Diabeettisen nefropatian mekanismit Ecuadorissa

1. Diabeettiseen nefropatiaan liittyvien sosiaalisten, ympäristöllisten ja biologisten tekijöiden määritykset Ecuadorissa Tutkijat tutkivat koehenkilöitä yleisestä väestöstä. Tutkijat ottavat yhteyttä yhteisön ja uskonnollisiin johtajiin kutsuakseen aikuisia koehenkilöitä väestöstä osallistumaan tähän tutkimukseen, ja 10 000 henkilöä otetaan mukaan.

   Opetettuaan peruskäsitteet diabeettisen nefropatian ehkäisystä kaikissa aiheissa, tutkijat keräävät demografisia tietoja, talon olosuhteita ja sijaintia (maaseudulla, kaupungeissa tai kaupunkien ympärillä), jakavan kodin ihmisten lukumäärän, koulutustason, työllisyyden ja taloudellisen tilanteen, henkilökohtaisen sairausvakuutus, lääkärintarkastushistoria, myrkylliset tavat (alkoholi, riippuvuutta aiheuttavien aineiden tupakointi) ja fyysiset harjoitukset. Tutkijat keräävät henkilökohtaisia ​​ja perheitä diabeteksen, diabeettisen nefropatian, verenpainetaudin, munuaisten sairauksien, raskausdiabeteksen, nykyisten hoitojen ja muiden kroonisten sairauksien henkilökohtaisia ​​ja perheitä. Tutkijat mittaavat ruumiinpainon (kg), pituuden (m) ja tutkijat laskevat painoindeksin. Tutkijat mittaavat myös verenpainetta, verensokeria, glykosyloitua hemoglobiinia, mikroalbuminuriaa ja proteinuriaa. Koulutettu henkilökunta täyttää henkilön kyselyn. Tutkijat valvovat ja keräävät tietoja 2 prosentista otoksesta.

2. Solunulkoisten matriisiproteiinien ja kasvutekijöiden signaalin rooli diabeettisessa nefropatiassa

   1. Systeemiset ja virtsatutkimukset: proteiinit, jotka osallistuvat diabeettisen nefropatian patogeneesiin verisuonten endoteelitekijä A:na (VEGF) ja solunulkoinen matriisiproteiini tenassiini C:nä (tenassiinina), mitataan kaupallisesti saatavilla sarjoilla plasmasta ja virtsasta (vastaavasti). Näytteet otetaan diabeetikoista, joilla on (n: 20) ja joilla ei ole diabeettista nefropatiaa (n: 20), ja ei-diabeettisilta koehenkilöiltä (kontrollit) yleisestä populaatiosta (n: 2000). Sosiaalisen, ympäristöllisen ja biologisen tekijän määritykset valmistuvat tavoitteen 1 mukaisesti.
   2. Munuaiskudostutkimukset: tutkijat määrittävät diabeettiseen nefropatiaan, VEGF-signalointiin ja tenassiiniin osallistuvan proteiinin roolin:

I) Tutkitaan patologian laboratorioiden näytekirjastoista saatua parafiiniin upotettua munuaiskudosta. Diabeettisiltä (n: 10) ja diabeetikoilta, joilla on diabeettinen nefropatia (n: 20) ja ilman diabeettista nefropatiaa (n: 10), diat kerätään. Diabeettiseen nefropatiaan osallistuvien proteiinien roolia VEGF-signalointina ja tenassiinina tutkitaan immunohistokemian ja lähilinkkianalyysin avulla.

II) Tutkitaan parafiiniin upotettuja munuaislevyjä diabeetikoista, joilla on diabeettinen nefropatia (n: 12), ei-diabeettista kontrollia (n: 6), jossa primaarinen glomerulopatia on minimaalisen muutossairaus, ja diabeettisia kontrolleja, joilla ei ole diabeettista nefropatiaa (n: 6). Tutkijat rekrytoivat potilaita, joilla on munuaisbiopsia, jonka lääkärit ovat osoittaneet ja jotka heidän on määrä suorittaa. Patologian diagnoosin valmistumisen jälkeen osa jäännösparafiiniin upotetusta kudoksesta käytetään tähän tutkimukseen. Diabeettiseen nefropatiaan, VEGF-signalointiin ja tenassiiniin osallistuvien proteiinien roolia tutkitaan immunohistokemialla ja lähilinkkimäärityksellä. Virtsa ja plasma kerätään ennen munuaisbiopsiaa diabeettisen nefropatian mahdollisesti hyödyllisten biomarkkerien proteiinipitoisuuden mittaamiseksi; VEGF- ja tenassiinitasot kvantifioidaan. Potilaille tiedotetaan ja vaaditaan allekirjoitettu suostumus.

Verensokeri mitataan verensokerimittarilla ja testiliuskalla. Glykosyloitunut hemoglobiini A1c ja mikroalbuminuria (albumiini/kreatiniini pistevirtsassa) määritetään kannettavalla koneella (Siemens).

Paasto-olosuhteissa tutkijat harkitsevat normaaleja verensokeriarvoja < 99 mg, esidiabeteksen 100-125 mg% ja diabeteksen ≥126 mg%. Ei-paastotiloissa yli 200 mg:n verensokeriarvoja pidetään diabeteksena. Tutkijat arvioivat normaaleiksi glykosyloidun A1c-hemoglobiinin arvoiksi < 5,6 %, esidiabetekseksi 5,7–6,4 % ja diabetekseksi ≥ 6,5 %.

Tutkijat pitävät normaaleja albuminuria-arvoja albumiini/kreatiniinisuhteessa <29 mg/g, mikroalbuminuria-arvot välillä 30-299 mg/g ja makroalbuminuria-arvot ≥300 mg/g. Proteinuriaa arvioidaan myös reaktiivisilla virtsaliuskoilla.

Jos tulokset ovat epäjohdonmukaisia ​​tai vaihteluvälin ulkopuolella, analyysi toistetaan samassa näytteessä tai analysoidaan uudelleen tavanomaisilla laboratoriolaitteistoilla ja -tekniikoilla.

Tutkijat pitävät diabeettista nefropatiaa jatkuvana proteinuriana, joka liittyy diabeettiseen retinopatiaan ja endogeenisen glomerulussuodatusnopeuden laskuun (henkilöillä, joilla ei ole diagnosoitu muita munuais- tai virtsatiesairauksia). Tyypin 1 diabeetikoilla diabeettinen nefropatia diagnosoidaan, jos diabetesta on yli 10 vuotta ennen proteinurian puhkeamista; tyypin 2 diabeetikoissa, proteinuriassa, joka liittyy glomerulusten suodatusnopeuteen diagnoosin aikaan, tutkijat pitävät diabeettista nefropatiaa.

Kaikissa parafiiniin upotetuissa munuaisnäytteissä mittaamme proteiinin ilmentymisen ja lokalisoinnin. Tutkijat käyttävät sarjoja, kaupallisesti saatavia primäärisiä ja sekundaarisia vasta-aineita immunohistokemian ja läheisyyslinkkimäärityksen suorittamiseen. Tutkijat suorittavat nämä kokeet yhteistyössä patologin kanssa.

Kaikki yleisestä väestöstä rekrytoidut aiheet tunnistetaan yksilöllisellä koodilla. Numero- ja isot kirjaimet sijoitetaan kyselyyn ja näytetarroihin muodossa M0001 (M: kaupunki, numero 0001: henkilönumero 0001). Tiedot ladataan ja tallennetaan suojattuun tietokantaan. Tietokannan käsittelystä vastaa koulutettu henkilöstö. Tutkijat valvovat tietojen syöttöä. Tutkija valitsee satunnaisesti 2 %:n kyselyn vähintään kerran 6 kuukaudessa ja vertaa sitä tietokantaan ladattuihin tietoihin. Lisäksi tutkijat analysoivat ja raportoivat kaikki tutkimuksista kerätyt tiedot, vaikka ne olisivat epätäydellisiä, muuttamalla puutteellisten analyysiparametreja.

Tutkijat käyttävät kuvaavia tilastotyökaluja ryhmien kuvaamiseen (keskiarvo, keskihajonta ja keskivirhe tai mediaani ja kvartiiliväli). Ryhmävertailuissa käytetään paritonta T-testiä, Mann Whitneyn tai Fisherin testiä. ANOVA-, Kruskal Wallis- ja Chi Square -testi suoritetaan vertaamaan vertaamattomia ryhmiä; kahden muuttujan välisen yhteyden kvantifiointiin käytetään Pearsonin ja Spearmanin korrelaatiotestiä. Yksinkertaisten tai useiden regressioiden katsotaan ennustavan muuttujien arvoa. P-arvo <0,05 katsotaan merkitseväksi. Otos yleisestä väestöstä laskettiin ottaen huomioon 21–70-vuotiaat aikuiset Ecuadorissa.