肺炎球菌多糖疫苗在新兵中的有效性

研究参与者。 鉴于记录在案的呼吸道疾病高发率，美国军事受训人员被选中参与。 根据以下假设计算出 166,744 人年的样本量：12% 的军训减员，临床肺炎发病率为每 1000 人年 11 例，20% 的肺炎由 Sp 引起，90% 的 Sp 引起由疫苗覆盖的 Sp 菌株引起的肺炎，以及 70% 的疫苗效力。

注册和跟进。 这项研究得到了多个国防部 (DoD) 机构审查委员会的批准。 使用知情同意程序，邀请 5 个新兵培训中心（位于南卡罗来纳州、密苏里州、伊利诺伊州和加利福尼亚州）的基础培训新兵在第一周的培训期间参加。 对所有女性进行了妊娠筛查，结果为阳性的女性未被纳入。 排除标准包括在过去 5 年内曾接种过 23 价肺炎球菌疫苗，或有需要或不能接种肺炎球菌疫苗的医疗状况。 研究参与者完成了一份研究问卷，并接受了预先包装、盲法和随机注射，其中含有 1:1 比例的 23 价肺炎球菌疫苗（惠氏制药或默克公司）或生理盐水。 研究注射与其他招募中的疫苗接种同时进行，其中可能包括针对脊髓灰质炎、麻疹-腮腺炎-风疹、水痘、破伤风-白喉、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、脑膜炎球菌病（A/C /Y/W135）和流感。 在新兵培训结束时，进行了一份问卷调查，以捕捉主动和被动监测可能遗漏的疾病症状和体征。

随着注册持续两年多，最先注册的人的人年贡献大于试验结束时注册的人。 原计划监测期为1.7年。 这后来被延长到从第一位参与者入组后的 6.7 年，以继续监测这项大型双盲试验的影响。

标本采集。 在主动监测期间，主治医师确定了患有疑似肺炎的研究参与者。 研究人员从参与者那里获得了三个咽拭子、血培养（需氧和厌氧）、痰液样本（如果可以生产的话）和急性血清样本。 在所有经影像学确诊的肺炎病例出现急性症状后 2 周，我们还尝试采集恢复期血清样本。 这些尝试并不总是成功的。 障碍包括：受训人员退役、在野外演习时难以接触到新兵，以及新兵毕业并搬到新的工作地点。

实验室方法。 在美国病理学家学会 (CAP) 认可的实验室海军健康研究中心 (NHRC) 呼吸系统疾病实验室，使用经典、分子和血清学实验室方法对从研究参与者收集的标本进行了检查。

NHRC 使用荧光抗体抗原测试从咽拭子中分离出腺病毒、流感病毒、副流感病毒和呼吸道合胞病毒。 使用标准病毒鉴定技术对腺病毒和流感分离株进行分型。

使用标准技术接种痰标本进行 Sp 培养。 确定 Sp 物种后，进行荚膜血清分型，并评估标准抗菌药物敏感性。 对成对的急性和恢复期血清评估了针对肺炎球菌溶血素的 IgM 和 IgG 滴度。 使用如 Kalin, M, et al. 描述的程序，用酶免疫测定法测试血清。

对于肺炎衣原体聚合酶链反应 (PCR) 研究，从诊断为肺炎的患者身上采集咽拭子，立即将其置于衣原体转运培养基中，并在冰上转运。 咽拭子用于直接 PCR 方法，例如 Campbell 等人描述的程序。 通过标准方法通过 1.5% 琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物。 样品制备、PCR 扩增和扩增产物的分析在不同的房间进行。

为评估肺炎支原体，收集咽拭子并立即放入 2.0 ml 肺炎支原体转运培养基（SP-4 肉汤）中。 培养、传代培养和分子测试是按照先前发布的协议进行的。

捕获疾病结果。 结果测量包括任何原因的肺炎、任何原因的呼吸系统疾病、新兵训练临床肺炎（在新兵训练期间通过放射学确认）或训练损失天数。 仅在新兵训练期间（海军陆战队 12 周，海军 8 周，陆军 9 周）对放射学确诊的肺炎进行了主动监测。 在新兵训练期间和随后的工作地点，使用门诊医疗遭遇 (SADR)、住院遭遇 (SIDR) 和平民遭遇的国防部综合电子数据库，对医疗遭遇的结果进行被动电子监测，而不是新兵训练临床肺炎向国防部 (HCSR) 收费的设施。 在整个研究期间监测 ICD-9-CM 代码 480 到 -486 和 487 的这些结果。 脑膜炎病例（ICD-9-CM 代码 320 到 -320.2、320.9 和 322.9）也通过这些电子数据库捕获。

统计分析。 在对人群特征进行描述性调查后，进行了单变量分析，以评估人口统计学变量与急性呼吸道感染、肺炎和影像学确诊肺炎之间关联的重要性。

主动监测时间是从参与者的注册日期到预计完成培训或诊断为放射学确诊的肺炎。 被动监测的计算时间是从入组之日到 2007 年 6 月 1 日、诊断为肺炎或急性呼吸道感染，或从现役离职，以先发生者为准。

使用回归诊断，研究了变量之间的共线性。 Cox 的比例风险事件发生时间模型用于评估研究参与者的结果，同时调整治疗组之间人口特征的差异，并考虑不同的入组日期和主动和被动监测期。 饱和 Cox 回归模型通过手动向后逐步消除方法减少了那些在 α = 0.05 水平上不显着的变量并且不混淆其他关联度量。 此外，还绘制了从入学到随访期结束的累积结果概率图。 使用统计分析系统 (SAS) 软件（9.0 版，SAS Institute, Inc., Cary, North Carolina）进行统计建模以生成调整后的风险比 (HR) 和相关的 95% 置信区间 (CI)。

使用 1 相对风险 x 100% 估计值计算所有参与者和每个服务分支的每个结果的粗略疫苗有效性测量值。

培训损失的天数是通过在培训结束时对 71,692 名研究参与者的方便样本进行的调查来估算的。 使用 ANOVA 评估治疗组之间的差异。