Einfluss des Rauchens auf die Apoptose bei Parodontitis

Hintergrund:

Die Mechanismen, die für die Schädigung des Zahnfleischgewebes verantwortlich sind, sind kaum verstanden, und möglicherweise sind sowohl immunvermittelte Reaktionen als auch direkte zytopathische Wirkungen von Bakterien beteiligt. Basierend auf der direkten Wirkung von Bakterien in Zellkulturen wurde vermutet, dass Apoptose eine wichtige Rolle bei Parodontitis spielen könnte (Chen 1994).

Der programmierte Zelltod (Apoptose) ist ein normaler physiologischer Prozess, der zur Aufrechterhaltung der Gewebehomöostase beiträgt. Der Prozess der Apoptose kann durch verschiedene Reizhormone, Zytokine, Wachstumsfaktoren, Infektionen und Immunreaktionen moduliert werden (Renehan et al. 2001).

Unter anderem wurde gezeigt, dass die Produkte zweier Gene, die für die Proteine ​​p53 und Bcl-2 kodieren, eine grundlegende regulatorische Rolle bei der Apoptose spielen. P53 ist das Proteinprodukt des Tumorsuppressorgens und die Expression von P53 kann Apoptose auslösen. Dieses Protein ist auch an der Regulierung der Gewebedynamik beteiligt und soll insbesondere Apoptose in terminal differenzierten Zellen, einschließlich Entzündungszellen, induzieren (Bulut et al.2006).

Fibroblast ist eine Art von Zelle, die extrazelluläres und Kollagen im Bindegewebe synthetisiert. Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Wundheilung. Fibroblasten sind die häufigsten Zellen im Bindegewebe. Die Hauptfunktion von Fibroblasten besteht darin, die strukturelle Integrität des Bindegewebes aufrechtzuerhalten, indem sie kontinuierlich Vorläufer der extrazellulären Matrix absondern. Es wurde berichtet, dass die Apoptosewerte bei Gingivitis und Parodontitis anstiegen (Jarenberg et al. 2002).

Zigarettenrauchen ist ein Risikofaktor für viele Krankheiten, und neuere Erkenntnisse deuten darauf hin, dass Rauchen die parodontale Gesundheit negativ beeinflusst. Eine Reihe epidemiologischer Studien hat einen starken Zusammenhang zwischen Rauchen und der Prävalenz und Schwere der Parodontitis gezeigt (Bostrom et al. 1998). Während die Pathogenese der Parodontitis bei Rauchern kaum verstanden ist, gibt es Daten, die darauf hindeuten, dass die Auswirkungen des Rauchens auf das parodontale Gewebe Defekte in der Neutrophilenfunktion, beeinträchtigte Serumantikörperreaktionen auf parodontale Krankheitserreger und möglicherweise eine verminderte gingivale Fibroblastenfunktion umfassen (Shivanaikar et al. 2001). Raucher gelten als Hochrisikogruppe für Parodontitis, und die Raucheranamnese ist ein nützlicher klinischer Prädiktor für die zukünftige Krankheitsaktivität (Hanokia et al. 2000).

Ziele der Studie:

• Untersuchung der Auswirkungen des Rauchens auf die Apoptose von Fibroblasten bei Rauchern mit Parodontitis im Vergleich zu Nichtrauchern mit Parodontitis mittels immunhistochemischer Methoden.
• Vergleich der Apoptosewerte gingivaler Fibroblasten zwischen chronischer und aggressiver Parodontitis.

Materialen und Methoden:

Von den an die Abteilung für Parodontologie der Fakultät für Zahnmedizin der Universität Damaskus überwiesenen Patienten werden insgesamt 80 Probanden zur Teilnahme an dieser Studie eingeladen. Die Studie wird von einem bestimmten Prüfungsausschuss genehmigt. Die Probanden werden nach Ausfüllen der Fragebögen zur Kranken- und Zahngeschichte nach bestimmten Einschlusskriterien rekrutiert. Die Patienten unterzeichnen eine Einverständniserklärung, nachdem sie über die Art der Studie informiert wurden.

Die Auswahl der Patienten erfolgt nach den Kriterien, die 1999 auf dem internationalen Weltworkshop für ein Klassifizierungssystem für parodontale Erkrankungen und Zustände (Armitage 1999) genehmigt wurden, unter Verwendung von fünf klinischen Parametern und Vollmund- oder Panorama-Röntgenaufnahmen zur Diagnose.

Die Probanden werden in vier Gruppen eingeteilt:

• Rauchergruppe mit chronischer Parodontitis (ChP-S): umfasst 20 Patienten, die Raucher sind und > 45 Jahre alt sind und pro Quadrant ≥2 nicht benachbarte Stellen aufweisen, bei denen es sich nicht um erste Molaren oder Schneidezähne handelt, mit einer Sondierungstiefe (PD) ≥5 mm , die bei sanfter Sondierung bluten. Der nachgewiesene röntgenologische Knochenverlust ≥30 % der Wurzellänge, Patient mit schlechter Mundhygiene, die Menge der angesammelten Plaque entspricht dem Ausmaß des klinischen Attachmentniveaus (CAL)
• Nichtrauchergruppe mit chronischer Parodontitis (ChP-NS): umfasst 20 Patienten gleichen Alters und Geschlechts, die Nichtraucher sind und an chronischer Parodontitis leiden.
• Gruppe rauchender aggressiver Parodontitis (AgP-S): umfasst 20 Patienten, die Raucher sind und < 35 Jahre alt sind und bei denen ein schneller Attachmentverlust mit einer parodontalen Taschentiefe (PD) > 4 mm um mindestens drei Zähne außer den ersten Molaren und Schneidezähnen diagnostiziert wurde. Schnelle Knochenzerstörung (>50 % Knochenverlust an erkrankten Stellen). Schwacher Zusammenhang zwischen Zahnbelag und der Schwere der Zahnfleischentzündung.
• Nichtrauchergruppe mit aggressiver Parodontitis (AgP-NS): umfasst 20 alters- und geschlechtsgleiche Patienten, die Nichtraucher sind und an aggressiver Parodontitis leiden.

Klinische Messungen:

Zur Aufzeichnung parodontaler Indizes an sechs Stellen pro Zahn wird eine Standard-Parodontalsonde verwendet. Zu den untersuchten klinischen Parametern gehören Blutung beim Sondieren (BOP), Plaque-Index (PI), klinischer Attachmentverlust (CAL) sowie parodontale Taschentiefe (PPD) und Gingiva-Index (GI).

Biopsiesammlung und -analyse

• Die Biopsieproben werden von Patienten während einer chirurgischen Behandlung (Kürettage mit offenem Lappen) entnommen, bei der eine Biopsie aus dem Basisbereich der Papille entnommen wird.
• Die Proben werden in 10 % Formalin gegeben.
• Anschließend werden die Proben in Paraffinwachs eingebaut.
• Die Proben werden mittels des monoklonalen Maus-Anti-Human-Antikörpers p53 analysiert.