Influencia del tabaquismo en la apoptosis en la periodontitis

Fondo:

Los mecanismos responsables del daño del tejido gingival son poco conocidos y pueden estar implicados tanto reacciones inmunomediadas como efectos citopáticos directos de las bacterias. Sobre la base del efecto directo de las bacterias en los cultivos celulares, se sugirió que la apoptosis podría desempeñar un papel importante en la periodontitis (Chen 1994).

La muerte celular programada (apoptosis) es un proceso fisiológico normal que contribuye a mantener la homeostasis tisular. El proceso de apoptosis puede ser modulado por varios estímulos hormonales, citocinas, factores de crecimiento, infecciones y respuestas inmunitarias (Renehan et al. 2001).

Entre otros factores, se ha demostrado que los productos de dos genes que codifican la proteína p53 y Bcl-2 desempeñan un papel regulador fundamental en la apoptosis. P53 es el producto proteico del gen supresor de tumores, y la expresión de P53 puede inducir la apoptosis. Esta proteína también está implicada en la regulación de la dinámica tisular y se cree específicamente que induce la apoptosis en células diferenciadas terminalmente, incluidas las células inflamatorias (Bulut et al. 2006).

El fibroblasto es un tipo de célula que sintetiza el colágeno extracelular y en el tejido conectivo. Desempeña un papel fundamental en la cicatrización de heridas. Los fibroblastos son las células más comunes en el tejido conectivo. La función principal de los fibroblastos es mantener la integridad estructural del tejido conectivo mediante la secreción continua de precursores de matriz extracelular. se informó que los niveles de apoptosis aumentaron en la gingivitis y la periodontitis (Jarenberg et al. 2002).

Fumar cigarrillos es un factor de riesgo para muchas enfermedades, y la evidencia reciente indica que fumar influye negativamente en la salud periodontal. Varios estudios epidemiológicos han demostrado una fuerte asociación entre el tabaquismo y la prevalencia y la gravedad de la periodontitis (Bostrom et al. 1998). Mientras que la patogenia de la periodontitis en fumadores es poco conocida, existen datos que sugieren que los efectos del tabaquismo en los tejidos periodontales incluyen defectos en la función de los neutrófilos, alteraciones en las respuestas de los anticuerpos séricos a los patógenos periodontales y una función potencialmente disminuida de los fibroblastos gingivales (Shivanaikar et al. 2001). Los fumadores se consideran un grupo de alto riesgo de periodontitis, y el historial de tabaquismo es un predictor clínico útil de la actividad futura de la enfermedad (Hanokia et al. 2000).

Objetivos del estudio:

• Investigación de los efectos del tabaquismo sobre la apoptosis de fibroblastos en fumadores con periodontitis en comparación con no fumadores con periodontitis utilizando métodos inmunohistoquímicos.
• Comparación de los niveles de apoptosis de fibroblastos gingivales entre periodontitis crónica y agresiva.

Materiales y métodos:

Se invitará a un total de 80 sujetos a participar en este estudio de los pacientes remitidos al Departamento de Periodoncia, Facultad de Odontología, Universidad de Damasco. El estudio será aprobado por una Junta de Revisión específica. Los sujetos serán reclutados de acuerdo con criterios de inclusión específicos después de completar los cuestionarios de historial médico y dental. Los pacientes firmarán un formulario de consentimiento después de ser informados sobre la naturaleza del estudio.

La selección de pacientes se realizará de acuerdo con los criterios aprobados por el taller mundial internacional de 1999 para un sistema de clasificación de enfermedades y afecciones periodontales (Armitage 1999) utilizando cinco parámetros clínicos y radiografías panorámicas o de boca completa para el diagnóstico.

Los sujetos se distribuirán en cuatro grupos:

• Grupo Periodontitis Crónica Tabaquera (ChP-S): compuesto por 20 pacientes fumadores y mayores de 45 años con presencia de ≥2 sitios no adyacentes por cuadrante que no fueran primeros molares o incisivos, con profundidad de sondaje (PD) ≥5 mm , que sangran al sondaje suave. La pérdida ósea radiográfica demostrada ≥30% de la longitud de la raíz, paciente con mala higiene bucal, la cantidad de placa acumulada acorde con la cantidad de nivel de inserción clínica (CAL)
• Grupo de periodontitis crónica no fumador (ChP-NS): comprende 20 pacientes emparejados por edad y sexo que no fuman y tienen periodontitis crónica.
• Grupo de Periodontitis Agresiva del Tabaquismo (AgP-S): compuesto por 20 pacientes fumadores y menores de 35 años diagnosticados con pérdida de inserción rápida con profundidad de bolsa periodontal (DP) > 4 mm alrededor de al menos tres dientes distintos de los primeros molares e incisivos. Destrucción ósea rápida (>50% de pérdida ósea en los sitios afectados). Débil relación entre la placa dental y la severidad de la inflamación gingival.
• Grupo de periodontitis agresiva no fumador (AgP-NS): comprende 20 pacientes emparejados por edad y sexo que no fuman y tienen periodontitis agresiva.

Mediciones clínicas:

Se utilizará una sonda periodontal estándar para registrar los índices periodontales en seis sitios por diente. Los parámetros clínicos examinados incluyen sangrado al sondaje (BOP), índice de placa (PI), pérdida de inserción clínica (CAL), profundidad de la bolsa periodontal (PPD) e índice gingival (GI).

Recolección y análisis de biopsias.

• Las muestras de biopsia se obtendrán de pacientes durante el tratamiento quirúrgico (legrado con colgajo abierto) donde se toma una biopsia del área de la base de la papila.
• Las muestras se colocarán en formalina al 10%.
• Luego, las muestras se instalarán en cera de parafina.
• Las muestras se analizarán en el por medio de anticuerpo anti-humano de ratón monoclonal p53.