エクアドルにおける糖尿病性腎症のメカニズム

1. エクアドルの糖尿病性腎症に関与する社会的、環境的、および生物学的要因の決定 調査員は、一般集団からの被験者を調査します。 研究者は、この研究に参加する一般集団からの成人被験者を招待するために、コミュニティおよび宗教指導者に連絡し、10000 人が登録されます。

   すべての科目で糖尿病性腎症の予防に関する基本的な概念を教えた後、研究者は人口統計データ、家の状態と地域 (農村、都市、または都市周辺)、家を共有する人の数、教育レベル、雇用と経済状態、個人情報を収集します。健康保険、健康診断歴、毒物（アルコール、中毒物質のたばこの乱用）、運動習慣など。 調査員は、糖尿病、糖尿病性腎症、高血圧、腎臓病、妊娠糖尿病、現在の治療およびその他の慢性疾患の個人および家族の前例を収集します。 研究者は体重 (Kg)、身長 (m) を測定し、研究者は体格指数を計算します。 治験責任医師は、血圧、血糖、グリコシル化ヘモグロビン、微量アルブミン尿、タンパク尿も測定します。 訓練を受けた担当者がその人の調査に記入します。 調査官は、サンプルの 2% からデータを監視および収集します。

2. 糖尿病性腎症における細胞外マトリックスタンパク質と成長因子シグナル伝達の役割

   1. 全身および尿研究：血管内皮因子A（VEGF）として糖尿病性腎症の病因に関与するタンパク質およびテネイシンC（テネイシン）濃度としての細胞外マトリックスタンパク質は、血漿および尿（それぞれ）で市販のキットによって測定されます。 試料は、糖尿病性腎症を有する（ｎ：２０）および糖尿病性腎症を有さない（ｎ：２０）糖尿病患者から、および一般集団（ｎ：２０００）からの非糖尿病対象（対照）から得られる。 社会的、環境的、生物学的要因の決定は、目標1と同様に完了します。
   2. 腎組織研究: 研究者は、糖尿病性腎症、VEGF シグナル伝達、およびテネイシンに関与するタンパク質の役割を決定します。

I) 病理検査室のサンプルライブラリーから得られたパラフィン包埋腎組織が研究されます。 非糖尿病患者（ｎ：１０）および糖尿病性腎症を有する糖尿病患者（ｎ：２０）および糖尿病性腎症を有さない糖尿病患者（ｎ：１０）からのスライドを収集する。 VEGFシグナル伝達およびテネイシンとしての糖尿病性腎症に関与するタンパク質の役割は、免疫組織化学および近接リンクアッセイによって研究されます。

II) 糖尿病性腎症を有する糖尿病患者(n: 12)、原発性糸球体症を微小変化疾患として有する非糖尿病対照(n: 6)、および糖尿病性腎症を伴わない糖尿病対照(n: 6)からのパラフィン包埋腎臓スライドを研究する。 治験責任医師は、医師によって腎生検が指示され、実施が予定されている患者を募集します。 病理診断の完了後、残りのパラフィン包埋組織の一部がこの研究に使用されます。 糖尿病性腎症、VEGFシグナル伝達およびテネイシンに関与するタンパク質の役割は、免疫組織化学および近接リンクアッセイによって研究されます。 尿と血漿は、糖尿病性腎症の潜在的に有用なバイオマーカーのタンパク質濃度を測定するために、腎生検の前に収集されます。 VEGF とテネイシンのレベルが定量化されます。 患者には通知が行われ、署名された同意が必要になります。

血糖値は血糖測定器と試験紙で測定します。 グリコシル化ヘモグロビン A1c および微量アルブミン尿 (スポット尿中のアルブミン/クレアチニン) は、ポータブル マシン (Siemens) を使用して定量化されます。

絶食状態では、研究者は正常な血糖値が 99 mg% 未満、前糖尿病が 100 ～ 125 mg%、糖尿病が 126 mg% 以上であると見なします。 非絶食状態では、血糖値が 200mg% を超えると糖尿病と見なされます。 研究者は、正常なグリコシル化 A1c ヘモグロビン値が 5.6% 未満、前糖尿病が 5.7 ～ 6.4%、糖尿病が 6.5% 以上であると見なします。

研究者は、アルブミン/クレアチニン比の正常なアルブミン尿値が 29mg/g 未満、微量アルブミン尿値が 30 ～ 299 mg/g、マクロアルブミン尿値が 300mg/g 以上であると見なします。 タンパク尿も反応性尿ストリップによって評価されます。

一貫性のない結果または範囲外の値の場合、分析は同じサンプルで繰り返されるか、標準的な実験装置および技術によって再分析されます。

研究者は、糖尿病性腎症を、糖尿病性網膜症および内因性糸球体濾過率の低下に関連する持続性タンパク尿症と見なします（他の腎臓または尿路疾患の診断を受けていない被験者）。 1型糖尿病患者では、糖尿病の病歴がタンパク尿の発症前に10年以上ある場合、糖尿病性腎症と診断されます。 2 型糖尿病では、診断時の糸球体濾過率の低下に関連するタンパク尿が見られた場合、研究者は糖尿病性腎症と見なします。

すべてのパラフィン包埋腎臓サンプルで、タンパク質の発現と局在を測定します。 研究者は、キット、市販の一次および二次抗体を使用して、免疫組織化学および近接リンクアッセイを実行します。 研究者は、病理学者と協力してこれらの実験を行います。

一般集団から募集されたすべての被験者は、固有のコードによって識別されます。 数字と大文字のコードは、M0001 (M: 都市、数字 0001: 個人番号 0001) として、調査とサンプル ラベルに配置されます。 データはアップロードされ、安全なデータベースに保存されます。 訓練を受けた担当者がデータベースの取り扱いを担当します。 捜査官はデータ入力を監督します。 調査員は少なくとも 6 か月に 1 回、2% の調査を無作為に選択し、データベースにアップロードされた情報と照合します。 さらに、研究者は、不完全なものの分析パラメーターを調整することにより、不完全なものであっても、調査から収集されたすべてのデータを分析して報告します。

研究者は、記述統計ツールを使用してグループを説明します (平均、標準偏差と標準誤差、または中央値と四分位範囲)。 グループ比較には、対応のない T 検定、マン ホイットニーまたはフィッシャーの検定が使用されます。 一致しないグループを比較するために、ANOVA、Kruskal Wallis およびカイ 2 乗検定が実行されます。 2 つの変数間の関連性を定量化するために、ピアソンとスピアマンの相関検定が使用されます。 変数から値を予測するために、単純または重回帰が考慮されます。 P 値 <0.05 は有意と見なされます。 エクアドルの 21 ～ 70 歳の成人人口を考慮して、一般人口からのサンプルが計算されました。