Tupakoinnin vaikutus periodontiitin apoptoosiin

Tausta:

Ienkudosvaurioista vastuussa olevia mekanismeja ymmärretään huonosti, ja asiaan saattaa liittyä sekä immuunivälitteisiä reaktioita että bakteerien suoria sytopaattisia vaikutuksia. Bakteerien suoran vaikutuksen perusteella soluviljelmissä on ehdotettu, että apoptoosilla voi olla tärkeä rooli parodontiittissa (Chen 1994).

Ohjelmoitu solukuolema (apoptoosi) on normaali fysiologinen prosessi, joka edistää kudosten homeostaasin ylläpitämistä. Apoptoosiprosessia voivat moduloida erilaiset ärsykehormonit, sytokiinit, kasvutekijät, infektiot ja immuunivasteet (Renehan et al. 2001).

Muiden tekijöiden ohella kahden proteiinia p53 ja Bcl-2 koodaavan geenin tuotteilla on osoitettu olevan perustavanlaatuinen säätelyrooli apoptoosissa. P53 on kasvainsuppressorigeenin proteiinituote, ja P53:n ilmentyminen voi indusoida apoptoosia. Tämä proteiini liittyy myös kudosdynamiikan säätelyyn, ja sen uskotaan erityisesti indusoivan apoptoosia terminaalisesti erilaistuneissa soluissa, mukaan lukien tulehdussolut (Bulut et al. 2006).

Fibroblasti on solutyyppi, joka syntetisoi solunulkoista ja kollageenia sidekudoksessa. Sillä on ratkaiseva rooli haavan paranemisessa. Fibroblastit ovat yleisimmät sidekudoksen solut. Fibroblastien päätehtävä on ylläpitää sidekudoksen rakenteellista eheyttä erittämällä jatkuvasti solunulkoisen matriisin esiasteita. raportoitiin, että apoptoositasot lisääntyivät ientulehduksessa ja parodontiittissa (Jarenberg et al. 2002).

Tupakointi on monien sairauksien riskitekijä, ja viimeaikaiset todisteet osoittavat, että tupakointi vaikuttaa haitallisesti parodontaaliin. Useat epidemiologiset tutkimukset ovat osoittaneet vahvan yhteyden tupakoinnin ja parodontiitin esiintyvyyden ja vaikeusasteen välillä (Bostrom et al. 1998). Vaikka periodontiitin patogeneesi tupakoitsijoilla on huonosti ymmärretty, on olemassa tietoja, jotka viittaavat siihen, että tupakoinnin vaikutuksia parodontaaliin kudoksiin ovat neutrofiilien toimintahäiriöt, seerumin vasta-ainevasteiden heikkeneminen periodontaalisille patogeeneille ja mahdollisesti heikentynyt ienfibroblastitoiminto (Shivanaikar et al. 2001). Tupakoitsijat pidetään parodontiittiriskin suurena ryhmänä, ja tupakointihistoria on hyödyllinen kliininen ennustaja tulevan sairauden aktiivisuudesta (Hanokia ym. 2000).

Tutkimuksen tavoitteet:

• Tupakoinnin vaikutusten tutkimus fibroblastien apoptoosiin tupakoitsijoilla, joilla on parodontiitti verrattuna tupakoimattomiin, joilla on parodontiitti immunohistokemiallisilla menetelmillä.
• Ienen fibroblastien apoptoositasojen vertailu kroonisen ja aggressiivisen parodontiitin välillä.

Materiaalit ja menetelmät:

Yhteensä 80 koehenkilöä kutsutaan osallistumaan tähän tutkimukseen Damaskoksen yliopiston hammaslääketieteellisen tiedekunnan parodontologian osastolle lähetetyistä potilaista. Tutkimuksen hyväksyy erityinen arviointilautakunta. Koehenkilöt rekrytoidaan erityisten mukaanottokriteerien mukaan lääketieteellisen ja hammaslääketieteellisen kyselylomakkeen täyttämisen jälkeen. Potilaat allekirjoittavat suostumuslomakkeen saatuaan tietoa tutkimuksen luonteesta.

Potilaiden valinta tehdään vuoden 1999 kansainvälisen parodontaalisairauksien ja -tilojen luokittelujärjestelmän (Armitage 1999) hyväksymien kriteerien mukaisesti käyttäen viittä kliinistä parametria ja koko suun tai panoraamaröntgenkuvaa diagnoosissa.

Aiheet jaetaan neljään ryhmään:

• Tupakoiva krooninen parodontiittiryhmä (ChP-S): koostuu 20 potilaasta, jotka tupakoivat ja ovat yli 45-vuotiaita ja joilla on vähintään 2 vierekkäistä kohtaa neljännestä kohden, jotka eivät olleet ensimmäiset poskihampaat tai etuhampaat, ja mittaussyvyys (PD) ≥5 mm , joka vuotaa verta kevyellä koetuksella. Todettu röntgenkuvaus ≥ 30 % juuren pituudesta, potilas, jolla on huono suuhygienia, kerääntyneen plakin määrä suhteessa kliinisen kiinnittymistason (CAL) määrään
• Tupakoimattomat Krooninen parodontiittiryhmä (ChP-NS): koostuu 20 ikä-sukupuolista vastaavaa potilasta, jotka ovat tupakoimattomia ja joilla on krooninen parodontiitti.
• Tupakoiva aggressiivinen periodontiittiryhmä (AgP-S): koostuu 20 potilaasta, jotka tupakoivat ja ovat alle 35-vuotiaita ja joilla on diagnosoitu nopea kiinnittymisen menetys parodontaalitaskun syvyydessä (PD) > 4 mm vähintään kolmen muun hampaan ympärillä kuin ensimmäiset poskihampaat ja etuhampaat. Nopea luun tuhoutuminen (> 50 % luukatoa sairaissa paikoissa). Heikko yhteys hammasplakin ja ientulehduksen vakavuuden välillä.
• Tupakoimaton Aggressiivinen parodontiittiryhmä (AgP-NS): koostuu 20 iän ja sukupuolen mukaisesta potilaasta, jotka ovat tupakoimattomia ja joilla on aggressiivinen parodontiitti.

Kliiniset mittaukset:

Normaalia parodontaalianturia käytetään hampaiden havaitsemiseen kuudessa kohdassa hammasta kohden. Tutkittuja kliinisiä parametreja ovat verenvuoto koetuksella (BOP), plakkiindeksi (PI), kliinisen kiinnittymisen menetys (CAL) ja parodontaalitaskun syvyys (PPD) ja ienindeksi (GI).

Biopsian kerääminen ja analysointi

• Biopsianäytteet otetaan potilailta kirurgisen hoidon aikana (avoläppäkyretti), jossa biopsia otetaan papillan tyvialueelta.
• Näytteet laitetaan 10 % formaliiniin.
• Näytteet asennetaan sitten parafiinivahaan.
• Näytteet analysoidaan p53-monoklonaalisen hiiren anti-ihmisvasta-aineen avulla.