吸烟对牙周炎细胞凋亡的影响

背景：

导致牙龈组织损伤的机制知之甚少，可能涉及免疫介导的反应和细菌的直接细胞病变效应。 基于细胞培养物中细菌的直接作用，细胞凋亡可能在牙周炎中发挥重要作用（Chen 1994）。

程序性细胞死亡（细胞凋亡）是有助于维持组织稳态的正常生理过程。 细胞凋亡过程可以通过各种刺激激素、细胞因子、生长因子、感染和免疫反应进行调节 (Renehan et al. 2001)。

在其他因素中，编码蛋白质 p53 和 Bcl-2 的两个基因的产物已被证明在细胞凋亡中发挥基本的调节作用。 P53是抑癌基因的蛋白产物，P53的表达可诱导细胞凋亡。 这种蛋白质还涉及组织动力学的调节，并且特别被认为会诱导终末分化细胞（包括炎症细胞）的细胞凋亡（Bulut 等人，2006 年）。

成纤维细胞是一种在结缔组织中合成细胞外和胶原蛋白的细胞。 它在伤口愈合中起着至关重要的作用。 成纤维细胞是结缔组织中最常见的细胞。 成纤维细胞的主要功能是通过不断分泌细胞外基质的前体来维持结缔组织的结构完整性。 据报道，牙龈炎和牙周炎中细胞凋亡水平增加（Jarenberg 等人，2002 年）。

吸烟是许多疾病的危险因素，最近的证据表明吸烟对牙周健康有不利影响。 许多流行病学研究表明，吸烟与牙周炎的患病率和严重程度之间存在密切关联（Bostrom 等人，1998 年）。 然而，人们对吸烟者牙周炎的发病机制知之甚少，有数据表明吸烟对牙周组织的影响包括嗜中性粒细胞功能缺陷、血清抗体对牙周病原体的反应受损以及牙龈成纤维细胞功能可能减弱（Shivanaikar 等人，2001 年）。 吸烟者被认为是牙周炎的高危人群，吸烟史是未来疾病活动的有用临床预测指标（Hanokia 等人，2000 年）。

研究目的：

• 使用免疫组织化学方法研究吸烟对牙周炎吸烟者与非吸烟者牙周炎成纤维细胞凋亡的影响。
• 慢性和侵袭性牙周炎牙龈成纤维细胞凋亡水平的比较。

材料和方法：

大马士革大学牙科学院牙周病学系的患者将邀请总共 80 名受试者参加这项研究。 该研究将由特定的审查委员会批准。 在完成医疗和牙科病史问卷调查后，将根据特定的纳入标准招募受试者。 在被告知研究的性质后，患者将签署同意书。

患者的选择将根据 1999 年牙周病和病症分类系统国际研讨会 (Armitage 1999) 批准的标准进行，使用五个临床参数和全口或全景 X 光片进行诊断。

受试者将被分配到四组：

• 吸烟慢性牙周炎组 (ChP-S)：包括 20 名吸烟者，年龄 > 45 岁，每个象限存在 ≥ 2 个非第一磨牙或切牙的非相邻部位，探诊深度 (PD) ≥ 5 mm , 轻轻探查会流血。 经证实的影像学骨丢失≥牙根长度的 30%，口腔卫生差的患者，累积的牙菌斑数量与临床附着水平 (CAL) 的数量相称
• 非吸烟慢性牙周炎组 (ChP-NS)：包括 20 名年龄-性别匹配的非吸烟者慢性牙周炎患者。
• 吸烟侵袭性牙周炎组 (AgP-S)：包括 20 名吸烟者，年龄 < 35 岁，诊断为快速附着丧失，除第一磨牙和切牙外，至少三颗牙齿周围的牙周袋深度 (PD) > 4 mm。 快速骨质破坏（患病部位骨质流失>50%）。 牙菌斑与牙龈炎症严重程度之间的关系较弱。
• 非吸烟侵袭性牙周炎组 (AgP-NS)：包括 20 名年龄和性别匹配的不吸烟且患有侵袭性牙周炎的患者。

临床测量：

标准牙周探针将用于记录每颗牙齿六个部位的牙周指数。 检查的临床参数包括探诊出血 (BOP)、菌斑指数 (PI)、临床附着丧失 (CAL) 和牙周袋深度 (PPD) 和牙龈指数 (GI)。

活检收集和分析

• 活检样本将在手术治疗（开放皮瓣刮除术）期间从患者身上获得，其中活检取自乳头的基部区域。
• 样品将置于 10% 福尔马林中。
• 然后将样品放入石蜡中。
• 样品将通过 p53 单克隆小鼠抗人抗体进行分析。