Influenza del fumo sull'apoptosi nella parodontite

Sfondo:

I meccanismi responsabili del danno del tessuto gengivale sono poco conosciuti e potrebbero essere coinvolti sia reazioni immuno-mediate che effetti citopatici diretti dei batteri. Sulla base dell'effetto diretto dei batteri nelle colture cellulari, è stato suggerito che l'apoptosi potrebbe svolgere un ruolo importante nella parodontite (Chen 1994).

La morte cellulare programmata (apoptosi) è un normale processo fisiologico che contribuisce al mantenimento dell'omeostasi tissutale. Il processo di apoptosi può essere modulato da vari stimoli ormonali, citochine, fattori di crescita, infezioni e risposte immunitarie (Renehan et al. 2001).

Tra gli altri fattori, è stato dimostrato che i prodotti di due geni che codificano per la proteina p53 e Bcl-2 svolgono un ruolo regolatore fondamentale nell'apoptosi. P53 è il prodotto proteico del gene soppressore del tumore e l'espressione di P53 può indurre l'apoptosi. Questa proteina è anche implicata nella regolazione della dinamica tissutale e si ritiene specificamente che induca l'apoptosi nelle cellule differenziate terminali, comprese le cellule infiammatorie (Bulut et al.2006).

Il fibroblasto è un tipo di cellula che sintetizza l'extracellulare e il collagene nel tessuto connettivo. Svolge un ruolo fondamentale nella guarigione delle ferite. I fibroblasti sono le cellule più comuni nel tessuto connettivo. La funzione principale dei fibroblasti è quella di mantenere l'integrità strutturale del tessuto connettivo secernendo continuamente precursori della matrice extracellulare. è stato riportato che i livelli di apoptosi aumentavano nella gengivite e nella parodontite (Jarenberg et al. 2002).

Il fumo di sigaretta è un fattore di rischio per molte malattie e prove recenti indicano che il fumo influisce negativamente sulla salute parodontale. Numerosi studi epidemiologici hanno mostrato una forte associazione tra il fumo e la prevalenza e la gravità della parodontite (Bostrom et al. 1998). Considerando che la patogenesi della parodontite nei fumatori è poco conosciuta, ci sono dati che suggeriscono che gli effetti del fumo sui tessuti parodontali includono difetti nella funzione dei neutrofili, alterate risposte anticorpali sieriche ai patogeni parodontali e potenzialmente ridotta funzione dei fibroblasti gengivali (Shivanaikar et al. 2001). I fumatori sono considerati un gruppo ad alto rischio di parodontite e la storia del fumo è un utile predittore clinico della futura attività della malattia (Hanokia et al. 2000).

Obiettivi dello studio:

• Indagine sugli effetti del fumo sull'apoptosi dei fibroblasti nei fumatori con parodontite rispetto ai non fumatori con parodontite utilizzando metodi immunoistochimici.
• Confronto dei livelli di apoptosi dei fibroblasti gengivali tra parodontite cronica e aggressiva.

Materiali e metodi:

Un totale di 80 soggetti saranno invitati a partecipare a questo studio dai pazienti riferiti al Dipartimento di Parodontologia, Facoltà di Odontoiatria, Università di Damasco. Lo studio sarà approvato da uno specifico Review Board. I soggetti verranno reclutati in base a criteri di inclusione specifici dopo il completamento dei questionari di anamnesi medica e dentale. I pazienti firmeranno un modulo di consenso dopo essere stati informati sulla natura dello studio.

La selezione dei pazienti sarà effettuata secondo i criteri approvati dal workshop mondiale internazionale del 1999 per un sistema di classificazione delle malattie e condizioni parodontali (Armitage 1999) utilizzando cinque parametri clinici e radiografie della bocca piena o panoramiche per la diagnosi.

I soggetti saranno assegnati in quattro gruppi:

• Gruppo Smoking Chronic Parodontitis (ChP-S): comprende 20 pazienti che sono fumatori e di età > 45 anni e con presenza di ≥2 siti non adiacenti per quadrante che non erano primi molari o incisivi, con profondità di sondaggio (PD) ≥5 mm , che sanguinano al sondaggio delicato. La perdita ossea radiografica dimostrata ≥30% della lunghezza della radice, paziente con scarsa igiene orale, la quantità di placca accumulata commisurata alla quantità di livello di attacco clinico (CAL)
• Gruppo di parodontite cronica non fumatori (ChP-NS): comprende 20 pazienti abbinati per età e sesso che sono non fumatori e hanno la parodontite cronica.
• Gruppo con parodontite aggressiva da fumo (AgP-S): comprende 20 pazienti che sono fumatori e di età < 35 anni e con diagnosi di rapida perdita di attacco con profondità della tasca parodontale (PD) > 4 mm intorno ad almeno tre denti diversi dai primi molari e incisivi. Rapida distruzione ossea (>50% di perdita ossea nei siti malati). Relazione debole tra la placca dentale e la gravità dell'infiammazione gengivale.
• Gruppo di non fumatori con parodontite aggressiva (AgP-NS): comprende 20 pazienti abbinati per età e sesso che sono non fumatori e hanno una parodontite aggressiva.

Misure cliniche:

Verrà utilizzata una sonda parodontale standard per registrare gli indici parodontali in sei siti per dente. I parametri clinici esaminati includono sanguinamento al sondaggio (BOP), indice di placca (PI), perdita di attacco clinico (CAL) e profondità della tasca parodontale (PPD) e indice gengivale (GI).

Raccolta e analisi della biopsia

• I campioni bioptici saranno ottenuti da pazienti durante il trattamento chirurgico (curettage con lembo aperto) in cui la biopsia viene prelevata dall'area di base della papilla.
• I campioni saranno posti in formalina al 10%.
• I campioni verranno poi installati in cera di paraffina.
• I campioni saranno analizzati mediante l'anticorpo monoclonale murino anti-umano p53.