柬埔寨间日疟原虫对氯喹的耐药性评估： (CRePViCam)

为了评估间日疟原虫对 CQ 的抗性表型，该方法将涉及以下步骤：

1. 将来自村庄的间日疟原虫单一感染患者纳入治疗失败报告地区（Rattanakiri Ban Lung 区）
2. Pv 诊断确认（显微镜和 qPCR）
3. 将患者转移到 Ban Lung 医院进行为期 7 天的临床随访
4. 采血后进行 CQ 管理
5. 寄生虫清除率和全血 CQ 浓度跟踪 7 天。
6. 寄生虫血症随访 2 个月，患者在整个研究期间都住在 Ban Lung，以确保不会发生再次感染（Ban Lung 是无传播区）。
7. 间日疟原虫分离株和任何复发/复发后的离体药物敏感性测定，如果有的话。
8. 第 0 天和任何复发/复发后的寄生虫基因分型分析（如果有）。

研究设计

该研究将于 2014 年 4 月至 2014 年 12 月在 Ban Lung 区（柬埔寨拉塔纳基尔省）进行。 该研究地点 (Rattanakiri) 是根据相对较高的 CQ 治疗失败报告选择的。 在 Ban Lung 地区的村庄，所有在社区一级（VMW 和健康中心）寻求治疗的间日疟原虫单一感染成年患者都将被邀请参加该研究

样本量计算基于确定对 CQ 的真实抗性表型的主要目标。因此，至少需要 50 名患者，理想情况下，大约 100 名患者将增加检测到耐药寄生虫的可能性。

研究人员将接触所有符合条件的参与者，并解释有关研究目标的信息。 在纳入之前，将获得每位参与者的知情同意。

在研究地点确定的所有 P. vivax 单一感染患者都将包括在内。

参与本研究的工作人员将由CNM和IPC的科学家和技术人员组成。 其他合作者（参考医院、卫生中心和 Rattanakiri 省的 VMW 工作人员）将参与该项目。

将选择发生间日疟传播的班隆区村庄。 从这些村庄（VMW 和健康中心）寻求治疗的患者将接受 RDT 和任何非 P 的疟疾感染检测。 恶性疟原虫感染患者将被邀请参加该研究。 恶性疟病例将由 VMW 和卫生中心照常根据柬埔寨国家指南进行管理

在获得知情同意后，患者将被纳入研究，并将构成两组：

1. 住在他们村庄的对照组患者和
2. 一组转移到邦隆医院。

然后，在给予患者 CQ 之前，将收集 3 x 5ml-ACD 静脉血管。

对于对照组，根据 WHO 方案，将在第 3 天、第 7 天、第 14 天、第 28 天和第 42 天、第 49 天、第 56 天和第 60 天使用指尖采血来追踪寄生虫血症。

对于研究组，患者将接受指尖刺破寄生虫清除和 CQ 浓度测量，每 8 小时测量一次，持续至少 3 天，直到完全清除寄生虫（由显微镜和 qPCR 中的两个连续阴性结果确定）。 寄生虫血症和 CQ 浓度将每天使用指尖刺破确定，持续 7 天。

为确保患者不会被再次感染，他们将在 Ban Lung 住所停留 2 个月，每 48 小时进行一次手指采血，以检测研究期间寄生虫血症是否增加，而对照组将留在他们的村庄，在那里可以再次感染发生。

如果观察到复发，则患者将再次入住万隆医院，并再次执行相同的方案。

间日疟原虫分离物的离体药物敏感性测定将直接从血液样本或冷冻保存后进行。 在这两种情况下，该测定都将涉及新添加的网织红细胞对间日疟原虫分离物的入侵。

根据 IPC 和 Calmette 医院之间的协议，用于这项工作的网织红细胞将从通过 Calmette 医院 (Pr Kruy Leang Sim) 的妇科/产科获得的脐带血中获得。 脐带血将定期提供给 IPC，每周 3 次，每个 ACD 管 5 至 7 毫升，每天 5 管，如果出生数量允许这样的取样。 ABO血型、血红蛋白电泳、G6PD酶活性和血液的Duffy状态在使用网织红细胞进行间日疟原虫侵袭培养前进行测定。

将使用 Microsoft Excel 输入和处理数据。 寄生虫血症将与血液中的 CQ 浓度直接相关，并允许根据寄生虫清除时间的斜率及其对 CQ 的敏感性对寄生虫进行分类。

当需要检测任何显着影响时，将进行统计分析。