Efficacia del vaccino pneumococcico polisaccaridico nelle reclute militari

Partecipanti allo studio. Dati i loro alti tassi documentati di malattie respiratorie, i tirocinanti militari statunitensi sono stati selezionati per la partecipazione. È stata calcolata una dimensione del campione di 166.744 anni-persona sulla base delle seguenti ipotesi: 12% di logoramento dovuto all'addestramento militare, tasso di attacco di polmonite clinica di 11 casi per 1000 anni-persona, 20% di polmoniti catturate causate da Sp, 90% di Sp catturate polmoniti causate da un ceppo Sp coperto da vaccino e un'efficacia del vaccino del 70%.

Iscrizione e follow-up. Questo studio è stato approvato da diversi comitati di revisione istituzionale del Dipartimento della Difesa (DoD). Utilizzando un processo di consenso informato, le reclute della formazione di base presso 5 centri di formazione per reclute (in South Carolina, Missouri, Illinois e California) sono state invitate a partecipare durante la loro prima settimana di formazione. Lo screening della gravidanza è stato eseguito su tutte le donne e quelle con risultati positivi non sono state arruolate. I criteri di esclusione includevano l'aver precedentemente ricevuto un vaccino pneumococcico 23-valente durante i 5 anni precedenti o la presenza di una condizione medica che richiedeva o precludeva la vaccinazione pneumococcica. I partecipanti allo studio hanno completato un questionario di studio e hanno ricevuto un'iniezione preconfezionata, in cieco e randomizzata contenente il vaccino pneumococcico 23-valente (Wyeth Pharmaceuticals o Merck & Company, Inc.) o soluzione salina in un rapporto 1:1. Le iniezioni dello studio sono state somministrate contemporaneamente ad altre vaccinazioni in corso di reclutamento, che potrebbero aver incluso vaccini contro poliomielite, morbillo-parotite-rosolia, varicella, tetano-difterite, virus dell'epatite A, virus dell'epatite B, malattia meningococcica (A/C /Y/W135) e influenza. Al termine della formazione delle reclute, è stato somministrato un questionario per rilevare sintomi e segni di malattie che potrebbero essere sfuggiti alla sorveglianza attiva e passiva.

Poiché l'arruolamento è continuato per più di due anni, i contributi per anno-persona dei primi iscritti erano maggiori di quelli iscritti verso la fine del processo. Il periodo di sorveglianza originariamente previsto era di 1,7 anni. Questo è stato successivamente esteso a 6,7 ​​anni dall'arruolamento del primo partecipante, per il monitoraggio continuo dell'impatto in questo ampio studio in doppio cieco.

Raccolta di campioni. Durante il periodo di sorveglianza attiva, i partecipanti allo studio con sospetta polmonite sono stati identificati dal medico curante. Il personale dello studio ha ottenuto tre tamponi faringei, emocolture (aerobiche e anaerobiche), campione di espettorato (se producibile) e campioni di siero acuto dai partecipanti. Sono stati fatti tentativi per catturare anche un campione di siero convalescente 2 settimane dopo la presentazione acuta su tutti i casi di polmonite confermati radiograficamente. Questi tentativi non hanno sempre avuto successo. Le barriere includevano: licenziamento del tirocinante dal servizio militare, difficoltà nell'ottenere l'accesso alle reclute quando erano in esercitazioni sul campo e reclute che si diplomavano e si trasferivano in nuove stazioni di servizio.

Metodi di laboratorio. I campioni raccolti dai partecipanti allo studio sono stati esaminati utilizzando metodi di laboratorio classici, molecolari e sierologici presso il Naval Health Research Center (NHRC) Respiratory Disease Laboratory, un laboratorio accreditato dal College of American Pathologist (CAP).

NHRC ha isolato l'adenovirus, l'influenza, la parainfluenza e il virus respiratorio sinciziale dai tamponi faringei mediante test dell'antigene anticorpale fluorescente. Gli isolati di adenovirus e influenza sono stati tipizzati utilizzando tecniche di identificazione virale standard.

I campioni di espettorato sono stati inoculati per la coltura Sp utilizzando tecniche standard. Quando sono state identificate le specie Sp, è stata eseguita la sierotipizzazione capsulare e sono state valutate le sensibilità antimicrobiche standard. I sieri acuti e convalescenti accoppiati sono stati valutati per i titoli IgM e IgG per pneumolisina. I sieri sono stati testati con un saggio immunoenzimatico utilizzando una procedura come quella descritta da Kalin, M, et al.

Per lo studio sulla reazione a catena della polimerasi (PCR) di Chlamydophila pneumoniae, i tamponi faringei sono stati raccolti da pazienti con diagnosi di polmonite, immediatamente collocati in terreni di trasporto per Chlamydia e trasportati su ghiaccio. I tamponi faringei sono stati utilizzati in un metodo PCR diretto, come la procedura descritta da Campbell et al. I prodotti di amplificazione sono stati analizzati mediante elettroforesi attraverso un gel di agarosio all'1,5% con metodi standard. La preparazione del campione, l'amplificazione PCR e l'analisi dei prodotti di amplificazione sono state eseguite in stanze separate.

Per valutare M. pneumoniae, è stato raccolto un tampone faringeo e posto immediatamente in 2,0 ml di terreno di trasporto per M. pneumoniae (brodo SP-4). La coltura, la sottocoltura e i test molecolari sono stati eseguiti secondo i protocolli precedentemente pubblicati.

Catturare gli esiti della malattia. Le misure di esito includevano qualsiasi causa di polmonite, qualsiasi causa di malattia respiratoria, polmonite clinica durante l'addestramento del reclutamento (confermata radiograficamente durante il periodo di addestramento del reclutamento) o giorni persi dall'addestramento. La sorveglianza attiva è stata condotta per le polmoniti confermate radiograficamente solo durante il periodo di addestramento alla recluta (Marines-12 settimane, Navy-8 settimane, Army-9 settimane). Il monitoraggio elettronico passivo degli incontri di assistenza sanitaria per esiti diversi dall'addestramento del reclutamento polmonite clinica ha avuto luogo durante l'addestramento del reclutamento e presso le successive postazioni di servizio utilizzando i database elettronici completi del Dipartimento della Difesa degli incontri sanitari ambulatoriali (SADR), degli incontri con pazienti ricoverati (SIDR) e degli incontri presso civili strutture fatturate al DoD (HCSR). I codici ICD-9-CM da 480 a -486 e 487 sono stati monitorati per questi risultati durante l'intero periodo di studio. Anche i casi di meningite (codici ICD-9-CM da 320 a -320.2, 320.9 e 322.9) sono stati acquisiti attraverso questi database elettronici.

Analisi statistica. Dopo un'indagine descrittiva delle caratteristiche della popolazione, sono state eseguite analisi univariate per valutare il significato delle associazioni tra variabili demografiche con infezione respiratoria acuta, polmonite e polmonite confermata radiograficamente.

Il tempo di sorveglianza attiva è stato calcolato dalla data di iscrizione del partecipante al completamento previsto della formazione o alla diagnosi di polmonite confermata radiograficamente. La sorveglianza passiva è stata calcolata dalla data di iscrizione al 01 giugno 2007, diagnosi di polmonite o infezione respiratoria acuta o separazione dal servizio attivo, a seconda di quale evento si sia verificato per primo.

Utilizzando la diagnostica di regressione, è stata studiata la collinearità tra le variabili. La modellazione del tempo all'evento del rischio proporzionale di Cox è stata utilizzata per valutare i risultati tra i partecipanti allo studio, aggiustando le differenze nelle caratteristiche della popolazione tra i bracci di trattamento e tenendo conto delle diverse date di iscrizione e dei periodi di sorveglianza attiva e passiva. Il modello di regressione di Cox saturato è stato ridotto mediante un approccio manuale di eliminazione graduale all'indietro rimuovendo quelle variabili che erano insignificanti a livello α = 0,05 e non confondendo le altre misure di associazione. Inoltre, sono state rappresentate graficamente le probabilità cumulative dei risultati dalle iscrizioni fino alla fine dei periodi di follow-up. La modellazione statistica per produrre rapporti di rischio aggiustati (HR) e intervalli di confidenza al 95% associati (IC) è stata eseguita utilizzando il software Statistical Analysis System (SAS) (versione 9.0, SAS Institute, Inc., Cary, North Carolina).

Le misure grezze di efficacia del vaccino per ciascun risultato sono state calcolate per tutti i partecipanti e per ciascun ramo del servizio utilizzando una stima del rischio relativo 1 x 100%.

I giorni persi dalla formazione sono stati stimati utilizzando un sondaggio somministrato alla fine della formazione a un campione di convenienza di 71.692 partecipanti allo studio. Le differenze tra i bracci di trattamento sono state valutate mediante ANOVA.