Eficacia de la vacuna antineumocócica polisacárida en reclutas militares

Participantes del estudio. Dadas sus altas tasas documentadas de enfermedades respiratorias, se seleccionó a los militares estadounidenses en formación para participar. Se calculó un tamaño de muestra de 166 744 años-persona con base en los siguientes supuestos: 12 % de deserción del entrenamiento militar, tasa de ataque de neumonía clínica de 11 casos por 1000 años-persona, 20 % de neumonías capturadas causadas por Sp, 90 % de Sp capturadas neumonías causadas por una cepa Sp cubierta por la vacuna y 70% de eficacia de la vacuna.

Inscripción y seguimiento. Este estudio fue aprobado por varias juntas de revisión institucional del Departamento de Defensa (DoD). Mediante un proceso de consentimiento informado, se invitó a los reclutas de capacitación básica en 5 centros de capacitación de reclutas (en Carolina del Sur, Missouri, Illinois y California) a participar durante su primera semana de capacitación. La detección del embarazo se realizó en todas las mujeres, y aquellas con resultados positivos no se inscribieron. Los criterios de exclusión incluyeron haber recibido previamente la vacuna antineumocócica 23-valente durante los 5 años anteriores o tener una condición médica que requería o impedía la vacunación antineumocócica. Los participantes del estudio completaron un cuestionario del estudio y se les administró una inyección preempaquetada, ciega y aleatoria que contenía la vacuna antineumocócica 23-valente (Wyeth Pharmaceuticals o Merck & Company, Inc.) o solución salina en una proporción de 1:1. Las inyecciones del estudio se administraron al mismo tiempo que otras vacunas reclutadas durante el procesamiento, que pueden haber incluido vacunas contra la poliomielitis, el sarampión, las paperas, la rubéola, la varicela, el tétanos y la difteria, el virus de la hepatitis A, el virus de la hepatitis B, la enfermedad meningocócica (A/C /Y/W135) e influenza. Al final de la capacitación de los reclutas, se administró un cuestionario para capturar los síntomas y signos de enfermedades que podrían no haber sido captados por la vigilancia activa y pasiva.

Como la inscripción continuó durante más de dos años, las contribuciones por año-persona de los primeros inscritos fueron mayores que las de los inscritos cerca del final del ensayo. El período de vigilancia planificado originalmente era de 1,7 años. Posteriormente, se amplió a 6,7 ​​años a partir de la inscripción del primer participante, para el control continuo del impacto en este gran ensayo doble ciego.

Coleccion de especimenes. Durante el período de vigilancia activa, el médico tratante identificó a los participantes del estudio con sospecha de neumonía. El personal del estudio obtuvo tres frotis de garganta, hemocultivos (aerobios y anaerobios), muestras de esputo (si se podían producir) y muestras de suero agudas de los participantes. Se hicieron intentos para capturar también una muestra de suero convaleciente 2 semanas después de la presentación aguda en todos los casos de neumonía confirmados radiográficamente. Estos intentos no siempre tuvieron éxito. Las barreras incluyeron: la baja de los aprendices del servicio militar, la dificultad para obtener acceso a los reclutas cuando estaban en ejercicios de campo y los reclutas que se graduaban y se trasladaban a nuevos lugares de destino.

Métodos de laboratorio. Las muestras recolectadas de los participantes del estudio se examinaron utilizando métodos de laboratorio clásicos, moleculares y serológicos en el Laboratorio de Enfermedades Respiratorias del Centro de Investigación de Salud Naval (NHRC), un laboratorio acreditado por el Colegio de Patólogos Estadounidenses (CAP).

La NHRC aisló adenovirus, influenza, parainfluenza y virus respiratorio sincitial de hisopos faríngeos utilizando pruebas de antígenos de anticuerpos fluorescentes. Los aislados de adenovirus e influenza se tipificaron utilizando técnicas estándar de identificación viral.

Las muestras de esputo se inocularon para el cultivo de Sp usando técnicas estándar. Cuando se identificaron las especies de Sp, se realizó la serotipificación capsular y se evaluaron las sensibilidades antimicrobianas estándar. Se evaluaron los títulos de IgM e IgG contra neumolisina en sueros agudos y convalecientes pareados. Los sueros se analizaron con un inmunoensayo enzimático utilizando un procedimiento como el descrito por Kalin, M, et al.

Para el estudio de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de Chlamydophila pneumoniae, se recolectaron hisopos de garganta de pacientes diagnosticados con neumonía, se colocaron inmediatamente en medios de transporte de Chlamydia y se transportaron en hielo. Los frotis de garganta se usaron en un método de PCR directo, como el procedimiento descrito por Campbell et al. Los productos de amplificación se analizaron por electroforesis a través de un gel de agarosa al 1,5% por métodos estándar. La preparación de muestras, la amplificación por PCR y el análisis de los productos de amplificación se realizaron en salas separadas.

Para evaluar M. pneumoniae, se recogió una torunda de garganta y se colocó inmediatamente en 2,0 ml de medio de transporte de M. pneumoniae (caldo SP-4). El cultivo, el subcultivo y las pruebas moleculares se realizaron según los protocolos publicados anteriormente.

Captura de los resultados de la enfermedad. Las medidas de resultado incluyeron neumonía por cualquier causa, enfermedad respiratoria por cualquier causa, neumonía clínica del entrenamiento del recluta (confirmada radiográficamente durante el período de entrenamiento del recluta) o días perdidos de entrenamiento. La vigilancia activa se llevó a cabo para las neumonías confirmadas por radiografía solo durante el período de entrenamiento de reclutas (Marines: 12 semanas, Armada: 8 semanas, Ejército: 9 semanas). El monitoreo electrónico pasivo de los encuentros de atención médica para resultados distintos de la neumonía clínica de capacitación de reclutas se llevó a cabo durante la capacitación de reclutas y en los lugares de destino posteriores utilizando las bases de datos electrónicas integrales del Departamento de Defensa de encuentros de atención médica ambulatoria (SADR), encuentros de pacientes hospitalizados (SIDR) y encuentros en civil instalaciones facturadas al Departamento de Defensa (HCSR). Los códigos ICD-9-CM 480 a -486 y 487 fueron monitoreados para estos resultados durante todo el período de estudio. Los casos de meningitis (códigos ICD-9-CM 320 a -320.2, 320.9 y 322.9) también se capturaron a través de estas bases de datos electrónicas.

Análisis estadístico. Después de una investigación descriptiva de las características de la población, se realizaron análisis univariados para evaluar la importancia de las asociaciones entre las variables demográficas con infección respiratoria aguda, neumonía y neumonía confirmada por radiografía.

El tiempo de vigilancia activa se calculó desde la fecha de inscripción del participante hasta la finalización prevista del entrenamiento o el diagnóstico de neumonía confirmada por radiografía. La vigilancia pasiva se calculó desde la fecha de inscripción hasta el 01 de junio de 2007, diagnóstico de neumonía o infección respiratoria aguda, o separación del servicio activo, lo que ocurriera primero.

Usando diagnósticos de regresión, se investigó la colinealidad entre las variables. Se utilizó el modelo de tiempo hasta el evento de riesgo proporcional de Cox para evaluar los resultados entre los participantes del estudio, mientras se ajustaban las diferencias en las características de la población entre los brazos de tratamiento y se tomaban en cuenta las diferentes fechas de inscripción y los períodos de vigilancia activa y pasiva. El modelo de regresión de Cox saturado se redujo mediante un enfoque manual de eliminación por pasos hacia atrás, eliminando aquellas variables que eran insignificantes al nivel α = 0,05 y sin confundir las otras medidas de asociación. Además, se graficaron las probabilidades acumulativas de los resultados desde las inscripciones hasta el final de los períodos de seguimiento. El modelado estadístico para producir cocientes de riesgos instantáneos (HR) ajustados e intervalos de confianza (IC) del 95% asociados se realizó utilizando el software Statistical Analysis System (SAS) (Versión 9.0, SAS Institute, Inc., Cary, Carolina del Norte).

Las medidas crudas de efectividad de la vacuna para cada resultado se calcularon para todos los participantes y para cada rama de servicio utilizando una estimación de 1 riesgo relativo x 100%.

Los días perdidos de capacitación se estimaron mediante una encuesta administrada al final de la capacitación a una muestra de conveniencia de 71 692 participantes del estudio. Las diferencias entre los brazos de tratamiento se evaluaron mediante ANOVA.