依维莫司治疗转移性胰腺 NETs 患者的生物学前瞻性研究

• 背景:: 据报道，在无进展生存期(PFS) 改善方面，与安慰剂相比，依维莫司在良好/中度分化的胰腺NETs 中更有效。 然而，许多患者前期难治或在治疗几个月后变得耐药。 因此，检测一些有助于识别反应性肿瘤的生物学因素至关重要。 依维莫司是一种生物制剂，其作用机制可部分针对血管生成。 这可以在不同的层次上用不同的方法进行研究。 可以在肿瘤组织、肿瘤成像和外周血上研究活性/功效的前期和早期替代预测标志物。 与形态学成像相比，扩散 MRI 和血管生成循环标志物的肿瘤研究也可以作为反应标志物进行研究。

• 材料与方法 ：

  1. 循环内皮细胞 (CEC) 和循环内皮祖细胞 (CEP) 将通过流式细胞术进行。 用于搜索 CEC 和 CEP 的单克隆抗体包括：分化抗原簇 45 (CD45)、CD31、CD133、CD146、CD34、VEGFR-2、7-氨基放线菌素 D (7-AAD) 和 Syto1。 血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、VEGFR-2和血小板反应蛋白-1（TSP-1）也会在外周血中检测到。

  2. 将对肿瘤组织进行以下测定，包括：

     • 亚型 2 生长抑素受体，
     • 磷酸化AKT
     • 磷-mTOR
     • Phospho-4E-BP1
     • Phospho-p70-S6 激酶兔抗结节性硬化复合物 2 (TSC2) Cell Signaling Technology
     • 小鼠抗 PTEN Cell Signaling Technology
  3. 扩散加权成像 (DWI) 已被证明能够提供有关细胞密度和细胞外基质特性的信息，使用 DWI 计算的表观扩散系数 (ADC) 值可以作为细胞结构的标志。 鉴于肿瘤细胞构成主要由细胞增殖引起，ADC 值可以作为肿瘤细胞增殖的替代生物标志物。 ADC-磁共振成像 (MRI) 将在基线、治疗 1 个月后和治疗三个月后进行。
• 学习规划

基线、治疗 1 个月后、治疗三个月后和进展时：

• 腹部DWI-MRI
• CEC、CEP
• 循环 VEGF、VEGFR-2、bFGF、TSP-1

转移部位的基线活检和肿瘤进展时可能的新活检

生物学参数与临床结果的相关性（肿瘤反应和无进展生存期、实体瘤反应评估标准、RECIST 1.0 标准）

• 统计分析：这是一项关于某些生物学因素（其中包括 CEC、VEGF 和 bFGF）的潜在预测价值的探索性研究，这些预测价值表现为降低接受依维莫司治疗的晚期胰腺 NETs 患者的进展风险。

我们将使用双尾对数秩检验 (α = 0.05, 1-β = 0.20) 来检验以下假设：风险降低 30%（危险率；HR）等于 HR = 0.30 :

• ≥ 2.2/uL vs < 2.2/uL 基础或 CEC
• 自开始治疗两个月后 FGF 水平≤ 65.6 vs > 65.6 或
• ≤ 32.5 vs > 32.5 VEGF 水平在开始治疗两个月后计算样本量以补偿对数秩检验的功率损失假设平均和统一的对数秩检验退出 10% 并牢记阈值分别指 CEC、bFGF 和 VEGF 的第 25、75 和 50 个百分位分布。 考虑到每年 20 名患者的应计率、12 周的治疗期和 1 年的随访以及等于 43 名患者的样本量，该研究的总时长约为 3 年零 6 个月。