Influência do Fumo na Apoptose na Periodontite

Fundo:

Os mecanismos responsáveis ​​pelo dano tecidual gengival são pouco compreendidos, e tanto reações imunomediadas quanto efeitos citopáticos diretos de bactérias podem estar envolvidos. Com base no efeito direto de bactérias em culturas de células, foi sugerido que a apoptose pode desempenhar um papel importante na periodontite (Chen 1994).

A morte celular programada (apoptose) é um processo fisiológico normal que contribui para a manutenção da homeostase tecidual. O processo de apoptose pode ser modulado por vários estímulos hormonais, citocinas, fatores de crescimento, infecções e respostas imunes (Renehan et al. 2001).

Entre outros fatores, os produtos de dois genes que codificam as proteínas p53 e Bcl-2 têm demonstrado desempenhar um papel regulatório fundamental na apoptose. P53 é o produto proteico do gene supressor de tumor, e a expressão de P53 pode induzir a apoptose. Esta proteína também está envolvida na regulação da dinâmica do tecido, e acredita-se especificamente que induza apoptose em células diferenciadas terminalmente, incluindo células inflamatórias (Bulut et al.2006).

O fibroblasto é um tipo de célula que sintetiza o extracelular e o colágeno no tecido conjuntivo. Desempenha um papel crítico na cicatrização de feridas. Os fibroblastos são as células mais comuns no tecido conjuntivo. A principal função dos fibroblastos é manter a integridade estrutural do tecido conjuntivo através da secreção contínua de precursores da matriz extracelular. foi relatado que os níveis de apoptose aumentaram na gengivite e na periodontite (Jarenberg et al. 2002).

O tabagismo é um fator de risco para muitas doenças, e evidências recentes indicam que fumar influencia negativamente a saúde periodontal. Vários estudos epidemiológicos mostraram forte associação entre tabagismo e prevalência e gravidade da periodontite (Bostrom et al. 1998). Considerando que a patogênese da periodontite em fumantes é pouco compreendida, existem dados sugerindo que os efeitos do fumo nos tecidos periodontais incluem defeitos na função dos neutrófilos, respostas de anticorpos séricos prejudicados a patógenos periodontais e função potencialmente diminuída dos fibroblastos gengivais (Shivanaikar et al. 2001). Os fumantes são considerados um grupo de alto risco para periodontite, e o histórico de tabagismo é um preditor clínico útil da atividade futura da doença (Hanokia et al. 2000).

Objetivos do estudo:

• Investigação dos efeitos do tabagismo na apoptose de fibroblastos em fumantes com periodontite em comparação com não fumantes com periodontite usando métodos imuno-histoquímicos.
• Comparação dos níveis de apoptose de fibroblastos gengivais entre periodontite crônica e agressiva.

Materiais e métodos:

Um total de 80 indivíduos serão convidados a participar neste estudo dos pacientes encaminhados ao Departamento de Periodontologia da Faculdade de Odontologia da Universidade de Damasco. O estudo será aprovado por um Conselho de Revisão específico. Os indivíduos serão recrutados de acordo com critérios de inclusão específicos após a conclusão de questionários de histórico médico e odontológico. Os pacientes assinarão um termo de consentimento após serem informados sobre a natureza do estudo.

A seleção dos pacientes será feita de acordo com os critérios aprovados pelo workshop mundial internacional de 1999 para um sistema de classificação de doenças e condições periodontais (Armitage 1999) usando cinco parâmetros clínicos e radiografias panorâmicas ou de boca inteira para diagnóstico.

Os sujeitos serão alocados em quatro grupos:

• Grupo Periodontite Crônica Fumante (ChP-S): compreende 20 pacientes fumantes com idade > 45 anos e presença de ≥2 sítios não adjacentes por quadrante que não sejam primeiros molares ou incisivos, com profundidade de sondagem (PD) ≥5 mm , que sangram à sondagem suave. A perda óssea radiográfica demonstrada ≥30% do comprimento da raiz, paciente com má higiene oral, a quantidade de placa acumulada compatível com a quantidade de nível de inserção clínica (CAL)
• Grupo de periodontite crônica não fumante (ChP-NS): compreende 20 pacientes pareados por idade e sexo, não fumantes e com periodontite crônica.
• Grupo de Periodontite Agressiva Fumante (AgP-S): compreende 20 pacientes fumantes com idade < 35 anos e diagnosticados com perda rápida de inserção com profundidade de bolsa periodontal (PD) > 4 mm ao redor de pelo menos três dentes além dos primeiros molares e incisivos. Destruição óssea rápida (> 50% de perda óssea nos locais afetados). Fraca relação entre a placa dental e a gravidade da inflamação gengival.
• Grupo de periodontite agressiva não fumante (AgP-NS): compreende 20 pacientes pareados por idade e sexo, não fumantes e com periodontite agressiva.

Medições clínicas:

Uma sonda periodontal padrão será usada para registrar os índices periodontais em seis locais por dente. Os parâmetros clínicos examinados incluem sangramento à sondagem (BOP), índice de placa (PI), perda de inserção clínica (CAL) e profundidade da bolsa periodontal (PPD) e índice gengival (GI).

Coleta e análise de biópsia

• As amostras de biópsia serão obtidas de pacientes durante o tratamento cirúrgico (curetagem de retalho aberto) onde a biópsia é feita a partir da área da base da papila.
• As amostras serão colocadas em formol a 10%.
• As amostras serão então instaladas em cera de parafina.
• As amostras serão analisadas por meio de anticorpo monoclonal anti-humano de camundongo p53.