Механизмы диабетической нефропатии в Эквадоре

1. Определение социальных, экологических и биологических факторов, причастных к диабетической нефропатии в Эквадоре. Исследователи будут изучать предметы из населения в целом. Исследователи свяжутся с общественными и религиозными лидерами, чтобы пригласить взрослых субъектов из населения в целом для участия в этом исследовании, и будет зачислено 10000 человек.

   После обучения основным понятиям профилактики диабетической нефропатии у всех испытуемых исследователи соберут демографические данные, условия проживания и локализацию (сельская, городская или пригородная), количество людей, проживающих в одном доме, уровень образования, занятость и экономическое положение, личные данные. медицинская страховка, история медицинского осмотра, токсические привычки (алкоголь, сигареты, злоупотребление наркотическими веществами) и привычки к физическим упражнениям. Исследователи соберут личный и семейный анамнез сахарного диабета, диабетической нефропатии, гипертонии, заболеваний почек, гестационного диабета, текущего лечения и других хронических заболеваний. Исследователи измерят массу тела (кг), рост (м), а исследователи вычислят индекс массы тела. Исследователи также измерят кровяное давление, уровень глюкозы в крови, гликозилированный гемоглобин, микроальбуминурию и протеинурию. Обученный персонал заполнит анкету человека. Следователи будут контролировать и собирать данные из 2% выборки.

2. Роль белков внеклеточного матрикса и сигнальных факторов роста при диабетической нефропатии

   1. Системные исследования и исследования мочи: белки, участвующие в патогенезе диабетической нефропатии, такие как сосудистый эндотелиальный фактор А (VEGF) и белок внеклеточного матрикса, такие как концентрация тенасцина С (тенасцин), будут измеряться коммерчески доступными наборами в плазме и моче (соответственно). Образцы будут получены от диабетиков с (n: 20) и без диабетической нефропатии (n: 20), а также от субъектов без диабета (контрольная группа) из общей популяции (n: 2000). Определение социальных, экологических и биологических факторов будет завершено, как и в цели 1.
   2. Исследования почечной ткани: исследователи определят роль белка, участвующего в диабетической нефропатии, передачи сигналов VEGF и тенасцина в:

I) Будет изучена ткань почки, залитая парафином, полученная из библиотек образцов патологоанатомических лабораторий. Будут собраны слайды от недиабетиков (n: 10) и диабетиков с диабетической нефропатией (n: 20) и без диабетической нефропатии (n: 10). Роль белков, вовлеченных в диабетическую нефропатию, таких как передача сигналов VEGF и тенасцин, будет изучаться с помощью иммуногистохимии и анализа проксимальных связей.

II) Будут изучены залитые парафином почечные препараты диабетиков с диабетической нефропатией (n: 12), контрольной группы без диабета (n: 6) с первичной гломерулопатией как болезнью с минимальными изменениями и контрольной группы диабетиков без диабетической нефропатии (n: 6). Исследователи будут набирать пациентов с биопсией почки, назначенной и запланированной их врачами. После завершения диагностики патологии часть остаточной ткани, залитой парафином, будет использоваться для этого исследования. Роль белков, участвующих в диабетической нефропатии, передаче сигналов VEGF и тенасцине, будет изучаться с помощью иммуногистохимии и анализа проксимальных связей. Моча и плазма будут собираться перед биопсией почки для измерения концентрации белка потенциально полезных биомаркеров диабетической нефропатии; Уровни VEGF и тенасцина будут определены количественно. Пациенты будут проинформированы, и потребуется подписанное согласие.

Уровень глюкозы в крови будет измеряться глюкометром и тест-полоской. Гликозилированный гемоглобин A1c и микроальбуминурию (альбумин/креатинин в разовой моче) будут количественно определять с помощью портативного аппарата (Siemens).

В условиях голодания исследователи считают нормальными значения глюкозы в крови <99 мг%, преддиабетом от 100 до 125 мг% и диабетом ≥126 мг%. При отсутствии голодания значения уровня глюкозы в крови >200 мг% будут считаться диабетом. Исследователи сочтут нормальными значения гликозилированного гемоглобина A1c <5,6%, преддиабет между 5,7 и 6,4% и диабет ≥6,5%.

Исследователи сочтут нормальными значения альбуминурии при соотношении альбумин/креатинин <29 мг/г, значениях микроальбуминурии от 30 до 299 мг/г и значениях макроальбуминурии ≥300 мг/г. Протеинурия также будет оцениваться с помощью реактивных полосок мочи.

В случае противоречивых результатов или значений, выходящих за пределы диапазона, анализ будет повторен в том же образце или повторно проанализирован с использованием стандартного лабораторного оборудования и методов.

Исследователи будут рассматривать диабетическую нефропатию как стойкую протеинурию, связанную с диабетической ретинопатией и сниженной эндогенной скоростью клубочковой фильтрации (у субъектов без диагноза других заболеваний почек или мочевыводящих путей). У диабетиков 1 типа диабетическая нефропатия будет диагностирована, если история диабета превышает 10 лет до начала протеинурии; при диабете 2 типа протеинурия, связанная со снижением скорости клубочковой фильтрации на момент постановки диагноза, исследователи расценивают как диабетическую нефропатию.

Во всех образцах почек, залитых парафином, мы будем измерять экспрессию и локализацию белка. Исследователи будут использовать наборы, первичные и вторичные антитела, имеющиеся в продаже, для проведения иммуногистохимии и анализа близости связей. Исследователи проведут эти эксперименты в сотрудничестве с патологоанатомом.

Все предметы, набранные из общей популяции, будут идентифицированы уникальным кодом. Цифры и коды заглавными буквами будут помещены в анкету и в образцы этикеток как M0001 (M: город, номер 0001: номер лица 0001). Данные будут загружены и сохранены в защищенной базе данных. Обученный персонал будет отвечать за работу с базой данных. За вводом данных следят следователи. Исследователь не реже одного раза в 6 месяцев случайным образом выбирает опрос 2% и сопоставляет его с информацией, загруженной в базу данных. Кроме того, следователи будут анализировать и сообщать обо всех собранных данных опросов, даже если они неполные, путем корректировки параметров анализа неполных.

Исследователи будут использовать инструменты описательной статистики для описания групп (среднее, стандартное отклонение и стандартная ошибка или медиана и межквартильный размах). Для групповых сравнений будут использоваться непарный Т-критерий, критерий Манна-Уитни или критерий Фишера. ANOVA, критерий Крускала-Уоллиса и критерия Хи-квадрат будут выполняться для сравнения несовпадающих групп; для количественной оценки связи между двумя переменными будет использоваться корреляционный тест Пирсона и Спирмена. Простая или множественная регрессия будет рассматриваться для прогнозирования значения переменных. Значение P <0,05 будет считаться значимым. Выборка из общей популяции была рассчитана с учетом взрослого населения Эквадора в возрасте от 21 до 70 лет.