?
Designdetaljer
Kohorter och interventioner
Grupp / Kohort |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Normala patienter
Kvinnor med infertilitetsdiagnos av enbart manlig faktor eller kvinnor som är oocytdonatorer
|
|
|
Polycystiskt ovariesyndrom, högt BMI
Kvinnor med polycystiskt ovariesyndrom med ett BMI mellan 30-35
|
|
|
Polycystiskt ovariesyndrom, lågt BMI
Kvinnor med polykustiskt ovariesyndrom med ett BMI mellan 20 och 25
|
|
Vad mäter studien?
Primära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Proteomisk analys
Tidsram: Deltagarna kommer att följas under en IVF-cykel inklusive graviditetsresultat, i genomsnitt kommer detta att vara 6-8 veckor.
|
För proteomisk analys kommer follikulära vätskeproverna antingen att analyseras direkt av MS eller kommer att bearbetas för att utarma albumin som sannolikt kommer att finnas i mycket hög mängd i FF.
|
Deltagarna kommer att följas under en IVF-cykel inklusive graviditetsresultat, i genomsnitt kommer detta att vara 6-8 veckor.
|
Sekundära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Hormonanalys
Tidsram: Deltagarna kommer att följas under en IVF-cykel inklusive graviditetsresultat, i genomsnitt kommer detta att vara 6-8 veckor.
|
En alikvot av FF från varje patient kommer att analyseras för följande steroidhormoner: progesteron, 17-alfa-hydroxiprogesteron, androstenedion, testosteron, östradiol och dihydrotestosteron.
|
Deltagarna kommer att följas under en IVF-cykel inklusive graviditetsresultat, i genomsnitt kommer detta att vara 6-8 veckor.
|
Samarbetspartners och utredare
Sponsor
Samarbetspartners
Utredare
- Huvudutredare: Steven Lindheim, MD, MMM, University of Cincinnati
Publikationer och användbara länkar
Allmänna publikationer
- Polson DW, Adams J, Wadsworth J, Franks S. Polycystic ovaries--a common finding in normal women. Lancet. 1988 Apr 16;1(8590):870-2. doi: 10.1016/s0140-6736(88)91612-1.
- Farquhar CM, Birdsall M, Manning P, Mitchell JM, France JT. The prevalence of polycystic ovaries on ultrasound scanning in a population of randomly selected women. Aust N Z J Obstet Gynaecol. 1994 Feb;34(1):67-72. doi: 10.1111/j.1479-828x.1994.tb01041.x.
- Carmina E, Lobo RA. Do hyperandrogenic women with normal menses have polycystic ovary syndrome? Fertil Steril. 1999 Feb;71(2):319-22. doi: 10.1016/s0015-0282(98)00455-5.
- Carmina E, Wong L, Chang L, Paulson RJ, Sauer MV, Stanczyk FZ, Lobo RA. Endocrine abnormalities in ovulatory women with polycystic ovaries on ultrasound. Hum Reprod. 1997 May;12(5):905-9. doi: 10.1093/humrep/12.5.905.
- Clayton RN, Ogden V, Hodgkinson J, Worswick L, Rodin DA, Dyer S, Meade TW. How common are polycystic ovaries in normal women and what is their significance for the fertility of the population? Clin Endocrinol (Oxf). 1992 Aug;37(2):127-34. doi: 10.1111/j.1365-2265.1992.tb02296.x.
- Mendoza C, Ruiz-Requena E, Ortega E, Cremades N, Martinez F, Bernabeu R, Greco E, Tesarik J. Follicular fluid markers of oocyte developmental potential. Hum Reprod. 2002 Apr;17(4):1017-22. doi: 10.1093/humrep/17.4.1017.
- Suikkari AM, Koivisto VA, Rutanen EM, Yki-Jarvinen H, Karonen SL, Seppala M. Insulin regulates the serum levels of low molecular weight insulin-like growth factor-binding protein. J Clin Endocrinol Metab. 1988 Feb;66(2):266-72. doi: 10.1210/jcem-66-2-266.
- Conover CA, Lee PD, Kanaley JA, Clarkson JT, Jensen MD. Insulin regulation of insulin-like growth factor binding protein-1 in obese and nonobese humans. J Clin Endocrinol Metab. 1992 Jun;74(6):1355-60. doi: 10.1210/jcem.74.6.1375600.
Studieavstämningsdatum
Studera stora datum
Studiestart
Primärt slutförande (Förväntat)
Avslutad studie (Förväntat)
Studieregistreringsdatum
Först inskickad
Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna
Första postat (Uppskatta)
Uppdateringar av studier
Senaste uppdatering publicerad (Uppskatta)
Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna
Senast verifierad
Mer information
Termer relaterade till denna studie
Ytterligare relevanta MeSH-villkor
Andra studie-ID-nummer
- Proteomics of FF in PCOS
Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .