Interacción de polimorfismo para predecir la eficacia de bevacizumab (BEVAGENE)

Pacientes con cáncer de mama metastásico (CMM) de ocho divisiones italianas de oncología médica, con CMM HER2 negativo confirmado histológicamente, tratadas con una terapia de primera línea que incluye bevacizumab 10 mg/m2 i.v. los días 1 y 15 combinado con paclitaxel de primera línea 90 mg/m2 i.v. los días 1, 8 y 15, cada 4 semanas, serán inscritos para el presente estudio farmacogenético. Los pacientes con CMM tratados con quimioterapia de primera línea que incluye paclitaxel sin bevacizumab también se inscribirán como grupo de control.

Los sitios de enfermedad metastásica se volverán a evaluar radiológicamente de acuerdo con los criterios 1.1 de los Criterios de evaluación de respuesta en tumores sólidos (RECIST), en pacientes con enfermedad medible. En pacientes sin lesiones medibles, la progresión de la enfermedad se definirá cuando aparezcan nuevas lesiones o cuando evolucionen las lesiones existentes. Asimismo, en el caso de lesiones no medibles, se definirá como progresión de la enfermedad el deterioro del estado clínico no debido a la toxicidad del tratamiento.

La supervivencia libre de progresión (PFS) se definirá como el período de tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta la primera observación de progresión de la enfermedad como se describe anteriormente, o muerte por cualquier causa. Se evaluará la respuesta, la SLP y la supervivencia general de todos los pacientes. Cada paciente que ingrese al estudio firmará el consentimiento informado. El protocolo ha sido aprobado por el comité de ética de Azienda Ospedaliera-Universitaria Pisana, Pisa, Italia, (CESM 3077/2010).

Análisis de genotipado Se recogerán muestras de sangre (3 ml) en tubos de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) y se almacenarán a -80 °C. Los genes y polimorfismos implicados en la vía de la angiogénesis y ya sugeridos como predictores de la respuesta a bevacizumab, serán elegidos para los presentes análisis. La extracción de ADN de la línea germinal se realizará con el kit QIAamp DNA Blood Mini (Qiagen, Valencia, California, EE. UU.). La discriminación alélica de los genes se realizará con un instrumento ABI PRISM 7900 SDS (Applied Biosystems, Carlsbad, California, EE. UU.) y con ensayos de genotipado TaqMan® SNP validados (Applied Biosystems). Las reacciones de PCR se llevarán a cabo de acuerdo con el protocolo del fabricante. La genotipificación no se realizará hasta que se informe una cantidad adecuada de eventos (>80 % en la población de estudio) en términos de SLP.

Análisis estadístico El primer objetivo de este análisis retrospectivo será evaluar el posible papel de estos polimorfismos genéticos investigados para predecir la respuesta a bevacizumab en términos de SLP. Los criterios de valoración secundarios serán las correlaciones con la supervivencia global (SG) y la tasa de respuesta. Todos los polimorfismos se analizarán en busca de desviación del equilibrio de Hardy-Weinberg (HWE) mediante la comparación entre las distribuciones alélicas observadas con las esperadas del HWE mediante la prueba de χ2. Cualquier correlación entre los polimorfismos genéticos y la tasa de respuesta se analizará mediante la prueba exacta de Fisher de dos caras. La asociación entre cada polimorfismo individual y las características clínico-patológicas más relevantes con la SLP se probará mediante un modelo de riesgos proporcionales de Cox. Se aplicará la metodología de reducción de la dimensionalidad multifactorial (MDR) (utilizando la versión 2.0 beta 6 del software MDR disponible en http://sourceforge.net/projects/mdr/) para investigar el papel de una interacción entre polimorfismos genéticos en la identificación de biomarcadores de paclitaxel más respuesta a bevacizumab.

La combinación de genotipos con el mayor beneficio de PFS correlacionado con una mejora de OS se elegirá para análisis posteriores. La diferencia en SLP entre los perfiles genéticos favorables y los perfiles genéticos desfavorables se evaluará con la prueba de rango logarítmico y el método de Kaplan-Meier para evaluar las curvas de supervivencia. Se utilizará un modelo de riesgos proporcionales de Cox, con los posibles perfiles genéticos y las características clínicas y patológicas de los pacientes correlacionadas individualmente con la SLP, para calcular el cociente de riesgos instantáneos (HR) ajustado y el intervalo de confianza del 95 % (IC del 95 %). Se aceptará como estadísticamente significativo un valor de p <0,05. Los análisis de riesgos proporcionales de Kaplan-Meier y Cox se realizarán utilizando el SPSS versión 17.0 (SPSS, Chicago, IL).