Mechanismen der diabetischen Nephropathie in Ecuador

1. Bestimmung sozialer, umweltbedingter und biologischer Faktoren, die mit diabetischer Nephropathie in Ecuador in Verbindung stehen Die Ermittler werden Probanden aus der allgemeinen Bevölkerung untersuchen. Die Ermittler werden sich mit Gemeinde- und Religionsführern in Verbindung setzen, um erwachsene Probanden aus der allgemeinen Bevölkerung zur Teilnahme an dieser Studie einzuladen, und 10000 Personen werden aufgenommen.

   Nach der Vermittlung grundlegender Konzepte zur Prävention von diabetischer Nephropathie in allen Fächern sammeln die Ermittler demografische Daten, Wohnbedingungen und Lokalisierung (ländlich, städtisch oder in der Nähe der Städte), Anzahl der Menschen, die sich ein Haus teilen, Bildungsniveau, Beschäftigung und wirtschaftliche Situation, persönlich Krankenversicherung, medizinische Untersuchungsgeschichte, toxische Gewohnheiten (Alkohol, Zigarettenmissbrauch oder Suchtmittel) und körperliche Betätigungsgewohnheiten. Die Ermittler sammeln persönliche und familiäre Vorgeschichten von Diabetes mellitus, diabetischer Nephropathie, Bluthochdruck, Nierenerkrankungen, Schwangerschaftsdiabetes, aktuellen Behandlungen und anderen chronischen Erkrankungen. Die Ermittler messen das Körpergewicht (kg), die Größe (m) und die Ermittler berechnen den Body-Mass-Index. Die Ermittler werden auch Blutdruck, Blutzucker, glykosyliertes Hämoglobin, Mikroalbuminurie und Proteinurie messen. Geschultes Personal füllt die Personenbefragung aus. Die Ermittler überwachen und sammeln Daten von 2 % der Stichprobe.

2. Rolle von extrazellulären Matrixproteinen und Wachstumsfaktoren, die bei diabetischer Nephropathie signalisieren

   1. Systemische und Urinstudien: Proteine, die an der Pathogenese der diabetischen Nephropathie beteiligt sind, wie der vaskuläre endotheliale Faktor A (VEGF) und die Konzentration von extrazellulärem Matrixprotein, wie Tenascin C (Tenascin), werden mit handelsüblichen Kits in Plasma bzw. Urin gemessen. Proben werden von Diabetikern mit (n: 20) und ohne diabetischer Nephropathie (n: 20) und von Nicht-Diabetikern (Kontrollen) aus der Allgemeinbevölkerung (n: 2000) entnommen. Die Bestimmung des sozialen, ökologischen und biologischen Faktors wird wie in Ziel 1 durchgeführt.
   2. Nierengewebestudien: Die Forscher werden die Rolle des Proteins bestimmen, das an der diabetischen Nephropathie, der VEGF-Signalübertragung und Tenascin beteiligt ist bei:

I) In Paraffin eingebettetes Nierengewebe aus den Probenbibliotheken pathologischer Laboratorien wird untersucht. Objektträger von Nicht-Diabetikern (n: 10) und Diabetikern mit diabetischer Nephropathie (n: 20) und ohne diabetische Nephropathie (n: 10) werden gesammelt. Die Rolle von Proteinen, die an der diabetischen Nephropathie beteiligt sind, wie VEGF-Signalisierung und Tenascin, wird durch Immunhistochemie und Proximity Link Assay untersucht.

II) In Paraffin eingebettete Nierenpräparate von Diabetikern mit diabetischer Nephropathie (n: 12), nicht-diabetischen Kontrollpersonen (n: 6) mit primärer Glomerulopathie als Minimal Change Disease und diabetischen Kontrollpersonen ohne diabetische Nephropathie (n: 6) werden untersucht. Die Ermittler werden Patienten rekrutieren, bei denen eine Nierenbiopsie von ihren Ärzten angezeigt und geplant ist. Nach Abschluss der pathologischen Diagnose wird ein Teil des verbleibenden in Paraffin eingebetteten Gewebes für diese Studie verwendet. Die Rolle von Proteinen, die an diabetischer Nephropathie, VEGF-Signalgebung und Tenascin beteiligt sind, wird durch Immunhistochemie und Proximity Link Assay untersucht. Urin und Plasma werden vor der Nierenbiopsie gesammelt, um die Proteinkonzentration potenziell nützlicher Biomarker der diabetischen Nephropathie zu messen; VEGF- und Tenascinspiegel werden quantifiziert. Die Patienten werden informiert und eine unterschriebene Einwilligung ist erforderlich.

Der Blutzucker wird mit dem Blutzuckermessgerät und dem Teststreifen gemessen. Glykosyliertes Hämoglobin A1c und Mikroalbuminurie (Albumin/Kreatinin im Spot-Urin) werden mit dem tragbaren Gerät (Siemens) quantifiziert.

Unter nüchternen Bedingungen werden die Prüfärzte normale Blutzuckerwerte < 99 mg %, Prädiabetes zwischen 100 und 125 mg % und Diabetes ≥ 126 mg % berücksichtigen. Bei nicht nüchternen Bedingungen gelten Blutzuckerwerte >200 mg% als Diabetes. Die Ermittler gehen von normalen glykosylierten A1c-Hämoglobinwerten < 5,6 %, Prädiabetes zwischen 5,7 und 6,4 % und Diabetes ≥ 6,5 % aus.

Untersucher gehen von normalen Albuminurie-Werten mit einem Albumin/Kreatinin-Verhältnis von < 29 mg/g, Mikroalbuminurie-Werten zwischen 30 und 299 mg/g und Makroalbuminurie-Werten von ≥ 300 mg/g aus. Proteinurie wird auch durch reaktive Urinstreifen bewertet.

Bei widersprüchlichen Ergebnissen oder Werten außerhalb des zulässigen Bereichs wird die Analyse mit derselben Probe wiederholt oder mit Standard-Laborgeräten und -techniken erneut analysiert.

Die Ermittler werden eine diabetische Nephropathie als anhaltende Proteinurie betrachten, die mit einer diabetischen Retinopathie und einer verringerten endogenen glomerulären Filtrationsrate verbunden ist (bei Patienten ohne Diagnose anderer Nieren- oder Harnwegserkrankungen). Bei Typ-1-Diabetikern wird eine diabetische Nephropathie diagnostiziert, wenn die Diabetes-Vorgeschichte länger als 10 Jahre vor dem Einsetzen der Proteinurie zurückliegt; bei diabetischem Typ 2, Proteinurie verbunden mit einer verringerten glomerulären Filtrationsrate zum Zeitpunkt der Diagnose, werden die Ermittler von einer diabetischen Nephropathie ausgehen.

In allen in Paraffin eingebetteten Nierenproben werden wir die Proteinexpression und -lokalisierung messen. Die Ermittler werden im Handel erhältliche Kits, primäre und sekundäre Antikörper verwenden, um Immunhistochemie und Proximity-Link-Assays durchzuführen. Die Ermittler werden diese Experimente in Zusammenarbeit mit Pathologen durchführen.

Alle aus der Allgemeinbevölkerung rekrutierten Probanden werden durch einen eindeutigen Code identifiziert. Zahlen- und Großbuchstabencode werden in der Umfrage und in den Musteretiketten als M0001 (M: Stadt, Nummer 0001: Personennummer 0001) platziert. Die Daten werden hochgeladen und in einer sicheren Datenbank gespeichert. Der Umgang mit der Datenbank wird von geschultem Personal übernommen. Die Ermittler überwachen die Dateneingabe. Mindestens einmal alle 6 Monate wählt ein Ermittler nach dem Zufallsprinzip eine 2 %-Umfrage aus und gleicht sie mit den in die Datenbank hochgeladenen Informationen ab. Darüber hinaus werden die Ermittler alle gesammelten Daten aus den Umfragen analysieren und melden, auch wenn sie unvollständig sind, indem sie die Analyseparameter der unvollständigen anpassen.

Die Ermittler werden deskriptive statistische Werkzeuge verwenden, um Gruppen zu beschreiben (Mittelwert, Standardabweichung und Standardfehler oder Median und Interquartilbereich). Für Gruppenvergleiche werden der ungepaarte T-Test, der Mann-Whitney- oder der Fisher-Test verwendet. ANOVA-, Kruskal-Wallis- und Chi-Quadrat-Test werden durchgeführt, um nicht übereinstimmende Gruppen zu vergleichen; Um den Zusammenhang zwischen zwei Variablen zu quantifizieren, wird der Korrelationstest nach Pearson und Spearman verwendet. Einfache oder multiple Regressionen werden berücksichtigt, um den Wert von Variablen vorherzusagen. P-Wert < 0,05 wird als signifikant erachtet. Eine Stichprobe aus der Allgemeinbevölkerung wurde unter Berücksichtigung der erwachsenen Bevölkerung zwischen 21 und 70 Jahren in Ecuador berechnet.