Биологическое проспективное исследование у пациентов с метастатическими НЭО поджелудочной железы, получавших эверолимус

• Исходные данные. Сообщалось, что эверолимус эффективен по сравнению с плацебо при хорошо/умеренно дифференцированных НЭО поджелудочной железы с точки зрения улучшения выживаемости без прогрессирования (ВБП). Тем не менее, некоторые пациенты изначально невосприимчивы или становятся резистентными через несколько месяцев терапии. Поэтому крайне важно обнаружить некоторые биологические факторы, которые могут помочь идентифицировать чувствительные опухоли. Эверолимус является биологическим агентом, и его механизм действия может быть частично направлен на ангиогенез. Это можно изучать на разных уровнях и разными методами. Предварительные и ранние суррогатные прогностические маркеры активности/эффективности можно изучать на опухолевой ткани, при визуализации опухоли и в периферической крови. Исследование опухоли с помощью диффузионной МРТ и ангиогенных циркулирующих маркеров можно изучать также как маркеры ответа по сравнению с морфологической визуализацией.

• Материал и методы:

  1. Циркулирующие эндотелиальные клетки (CEC) и циркулирующие эндотелиальные предшественники (CEP) будут выполняться с помощью проточной цитометрии. Моноклональные антитела, используемые для поиска ЦИК и ЦЕР, включают: кластер дифференцировочного антигена 45 (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-аминоактиномицин D (7-AAD) и Syto1. В периферической крови также будут обнаружены фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), основной фактор роста фибробластов (bFGF), VEGFR-2 и тромбоспондин-1 (TSP-1).

  2. На опухолевой ткани будут выполнены следующие определения, в том числе:

     • Рецептор соматостатина подтипа 2,
     • Фосфо-АКТ
     • Фосфо-мТОР
     • Фосфо-4E-BP1
     • Фосфо-p70-S6 киназа кролика против туберозного склероза комплекс 2 (TSC2) Cell Signaling Technology
     • Технология передачи сигналов мыши против PTEN Cell Signaling
  3. Было показано, что диффузионно-взвешенная визуализация (DWI) может предоставить информацию о клеточной плотности и свойствах внеклеточного матрикса, а значение кажущегося коэффициента диффузии (ADC), рассчитанное с использованием DWI, может служить маркером клеточности. Учитывая, что клеточность опухоли в значительной степени определяется клеточной пролиферацией, значение ADC может быть суррогатным биомаркером пролиферации опухолевых клеток. ADC-магнитно-резонансная томография (МРТ) будет проводиться на исходном уровне, через 1 месяц и через три месяца терапии.
• Дизайн исследования

Исходный уровень, через 1 месяц терапии, через три месяца терапии и при прогрессировании:

• ДВИ-МРТ брюшной полости
• ЦИК, КЭП
• Циркулирующие VEGF, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Исходная биопсия метастатического участка и, возможно, новая биопсия во время прогрессирования опухоли.

Корреляция биологических параметров с клиническим исходом (опухолевой ответ и выживаемость без прогрессирования, критерии оценки ответа при солидных опухолях, критерии RECIST 1.0)

• Статистический анализ. Это предварительное исследование потенциальной прогностической ценности некоторых биологических факторов (среди них CEC, VEGF и bFGF), выраженной в виде снижения риска прогрессирования у пациентов с распространенными НЭО поджелудочной железы, получавших эверолимус.

Мы будем использовать двусторонний логарифмический ранговый тест (α = 0,05, 1-β = 0,20), чтобы проверить гипотезу о снижении риска на 30% (уровень опасности; HR), равном HR = 0,30 для тех, кто принадлежит к следующим слоям. :

• ≥ 2,2/мкл по сравнению с < 2,2/мкл для ЦИК в базальном или
• ≤ 65,6 против > 65,6 для уровней FGF через два месяца после начала лечения или
• ≤ 32,5 по сравнению с > 32,5 для уровней VEGF через два месяца после начала лечения. что пороговые значения относятся к 25-му, 75-му и 50-му процентилю распределения CEC, bFGF и VEGF соответственно. Учитывая скорость набора 20 пациентов в год, период лечения 12 недель с последующим наблюдением в течение 1 года и размер выборки, равный 43 пациентам, общая продолжительность исследования составит около 3 лет и 6 месяцев.