Влияние курения на апоптоз при пародонтите

Фон:

Механизмы, ответственные за повреждение тканей десны, плохо изучены, и могут быть задействованы как иммуноопосредованные реакции, так и прямые цитопатические эффекты бактерий. Основываясь на прямом воздействии бактерий на клеточные культуры, было высказано предположение, что апоптоз может играть важную роль в пародонтите (Chen 1994).

Запрограммированная гибель клеток (апоптоз) является нормальным физиологическим процессом, способствующим поддержанию тканевого гомеостаза. Процесс апоптоза может модулироваться различными стимулирующими гормонами, цитокинами, факторами роста, инфекциями и иммунными реакциями (Renehan et al. 2001).

Среди других факторов было показано, что продукты двух генов, кодирующих белки p53 и Bcl-2, играют фундаментальную регуляторную роль в апоптозе. Р53 является белковым продуктом гена-супрессора опухоли, и экспрессия Р53 может индуцировать апоптоз. Этот белок также участвует в регуляции тканевой динамики и, в частности, считается, что он индуцирует апоптоз в терминально дифференцированных клетках, включая воспалительные клетки (Bulut et al.2006).

Фибробласты представляют собой тип клеток, синтезирующих внеклеточное вещество и коллаген в соединительной ткани. Он играет решающую роль в заживлении ран. Фибробласты являются наиболее распространенными клетками соединительной ткани. Основная функция фибробластов заключается в поддержании структурной целостности соединительной ткани путем непрерывной секреции предшественников внеклеточного матрикса. сообщалось, что уровни апоптоза повышаются при гингивите и пародонтите (Jarenberg et al., 2002).

Курение сигарет является фактором риска многих заболеваний, а последние данные свидетельствуют о том, что курение отрицательно влияет на здоровье пародонта. Ряд эпидемиологических исследований показал сильную связь между курением и распространенностью и тяжестью пародонтита (Bostrom et al., 1998). Принимая во внимание, что патогенез пародонтита у курильщиков плохо изучен, имеются данные, свидетельствующие о том, что воздействие курения на ткани пародонта включает дефекты функции нейтрофилов, нарушение реакции сывороточных антител на пародонтальные патогены и потенциальное снижение функции фибробластов десен (Shivanaikar et al., 2001). Курильщики считаются группой высокого риска пародонтита, а курение в анамнезе является полезным клиническим предиктором будущей активности заболевания (Hanokia et al., 2000).

Цели исследования:

• Изучение влияния курения на апоптоз фибробластов у курильщиков с пародонтитом по сравнению с некурящими с пародонтитом с помощью иммуногистохимических методов.
• Сравнение уровней апоптоза фибробластов десен при хроническом и агрессивном пародонтите.

Материалы и методы:

Всего для участия в этом исследовании будет приглашено 80 пациентов из числа пациентов, направленных на кафедру пародонтологии стоматологического факультета Дамасского университета. Исследование будет одобрено специальным наблюдательным советом. Субъекты будут набраны в соответствии с конкретными критериями включения после заполнения анкет по истории болезни и стоматологии. Пациенты подписывают форму согласия после того, как им сообщат о характере исследования.

Отбор пациентов будет производиться в соответствии с критериями, одобренными международным всемирным семинаром 1999 г. для системы классификации заболеваний и состояний пародонта (Armitage 1999), с использованием пяти клинических параметров и полноротовых или панорамных рентгенограмм для диагностики.

Субъекты будут разделены на четыре группы:

• Группа курящих пациентов с хроническим пародонтитом (ChP-S): включает 20 курящих пациентов в возрасте > 45 лет с наличием ≥2 несмежных участков в каждом квадранте, которые не были первыми молярами или резцами, с глубиной зондирования (PD) ≥5 мм. , которые кровоточат при осторожном зондировании. Продемонстрированная рентгенологически потеря костной ткани ≥30% длины корня, пациент с плохой гигиеной полости рта, количество скопившегося зубного налета, соизмеримое с уровнем клинического прикрепления (CAL)
• Группа некурящих с хроническим пародонтитом (ХП-НС): состоит из 20 сопоставимых по возрасту и полу пациентов, которые не курят и имеют хронический пародонтит.
• Группа курильщиков с агрессивным пародонтитом (AgP-S): включает 20 курильщиков в возрасте < 35 лет, у которых диагностирована быстрая потеря прикрепления с глубиной пародонтального кармана (PD) > 4 мм вокруг как минимум трех зубов, кроме первых моляров и резцов. Быстрое разрушение кости (> 50% потери кости в пораженных участках). Слабая связь между зубным налетом и тяжестью воспаления десен.
• Группа некурящих с агрессивным пародонтитом (AgP-NS): включает 20 некурящих пациентов, сопоставимых по возрасту и полу, с агрессивным пародонтитом.

Клинические измерения:

Стандартный пародонтальный зонд будет использоваться для записи пародонтальных индексов в шести местах на зуб. Изучаемые клинические параметры включают кровоточивость при зондировании (BOP), индекс налета (PI), потерю клинического прикрепления (CAL), глубину пародонтального кармана (PPD) и индекс десны (GI).

Сбор и анализ биопсии

• Образцы биопсии будут получены у пациентов во время хирургического лечения (кюретаж открытым лоскутом), при котором биопсия берется из области основания сосочка.
• Образцы будут помещены в 10% формалин.
• Затем образцы будут помещены в парафин.
• Образцы анализируют с помощью моноклонального мышиного антитела р53 против человеческого.