En biologisk prospektiv undersøgelse i patienter med metastaserende pancreas-net behandlet med Everolimus

• Baggrund:: Everolimus er blevet rapporteret at være effektiv sammenlignet med placebo i godt/moderat differentierede pancreas-NET med hensyn til progressionsfri overlevelse (PFS) forbedring. En række patienter er imidlertid refraktære på forhånd eller bliver resistente efter få måneders behandling. Derfor er det afgørende at opdage nogle biologiske faktorer, som kan hjælpe med at identificere de reagerende tumorer. Everolimus er et biologisk middel, og dets virkningsmekanisme kan være delvist rettet mod angiogenese. Dette kan studeres på forskellige niveauer og med forskellige metoder. Forudgående og tidlige surrogatprædiktive markører for aktivitet/effektivitet kan studeres på tumorvæv, på tumorbilleddannelse og på det perifere blod. Tumorundersøgelse med diffusions-MRI og angiogene cirkulerende markører kan også studeres som markører for respons sammenlignet med morfologisk billeddannelse.

• Materialer og metoder :

  1. Cirkulerende endotelceller (CEC'er) og cirkulerende endotelceller (CEP'er) vil blive udført ved flowcytometri. De monoklonale antistoffer, der anvendes til søgning efter CEC'er og CEP'er, omfatter: klynge af differentieringsantigen 45 (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-amino-actinomycin D (7-AAD) og Syto1. Vaskulær endotelvækstfaktor (VEGF), basal fibroblastvækstfaktor (bFGF), VEGFR-2 og thrombospondin-1 (TSP-1) vil også blive påvist på det perifere blod.

  2. På tumorvævet udføres følgende bestemmelser, herunder:

     • Subtype 2 somatostatinreceptor,
     • Phospho-AKT
     • Fosfo-mTOR
     • Phospho-4E-BP1
     • Phospho-p70-S6 kinase Kanin anti-tuberøs sklerose kompleks 2 (TSC2) cellesignalteknologi
     • Mus anti-PTEN Cell Signaling Technology
  3. Diffusionsvægtet billeddannelse (DWI) har vist sig at være i stand til at give information om den cellulære tæthed og egenskaber af den ekstracellulære matrix, og den tilsyneladende diffusionskoefficient (ADC) værdi beregnet ved hjælp af DWI kan tjene som en markør for cellularitet. I betragtning af at tumorcellularitet i vid udstrækning er bidraget af cellulær proliferation, kan ADC-værdien være en surrogatbiomarkør for tumorcelleproliferation. ADC-Magnetic Resonance Imaging (MRI) vil blive udført ved baseline, efter 1 måned og efter tre måneders behandling.
• Studere design

Baseline, efter 1 måneds behandling, efter tre måneders behandling og ved progression:

• Abdomen DWI-MRI
• CEC, CEP'er
• Cirkulerende VEGF, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Baseline biopsi af et metastatisk sted og muligvis en ny biopsi på tidspunktet for tumorprogression

Korrelation af biologiske parametre med klinisk resultat (tumorrespons og progressionsfri overlevelse, responsevalueringskriterier i solide tumorer, RECIST 1.0-kriterier)

• Statistisk analyse: Dette er en eksplorativ undersøgelse af den potentielle prædiktive værdi af nogle biologiske faktorer (CEC'er, VEGF og bFGF blandt dem) udtrykt i form af reduktion af risikoen for progression hos patienter med fremskredne pancreas-NET'er behandlet med Everolimus.

Vi vil bruge to-halet log-rank test (α = 0,05, 1-β = 0,20) til at teste hypotesen om 30 % reduktion i risiko (hazard rate; HR) svarende til HR = 0,30 for dem, der tilhører følgende lag :

• ≥ 2,2/uL vs < 2,2/uL for CEC ved basal eller
• ≤ 65,6 vs > 65,6 for FGF-niveauer efter to måneder efter start af behandling eller
• ≤ 32,5 vs > 32,5 for VEGF-niveauer efter to måneder efter start af behandling. Prøvestørrelsen beregnes for at kompensere for effekttabet i log-rank test under forudsætning af et gennemsnitligt og ensartet log-rank test drop-out på 10 % og under hensyntagen til at tærskelværdierne refererer til 25., 75. og 50. percentilfordelingen af ​​henholdsvis CEC, bFGF og VEGF. I betragtning af en optjeningsrate på 20 patienter/år, en behandlingsperiode på 12 uger med en opfølgning på 1 år og for en stikprøvestørrelse svarende til 43 patienter, vil undersøgelsen have en samlet længde på ca. 3 år og 6 måneder.