胸腺球蛋白对人类 B 细胞的影响
胸腺球蛋白对人 B 细胞增殖、活化和分化的影响
进行这项研究是为了更好地了解免疫抑制药物（可能会或可能不会被食品和药物管理局 (FDA) 批准的抗排斥药物）如何影响同种免疫反应（一个人的免疫系统如何对抗另一个人的免疫系统） . 这将通过对患者捐献的血细胞进行的血液测试来确定。
具体来说，研究人员将单独和/或组合使用体外试验（在实验室、试管中）测试不同的免疫抑制药物，以测试它们如何影响 B 细胞增殖和分化，从而导致定义的 B 细胞分布发生改变- 细胞亚群，并研究 B 细胞暴露于胸腺球蛋白是否会对体外 B 细胞和 T 细胞之间的后续相互作用产生影响。
为了使研究人员能够了解免疫抑制药物如何影响移植患者的免疫系统，研究人员需要了解它们如何影响健康人的免疫系统。 为此，研究人员需要研究从健康志愿者身上采集的血液。
研究概览
详细说明
这是一项针对健康受试者的研究，他们将在一年的时间内为各种化验提供血液样本。
将从健康志愿者中分离外周血单核细胞 (PBMC)，并使用 CD19 磁珠选择 CD19+ B 细胞。
B 细胞培养将在培养基中进行，该培养基由补充有 10% 人血清（HNS-GemCell）、0.5 ml 人胰岛素（Sigma）、200mM L-谷氨酰胺（Gibco，Paisley，UK）、200mM L-谷氨酰胺（ Sigma) 和 0.5% 庆大霉素 (Gibco)。
总 CD19+B 细胞将在存在抗 IgM (3μg/ml)、抗 CD40 (100ng/ml)、IL-21 (100ng/ml)（BCR/CD40 刺激）的情况下培养 6 天第 0 天加入 96 孔圆底孔板（1.0x105 个细胞/孔）和不同浓度（10 至 100 μg/ml）的胸腺球蛋白，有或没有钙调神经磷酸酶抑制剂（他克莫司，TAC）和 mTOR 抑制剂（西罗莫司，SRL） .
B 细胞活性的各种参数，包括增殖、活化、分化和细胞因子产生，将通过流式细胞术监测。这些实验在下面的结果测量部分中进一步解释。
研究人员将对所有变量进行单变量和双变量分析。 研究人员将使用 t 检验或 F 检验评估连续变量，使用卡方检验或 Fisher 精确检验评估分类变量。 调查人员将检查数据分布并测试所有变量的线性关系或非线性关系。 将进行变量间的描述性统计（均值、标准差、频率）和相关性（Pearson 和 Spearman）以评估数据。 将根据原始数据分布进行必要的转换和插补。 所有数据分析将使用 SAS 9.3 统计软件（SAS Inc., Cary, NC）进行。 所有测试都是双侧的，α <0.05 的错误率将被视为具有统计学意义。
研究类型
联系人和位置
学习地点
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Illinois
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Chicago、Illinois、美国、60611
- Northwestern University Comprehensive Transplant Center
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参与标准
资格标准
适合学习的年龄
接受健康志愿者
有资格学习的性别
取样方法
研究人群
描述
纳入标准：
患者：
- 应年满 18 岁，
- 重量应超过 110 磅，并且
- 献血时不应怀孕。
排除标准：
(1) 不符合纳入标准
学习计划
研究是如何设计的？
设计细节
研究衡量的是什么？
主要结果指标
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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CD19+B细胞分裂
大体时间：12天
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3-6x106 个感兴趣的细胞将在刺激前用 1.5μM CFSE 标记。
6 天后，B 细胞将被回收、洗涤、计数并用于定义标记设置。
细胞表型将通过五色流式细胞术（FC500，Beckman-Coulter）和 13 色流式细胞术（Fortessa）进行分析，数据将使用 CXP 软件进行分析。
这些 B 细胞培养物的上清液将用于细胞因子检测，并通过 Luminex 确定产生 IgM 和 IgG 的细胞数量。在第 6 天，细胞将用佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸酯 (PMA) 重新刺激) 和 Ionomycin，并通过细胞内细胞因子染色进行分析。
总 CD19+ B 细胞将被分类为 CD27-（初始）和 CD27+（记忆）B 细胞部分，这些细胞的表型特征（通过流式细胞术评估）将在使用抗 IgM（5μg）培养 6 天后显示/ml)、抗 CD40 (100ng/ml) 和 IL-21 (100ng/ml) 在存在或不存在药物的情况下。
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12天
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次要结果测量
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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增殖的T细胞
大体时间：6天
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研究人员将 B 细胞（在存在和不存在胸腺球蛋白的情况下用 α-IgM 和 α-CD40 mAb 加 IL-21 预刺激 6 天）与同种异体 CD4+CD25-T 细胞（比例 2:1）共培养).
6 天后，研究人员将分析增殖的 T 细胞的百分比和细胞因子的产生。
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6天
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合作者和调查者
合作者
研究记录日期
研究主要日期
学习开始 (实际的)
初级完成 (实际的)
研究完成 (实际的)
研究注册日期
首次提交
首先提交符合 QC 标准的
首次发布 (估计)
研究记录更新
最后更新发布 (实际的)
上次提交的符合 QC 标准的更新
最后验证
更多信息
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