Interação de polimorfismo para prever a eficácia do bevacizumabe (BEVAGENE)

Pacientes com câncer de mama metastático (MBC) de oito divisões italianas de Oncologia Médica, com MBC HER2-negativo confirmado histologicamente, tratados com uma terapia de primeira linha incluindo bevacizumabe 10 mg/m2 i.v. nos dias 1 e 15 combinado com paclitaxel de primeira linha 90 mg/m2 i.v. nos dias 1, 8 e 15, a cada 4 semanas, serão incluídos no presente estudo farmacogenético. Pacientes com MBC tratados com quimioterapia de primeira linha, incluindo paclitaxel sem bevacizumabe, também serão inscritos como grupo controle.

Os locais de doença metastática serão reavaliados radiologicamente de acordo com os Critérios de Avaliação de Resposta em Tumores Sólidos (RECIST) critérios 1.1, em pacientes com doença mensurável. Em pacientes sem lesões mensuráveis, a progressão da doença será definida quando novas lesões aparecerem ou quando lesões existentes evoluírem. Da mesma forma, no caso de lesões não mensuráveis, a deterioração do quadro clínico não devida à toxicidade do tratamento será definida como progressão da doença.

A sobrevida livre de progressão (PFS) será definida como o período de tempo desde o início do tratamento até a primeira observação de progressão da doença conforme descrito acima, ou morte por qualquer causa. Todos os pacientes serão avaliados quanto à resposta, PFS e sobrevida global. Cada paciente que entrar no estudo assinará o consentimento informado. O protocolo foi aprovado pelo comitê de ética da Azienda Ospedaliera-Universitaria Pisana, Pisa, Itália, (CESM 3077/2010).

Análises de genotipagem Amostras de sangue (3 ml) serão coletadas em tubos de ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) e armazenadas a -80°C. Genes e polimorfismos envolvidos na via de angiogênese e já sugeridos como preditores de resposta ao bevacizumabe serão escolhidos para as presentes análises. A extração de DNA germinativo será realizada usando o QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Valencia, Califórnia, EUA). A discriminação alélica dos genes será realizada usando um instrumento ABI PRISM 7900 SDS (Applied Biosystems, Carlsbad, Califórnia, EUA) e com ensaios de genotipagem TaqMan® SNP validados (Applied Biosystems). As reações de PCR serão realizadas de acordo com o protocolo do fabricante. A genotipagem não será realizada até que um número adequado de eventos (>80% na população do estudo) seja relatado em termos de PFS.

Análise estatística O primeiro objetivo desta análise retrospectiva será avaliar o possível papel desses polimorfismos genéticos investigados para prever a resposta do bevacizumabe em termos de PFS. Os pontos finais secundários serão as correlações com a sobrevida global (OS) e a taxa de resposta. Todos os polimorfismos serão analisados ​​quanto ao desvio do Equilíbrio de Hardy-Weinberg (HWE) por meio da comparação entre as distribuições alélicas observadas com as esperadas do HWE pelo teste do χ2. Qualquer correlação entre os polimorfismos do gene e a taxa de resposta será analisada pelo Teste Exato de Fisher bicaudal. A associação entre cada polimorfismo individual e as características clínico-patológicas mais relevantes com PFS será testada usando um modelo de riscos proporcionais de Cox. A metodologia Multifactor Dimensionality Reduction (MDR) será aplicada (utilizando a versão 2.0 beta 6 do software MDR disponível em http://sourceforge.net/projects/mdr/) para investigar o papel de uma interação entre polimorfismos genéticos na identificação de biomarcadores de paclitaxel mais resposta ao bevacizumabe.

A combinação de genótipos com o maior benefício de PFS correlacionado com uma melhoria de OS será escolhida para análises posteriores. A diferença na PFS entre os perfis genéticos favoráveis ​​e os perfis genéticos desfavoráveis ​​será avaliada com o teste de log-rank e o método de Kaplan-Meier para avaliar as curvas de sobrevivência. Um modelo de riscos proporcionais de Cox, com os possíveis perfis genéticos e as características clínicas e patológicas dos pacientes individualmente correlacionados com o PFS, será usado para calcular a razão de riscos ajustada (HR) e o intervalo de confiança de 95% (IC 95%). Um valor de P <0,05 será aceito como estatisticamente significativo. As análises de riscos proporcionais Kaplan-Meier e Cox serão realizadas usando o SPSS versão 17.0 (SPSS, Chicago, IL).