인간 B 세포에 대한 티모글로불린의 효과

이것은 1년 동안 다양한 분석을 위한 혈액 샘플을 제공할 건강한 피험자에 대한 연구입니다.

건강한 지원자로부터 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 분리하고 CD19 자기 마이크로 비드를 사용하여 CD19+ B 세포를 선택합니다.

B-세포 배양은 10% 인간 혈청(HNS-GemCell), 0.5 ml 인간 인슐린(Sigma), 200mM L-글루타민( Sigma) 및 0.5% 겐타마이신(Gibco).

총 CD19+B 세포는 배양 6일 동안 항-IgM(3μg/ml), 항-CD40(100ng/ml), IL-21(100ng/ml)(BCR/CD40-자극)의 존재하에 배양됩니다. 플레이트 96 웰 둥근 바닥(1.0x105개 세포/웰) 및 칼시뉴린 억제제(Tacrolimus, TAC) 및 mTOR 억제제(Sirolimus, SRL)를 포함하거나 포함하지 않는 상이한 농도(10 내지 100㎍/ml)의 티모글로불린을 0일에 첨가할 것이다. .

증식, 활성화, 분화 및 사이토카인 생산을 포함하는 B 세포 활동의 다양한 매개변수는 유동 세포측정법에 의해 모니터링됩니다. 이러한 실험은 아래 결과 측정 섹션에서 추가로 설명됩니다.

조사관은 모든 변수에 대해 단변량 및 이변량 분석을 수행합니다. 조사관은 t-테스트 또는 F-테스트를 ​​사용하여 연속 변수를 평가하고 카이 제곱 또는 Fisher Exact 테스트를 사용하여 범주형 변수를 평가합니다. 조사관은 데이터 분포를 검사하고 선형 관계 또는 비선형 관계에 대한 모든 변수를 테스트합니다. 데이터를 평가하기 위해 변수 간의 기술 통계(평균, 표준 편차, 빈도) 및 상관 관계(Pearson 및 Spearman 모두)를 수행합니다. 원시 데이터 배포를 기반으로 필요한 변환 및 전가가 수행됩니다. 모든 데이터 분석은 SAS 9.3 통계 소프트웨어(SAS Inc., Cary, NC)를 사용하여 수행됩니다. 모든 테스트는 양방향이며 α <0.05의 오류율은 통계적으로 유의한 것으로 간주됩니다.