预测贝伐珠单抗疗效的多态性相互作用 (BEVAGENE)

来自意大利八个肿瘤内科部门的转移性乳腺癌 (MBC) 患者，经组织学证实为 HER2 阴性 MBC，接受一线治疗，包括贝伐珠单抗 10 mg/m2 i.v.第 1 天和第 15 天联合一线紫杉醇 90 mg/m2 i.v.在第 1、8 和 15 天，每 4 周，将登记参加本药物遗传学研究。 接受一线化疗（包括不含贝伐单抗的紫杉醇）治疗的 MBC 患者也将被纳入为对照组。

在患有可测量疾病的患者中，将根据实体瘤反应评估标准 (RECIST) 标准 1.1 对转移性疾病部位进行放射学重新评估。 在没有可测量病变的患者中，当新病变出现或现有病变发展时，将定义为疾病进展。 同样，在不可测量的病变的情况下，不是由于治疗毒性引起的临床状况恶化将被定义为疾病进展。

无进展生存期 (PFS) 定义为从治疗开始到首次观察到如上所述的疾病进展或任何原因导致的死亡的时间段。 将评估所有患者的反应、PFS 和总生存期。 每位进入研究的患者都将签署知情同意书。 该协议已获得意大利比萨 Azienda Ospedaliera-Universitaria Pisana 伦理委员会 (CESM 3077/2010) 的批准。

基因分型分析 血液样本 (3 ml) 将收集在乙二胺四乙酸 (EDTA) 管中并储存在 -80°C。 将选择参与血管生成途径并已被建议作为贝伐珠单抗反应预测因子的基因和多态性用于本分析。 将使用 QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Valencia, California, USA) 进行种系 DNA 提取。 将使用 ABI PRISM 7900 SDS 仪器（Applied Biosystems，Carlsbad，California，USA）和经过验证的 TaqMan® SNP 基因分型分析（Applied Biosystems）进行基因等位基因区分。 PCR反应将根据制造商的方案进行。 在根据 PFS 报告足够数量的事件（>80% 的研究人群）之前，不会进行基因分型。

统计分析 该回顾性分析的第一个目的是评估这些研究的基因多态性在预测贝伐珠单抗对 PFS 的反应方面的可能作用。 次要终点将是与总生存期 (OS) 和反应率的相关性。 通过 χ2 检验观察到的等位基因分布与 HWE 预期的分布之间的比较，将分析所有多态性是否偏离 Hardy-Weinberg 平衡 (HWE)。 基因多态性和响应率之间的任何相关性将通过双侧 Fisher 精确检验进行分析。 每个个体多态性和与 PFS 最相关的临床病理特征之间的关联将使用 Cox 比例风险模型进行测试。 将应用多因素降维 (MDR) 方法（使用 http://sourceforge.net/projects/mdr/ 上提供的 MDR 软件 2.0 beta 6 版）来研究基因多态性之间的相互作用在识别紫杉醇生物标志物中的作用加上贝伐珠单抗反应。

将选择具有与 OS 改善相关的最高 PFS 益处的基因型组合进行进一步分析。 将使用对数秩检验和 Kaplan-Meier 方法评估有利遗传概况和不利遗传概况之间的 PFS 差异，以评估生存曲线。 Cox 比例风险模型，具有可能的遗传特征以及与 PFS 单独相关的临床和病理患者特征，将用于计算调整后的风险比 (HR) 和 95% 置信区间 (95% CI)。 P 值 <0.05 将被认为具有统计学意义。 Kaplan-Meier 和 Cox 比例风险分析将使用 SPSS 17.0 版（SPSS，芝加哥，伊利诺伊州）进行。