厄瓜多尔糖尿病肾病的发病机制

1. 确定与厄瓜多尔糖尿病肾病有关的社会、环境和生物因素 调查人员将研究来自普通人群的受试者。 调查人员将联系社区和宗教领袖，以邀请普通人群中的成年受试者参与这项研究，将招募 10000 人。

   在向所有受试者传授有关预防糖尿病肾病的基本概念后，研究人员将收集人口统计数据、房屋条件和定位（农村、城市或城市周边）、同住一个家庭的人数、教育水平、就业和经济状况、个人健康保险、体检史、中毒习惯（酒精、香烟滥用成瘾物质）和体育锻炼习惯。 调查人员将收集糖尿病、糖尿病肾病、高血压、肾脏疾病、妊娠糖尿病、当前治疗和其他慢性疾病的个人和家庭前因。 调查人员将测量体重 (Kg)、身高 (m)，调查人员将计算体重指数。 调查人员还将测量血压、血糖、糖化血红蛋白、微量白蛋白尿和蛋白尿。 受过培训的人员将填写此人的调查表。 调查人员将从 2% 的样本中监督和收集数据。

2. 细胞外基质蛋白和生长因子信号在糖尿病肾病中的作用

   1. 全身和尿液研究：参与糖尿病肾病发病机制的蛋白质如血管内皮因子 A (VEGF) 和细胞外基质蛋白如生腱蛋白 C (tenascin) 浓度将通过市售试剂盒（分别）在血浆和尿液中测量。 样品将从患有糖尿病肾病 (n: 20) 和未患糖尿病肾病 (n: 20) 的糖尿病患者以及来自一般人群 (n: 2000) 的非糖尿病受试者（对照）中获得。 将按照目标 1 完成社会、环境和生物因素的确定。
   2. 肾脏组织研究：研究人员将确定参与糖尿病肾病的蛋白质、VEGF 信号和生腱蛋白在以下方面的作用：

I) 将研究从病理实验室样本库中获得的石蜡包埋肾组织。 将收集来自非糖尿病患者 (n: 10) 和患有糖尿病肾病的糖尿病患者 (n: 20) 和未患糖尿病肾病 (n: 10) 的载玻片。 参与糖尿病肾病的蛋白质作为 VEGF 信号和生腱蛋白的作用将通过免疫组织化学和邻近链接试验进行研究。

II) 将研究来自患有糖尿病肾病的糖尿病患者 (n: 12)、以原发性肾小球病为微小病变的非糖尿病对照 (n: 6) 和无糖尿病肾病的糖尿病对照 (n: 6) 的石蜡包埋肾载玻片。 研究人员将招募医生指示并计划进行肾活检的患者。 病理诊断完成后，部分残余石蜡包埋组织将用于本研究。 将通过免疫组织化学和邻近链接测定法研究参与糖尿病肾病、VEGF 信号传导和生腱蛋白的蛋白质的作用。 在肾活检之前收集尿液和血浆，以测量潜在有用的糖尿病肾病生物标志物的蛋白质浓度； VEGF 和生腱蛋白水平将被量化。 患者将被告知并需要签署同意书。

血糖将通过血糖仪和试纸进行测量。 将使用便携式机器 (Siemens) 对糖化血红蛋白 A1c 和微量白蛋白尿（尿液中的白蛋白/肌酐）进行量化。

在禁食条件下，研究人员将考虑正常血糖值 <99 mg%，糖尿病前期在 100 和 125 mg% 之间，糖尿病≥126 mg%。 在非空腹条件下，血糖值 >200mg% 将被视为糖尿病。 研究人员将认为正常糖化 A1c 血红蛋白值 <5.6%，糖尿病前期在 5.7% 和 6.4% 之间，糖尿病≥6.5%。

研究人员将认为白蛋白/肌酐比值 <29mg/g 的正常白蛋白尿值、30 至 299mg/g 之间的微量白蛋白尿值和≥300mg/g 的大量白蛋白尿值。 蛋白尿也将通过反应性尿液试纸进行评估。

在结果不一致或值超出范围的情况下，将在同一样本中重复分析或通过标准实验室设备和技术重新分析。

研究人员将糖尿病肾病视为与糖尿病视网膜病变和内源性肾小球滤过率降低相关的持续性蛋白尿（在没有诊断出其他肾脏或泌尿道疾病的受试者中）。 对于 1 型糖尿病患者，如果在出现蛋白尿之前糖尿病病史超过 10 年，则可诊断为糖尿病肾病；在 2 型糖尿病中，蛋白尿与诊断时肾小球​​滤过率降低有关，研究人员将认为是糖尿病肾病。

在所有石蜡包埋的肾脏样本中，我们将测量蛋白质表达和定位。 研究人员将使用市售的试剂盒、一抗和二抗来进行免疫组织化学和邻近链接测定。 研究人员将与病理学家合作进行这些实验。

所有从一般人群中招募的受试者都将通过一个独特的代码来识别。 数字和大写字母代码将放在调查和样本标签中作为 M0001（M：城市，数字 0001：人员编号 0001）。 数据将上传并保存在安全的数据库中。 受过培训的人员将负责处理数据库。 调查人员将监督数据输入。 调查员至少每 6 个月一次将随机选择 2% 的调查，并将其与上传到数据库中的信息进行匹配。 此外，调查人员将通过调整不完整数据的分析参数来分析和报告从调查中收集的所有数据，即使这些数据不完整。

调查人员将使用描述性统计工具来描述组（平均值、标准差和标准误差或中位数和四分位距）。 对于组比较，将使用非配对 T 检验、Mann Whitney 或 Fisher 检验。 将进行方差分析、Kruskal Wallis 和卡方检验以比较未匹配的组；为了量化两个变量之间的关联，将使用 Pearson 和 Spearman 相关性检验。 将考虑使用简单或多元回归来预测变量的值。 P值<0.05将被认为是显着的。 考虑到厄瓜多尔 21-70 岁的成年人口，计算了来自一般人口的样本。