Eficácia da vacina pneumocócica polissacarídica em recrutas militares

Participantes do estudo. Dadas as altas taxas documentadas de doenças respiratórias, os estagiários militares dos EUA foram selecionados para participar. Um tamanho de amostra de 166.744 pessoas-ano foi calculado com base nas seguintes suposições: 12% de perda de treinamento militar, taxa de ataque de pneumonia clínica de 11 casos por 1.000 pessoas-ano, 20% de pneumonias capturadas causadas por Sp, 90% de Sp capturado pneumonias causadas por uma cepa Sp coberta por vacina e 70% de eficácia da vacina.

Cadastro e acompanhamento. Este estudo foi aprovado por vários conselhos de revisão institucional do Departamento de Defesa (DoD). Usando um processo de consentimento informado, recrutas de treinamento básico em 5 centros de treinamento de recrutamento (na Carolina do Sul, Missouri, Illinois e Califórnia) foram convidados a participar durante sua primeira semana de treinamento. A triagem de gravidez foi realizada em todas as mulheres, e aquelas com resultados positivos não foram incluídas. Os critérios de exclusão incluíram ter recebido anteriormente a vacina pneumocócica 23-valente durante os 5 anos anteriores ou ter uma condição médica que exigisse ou impedisse a vacinação pneumocócica. Os participantes do estudo preencheram um questionário do estudo e receberam uma injeção pré-embalada, cega e aleatória contendo a vacina pneumocócica 23-valente (Wyeth Pharmaceuticals ou Merck & Company, Inc.) ou soro fisiológico na proporção de 1:1. As injeções do estudo foram administradas ao mesmo tempo que outras vacinas em processo de recrutamento, que podem ter incluído vacinas contra poliomielite, sarampo-caxumba-rubéola, varicela, tétano-difteria, vírus da hepatite A, vírus da hepatite B, doença meningocócica (A/C /Y/W135) e influenza. Ao final do treinamento dos recrutas, foi aplicado um questionário para captar sintomas e sinais de doenças que poderiam ter passado despercebidos pela vigilância ativa e passiva.

Como as inscrições continuaram por mais de dois anos, as contribuições por pessoa/ano dos primeiros inscritos foram maiores do que as dos inscritos perto do final do estudo. O período de vigilância originalmente planejado era de 1,7 anos. Isso foi posteriormente estendido para 6,7 ​​anos a partir da inscrição do primeiro participante, para monitoramento contínuo do impacto neste grande estudo duplo-cego.

Coleta de exemplares. Durante o período de vigilância ativa, os participantes do estudo com suspeita de pneumonia foram identificados pelo médico assistente. A equipe do estudo obteve três swabs da garganta, hemoculturas (aeróbica e anaeróbica), amostra de escarro (se produzida) e amostras de soro agudo dos participantes. Tentativas foram feitas para também capturar uma amostra de soro convalescente 2 semanas após a apresentação aguda em todos os casos de pneumonia confirmados radiograficamente. Essas tentativas nem sempre foram bem-sucedidas. As barreiras incluíam: dispensa do estagiário do serviço militar, dificuldade em obter acesso aos recrutas quando eles estavam em exercícios de campo e recrutas se formando e mudando para novos postos de serviço.

Métodos laboratoriais. As amostras coletadas dos participantes do estudo foram examinadas usando métodos laboratoriais clássicos, moleculares e sorológicos no Laboratório de Doenças Respiratórias do Naval Health Research Center (NHRC), um laboratório credenciado pelo College of American Pathologist (CAP).

NHRC isolou adenovírus, influenza, parainfluenza e vírus sincicial respiratório de swabs faríngeos usando testes de antígeno de anticorpo fluorescente. Os isolados de adenovírus e influenza foram tipados usando técnicas padrão de identificação viral.

Espécimes de escarro foram inoculados para cultura de Sp usando técnicas padrão. Quando as espécies de Sp foram identificadas, a sorotipagem capsular foi realizada e as sensibilidades antimicrobianas padrão foram avaliadas. Soros agudos e convalescentes pareados foram avaliados quanto aos títulos de IgM e IgG para pneumolisina. Os soros foram testados com um imunoensaio enzimático usando um procedimento tal como descrito por Kalin, M, et al.

Para o estudo de reação em cadeia da polimerase (PCR) de Chlamydophila pneumoniae, amostras de garganta foram coletadas de pacientes diagnosticados com pneumonia, imediatamente colocadas em meio de transporte de Chlamydia e transportadas em gelo. Os swabs da garganta foram usados ​​em um método de PCR direto, como o procedimento descrito por Campbell et al. Os produtos de amplificação foram analisados ​​por eletroforese através de um gel de agarose a 1,5% por métodos padrão. A preparação da amostra, a amplificação por PCR e a análise dos produtos de amplificação foram realizadas em salas separadas.

Para avaliar M. pneumoniae, um swab da garganta foi coletado e imediatamente colocado em 2,0 ml de meio de transporte de M. pneumoniae (caldo SP-4). A cultura, a subcultura e o teste molecular foram realizados de acordo com os protocolos publicados anteriormente.

Capturando os resultados da doença. As medidas de desfecho incluíram qualquer causa de pneumonia, qualquer causa de doença respiratória, pneumonia clínica de treinamento de recrutamento (confirmada radiograficamente durante o período de treinamento de recrutamento) ou dias perdidos de treinamento. A vigilância ativa foi realizada para pneumonias confirmadas radiograficamente apenas durante o período de treinamento de recrutamento (Fuzileiros Navais-12 semanas, Marinha-8 semanas, Exército-9 semanas). Monitoramento eletrônico passivo de atendimentos de saúde para resultados diferentes do treinamento de recrutamento pneumonia clínica ocorreu durante o treinamento de recrutamento e nas estações de serviço subseqüentes usando os bancos de dados eletrônicos abrangentes do DoD de encontros de atendimento ambulatorial (SADR), encontros com pacientes internados (SIDR) e encontros em civis instalações faturadas para o DoD (HCSR). Os códigos 480 a -486 e 487 da CID-9-CM foram monitorados para esses resultados durante todo o período do estudo. Os casos de meningite (CID-9-CM códigos 320 a -320.2, 320.9 e 322.9) também foram capturados por meio desses bancos de dados eletrônicos.

Análise estatística. Após investigação descritiva das características populacionais, análises univariadas foram realizadas para avaliar a significância das associações entre variáveis ​​demográficas com infecção respiratória aguda, pneumonia e pneumonia confirmada por radiografia.

O tempo de vigilância ativa foi calculado a partir da data de inscrição do participante até a conclusão projetada do treinamento ou diagnóstico de pneumonia confirmada por radiografia. A vigilância passiva foi calculada a partir da data de admissão até 01 de junho de 2007, diagnóstico de pneumonia ou infecção respiratória aguda ou afastamento do serviço ativo, o que ocorrer primeiro.

Usando diagnósticos de regressão, a colinearidade entre as variáveis ​​foi investigada. A modelagem de risco proporcional de tempo até o evento de Cox foi usada para avaliar os resultados entre os participantes do estudo, ajustando as diferenças nas características da população entre os braços de tratamento e contabilizando diferentes datas de inscrição e períodos de vigilância ativa e passiva. O modelo de regressão de Cox saturado foi reduzido por uma abordagem manual de eliminação passo a passo retrógrada, removendo as variáveis ​​que eram insignificantes no nível α = 0,05 e não confundindo as outras medidas de associação. Além disso, as probabilidades cumulativas dos resultados das inscrições até o final dos períodos de acompanhamento foram representadas graficamente. A modelagem estatística para produzir taxas de risco ajustadas (HRs) e intervalos de confiança (ICs) associados de 95% foi realizada usando o software Statistical Analysis System (SAS) (Versão 9.0, SAS Institute, Inc., Cary, Carolina do Norte).

Medidas brutas de eficácia da vacina para cada resultado foram calculadas para todos os participantes e para cada ramo de serviço usando uma estimativa de 1 risco relativo x 100%.

Os dias perdidos de treinamento foram estimados usando uma pesquisa aplicada no final do treinamento a uma amostra de conveniência de 71.692 participantes do estudo. As diferenças entre os braços de tratamento foram avaliadas usando ANOVA.