A diabéteszes nephropathia mechanizmusai Ecuadorban

1. A diabéteszes nefropátiában szerepet játszó társadalmi, környezeti és biológiai tényezők meghatározása Ecuadorban. A nyomozók kapcsolatba lépnek a közösségi és vallási vezetőkkel annak érdekében, hogy a teljes lakosságból felnőtt alanyokat hívjanak meg a tanulmányban való részvételre, és 10 000 személyt vesznek fel.

   A diabéteszes nefropátia megelőzésével kapcsolatos alapfogalmak megtanítása után a kutatók összegyűjtik a demográfiai adatokat, a lakásviszonyokat és a lokalizációt (vidéken, városon vagy városok környékén), a közös otthonban élők számát, iskolai végzettséget, foglalkoztatást és gazdasági helyzetet, személyes adatokat. egészségbiztosítás, orvosi kivizsgálási előzmények, mérgező szokások (alkohol, dohányzás, függőséget okozó szerekkel való visszaélés) és fizikai gyakorlatok. A kutatók összegyűjtik a diabetes mellitus, a diabéteszes nephropathia, a magas vérnyomás, a vesebetegségek, a terhességi cukorbetegség, a jelenlegi kezelések és más krónikus betegségek személyes és családi előzményeit. A nyomozók megmérik a testsúlyt (kg), a magasságot (m), a vizsgálók pedig kiszámítják a testtömegindexet. A nyomozók vérnyomást, vércukorszintet, glikozilált hemoglobint, mikroalbuminuriát és proteinuriát is mérnek. Képzett személyzet tölti ki a személy kérdőívét. A nyomozók a minta 2%-át fogják felügyelni és adatokat gyűjteni.

2. Az extracelluláris mátrix fehérjék és a növekedési faktorok jelátviteli szerepe a diabéteszes nephropathiában

   1. Szisztémás és vizeletvizsgálatok: a diabéteszes nephropathia patogenezisében részt vevő fehérjék vaszkuláris endoteliális faktor A (VEGF) és az extracelluláris mátrix fehérje mint tenascin C (tenascin) koncentrációját kereskedelmi forgalomban kapható kittel mérik plazmában és vizeletben (illetve). A mintákat diabéteszes nephropathiában szenvedő (n: 20) és diabéteszes nephropathiában (n: 20) nem szenvedő betegektől, valamint az általános populációból (n: 2000) nem cukorbetegektől (kontroll) veszik. A társadalmi, környezeti és biológiai tényezők meghatározása az 1. cél szerint történik.
   2. Veseszöveti vizsgálatok: a kutatók meghatározzák a diabéteszes nephropathiában, a VEGF-jelátvitelben és a tenascinban részt vevő fehérje szerepét:

I) A patológiai laboratóriumok mintakönyvtáraiból nyert paraffinba ágyazott veseszövet vizsgálata történik. A nem cukorbetegek (n: 10) és a diabéteszes nephropathiában szenvedő (n: 20) és a diabéteszes nephropathiában nem szenvedő betegek (n: 10) diákjait gyűjtjük. A diabéteszes nephropathiában szerepet játszó fehérjék VEGF jelátvitelben és tenascin szerepét immunhisztokémiai és proximity link assay segítségével vizsgáljuk.

II) A diabéteszes nephropathiában szenvedő cukorbetegek (n: 12), a nem diabéteszes kontroll (n: 6) primer glomerulopathiával, mint minimális változási betegséggel, valamint a diabéteszes nephropathiában nem szenvedő diabéteszes kontrollok (n: 6) paraffinba ágyazott veselemezeit vizsgálják. A nyomozók olyan betegeket vesznek fel, akiknek vesebiopsziája van, amelyet orvosaik jeleztek és terveztek. A patológia diagnózisának befejezése után a maradék paraffinba ágyazott szövet egy részét felhasználják ehhez a vizsgálathoz. A diabéteszes nephropathiában, a VEGF jelátvitelben és a tenascinban részt vevő fehérjék szerepét immunhisztokémiai és proximity link assay segítségével vizsgáljuk. A vesebiopszia előtt vizeletet és plazmát kell gyűjteni a diabetikus nefropátia potenciálisan hasznos biomarkereinek fehérjekoncentrációjának mérése érdekében; A VEGF és a tenascin szintjét számszerűsíteni fogják. A betegeket tájékoztatják, és aláírt beleegyezésre lesz szükség.

A vércukorszintet a vércukormérő és a tesztcsík méri. A glikozilált hemoglobin A1c és a mikroalbuminuria (albumin/kreatinin a vizeletben) mennyiségi meghatározása a hordozható készülék (Siemens) segítségével történik.

Éhgyomri körülmények között a vizsgálók a normál vércukorszintet <99 mg%, a prediabétesz 100 és 125 mg% közötti értéket és a cukorbetegséget ≥126 mg% között tartják. Nem éhgyomri állapotban a 200 mg-nál nagyobb vércukorszint cukorbetegségnek minősül. A kutatók a normál glikozilált A1c hemoglobin értékeket <5,6%, a prediabétesz 5,7 és 6,4% közötti, a cukorbetegséget pedig ≥6,5% közöttinek ítélik.

A kutatók az albumin/kreatinin arány normál albuminuria értékét <29 mg/g, a mikroalbuminuria értékeket 30 és 299 mg/g között, a makroalbuminuria értékeket pedig ≥300 mg/g-nak tekintik. A proteinuriát reaktív vizeletcsíkokkal is értékelik.

Ellentmondó eredmények vagy tartományon kívüli értékek esetén az analízist meg kell ismételni ugyanabban a mintában, vagy újra kell elemezni szabványos laboratóriumi berendezésekkel és technikákkal.

A kutatók a diabéteszes nephropathiát a diabéteszes retinopátiával és a csökkent endogén glomeruláris filtrációs rátával összefüggő tartós proteinuriának tekintik (azoknál az alanyoknál, akiknél nem diagnosztizáltak más vese- vagy húgyúti betegséget). Az 1-es típusú cukorbetegeknél a diabéteszes nephropathiát akkor diagnosztizálják, ha a cukorbetegség anamnézisében a proteinuria megjelenése előtt több mint 10 év áll fenn; A 2-es típusú diabéteszes, a diagnózis idején csökkent glomeruláris filtrációs rátával összefüggő proteinuria esetén a vizsgálók diabéteszes nephropathiának tekintik.

Minden paraffinba ágyazott vesemintában megmérjük a fehérje expresszióját és lokalizációját. A kutatók a kereskedelemben beszerezhető kiteket, primer és másodlagos antitesteket használnak az immunhisztokémiai és közeli kapcsolati vizsgálat elvégzésére. A kutatók ezeket a kísérleteket patológussal együttműködve végzik el.

Az általános populációból felvett összes alanyt egyedi kód azonosítja. A szám- és nagybetűs kód a felmérésben és a mintacímkéken M0001-ként kerül elhelyezésre (M: város, 0001 szám: 0001 személyszám). Az adatok feltöltése és mentése egy biztonságos adatbázisba történik. Az adatbázis kezeléséért képzett személyzet lesz felelős. A nyomozók felügyelik az adatbevitelt. A vizsgáló legalább 6 havonta egyszer véletlenszerűen kiválasztja a 2%-os felmérést, és összeveti az adatbázisba feltöltött információkkal. Ezen túlmenően a vizsgálók a felmérésekből összegyűjtött összes adatot elemeznek és jelentést készítenek, még akkor is, ha azok hiányosak a hiányosak elemzési paramétereinek módosításával.

A vizsgálók leíró statisztikai eszközöket használnak a csoportok leírására (átlag, szórás és standard hiba vagy medián és interkvartilis tartomány). A csoportos összehasonlításhoz nem párosított T-tesztet, Mann Whitney-t vagy Fisher-tesztet használunk. ANOVA, Kruskal Wallis és Chi Square tesztet végeznek a páratlan csoportok összehasonlítására; a két változó közötti összefüggés számszerűsítésére Pearson és Spearman korrelációs tesztet használunk. Egyszerű vagy többszörös regressziót kell figyelembe venni a változók értékének előrejelzéséhez. A P érték <0,05 szignifikánsnak minősül. Az általános népességből vett mintát az ecuadori 21-70 év közötti felnőtt lakosság figyelembevételével számították ki.