En biologisk prospektiv studie på patienter med metastaserande pankreasnät som behandlats med Everolimus

• Bakgrund:: Everolimus har rapporterats vara effektiv jämfört med placebo i väl/måttligt differentierade pankreas-NET när det gäller progressionsfri överlevnad (PFS) förbättring. Ett antal patienter är dock refraktära i förväg eller blir resistenta efter några månaders behandling. Därför är det avgörande att upptäcka några biologiska faktorer som kan hjälpa till att identifiera de responsiva tumörerna. Everolimus är ett biologiskt medel och dess verkningsmekanism kan delvis riktas mot angiogenes. Detta kan studeras på olika nivåer och med olika metoder. Förut och tidiga surrogatprediktiva markörer för aktivitet/effekt kan studeras på tumörvävnad, på tumöravbildning och på det perifera blodet. Tumörstudier med diffusions-MRI och angiogena cirkulerande markörer kan också studeras som svarsmarkörer jämfört med morfologisk avbildning.

• Material och metoder :

  1. Cirkulerande endotelceller (CEC) och cirkulerande endotelceller (CEP) kommer att utföras med flödescytometri. De monoklonala antikropparna som används för sökning av CEC och CEP inkluderar: kluster av differentieringsantigen 45 (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-amino-aktinomycin D (7-AAD) och Syto1. Vaskulär endoteltillväxtfaktor (VEGF), grundläggande fibroblasttillväxtfaktor (bFGF), VEGFR-2 och trombospondin-1 (TSP-1) kommer också att detekteras på det perifera blodet.

  2. På tumörvävnaden kommer följande bestämningar att utföras, inklusive:

     • Subtyp 2 somatostatinreceptor,
     • Phospho-AKT
     • Fosfo-mTOR
     • Fosfo-4E-BP1
     • Fosfo-p70-S6 kinas Kanin anti-tuberös skleroskomplex 2 (TSC2) cellsignaleringsteknik
     • Mus anti-PTEN Cell Signaling Technology
  3. Diffusionsvägd avbildning (DWI) har visat sig kunna ge information om den cellulära densiteten och egenskaperna hos den extracellulära matrisen och det skenbara diffusionskoefficientvärdet (ADC) beräknat med hjälp av DWI kan fungera som en markör för cellularitet. Med tanke på att tumörcellularitet till stor del bidrar av cellulär proliferation, kan ADC-värdet vara en surrogatbiomarkör för tumörcellsproliferation. ADC-magnetisk resonanstomografi (MRT) kommer att utföras vid baslinjen, efter 1 månad och efter tre månaders behandling.
• Studera design

Baslinje, efter 1 månads behandling, efter tre månaders behandling och vid progression:

• Buken DWI-MRI
• CEC, CEPs
• Cirkulerande VEGF, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Baslinjebiopsi av ett metastatiskt ställe och möjligen en ny biopsi vid tidpunkten för tumörprogression

Korrelation av biologiska parametrar med kliniskt utfall (tumörsvar och progressionsfri överlevnad, Response Evaluation Criteria in Solid Tumors, RECIST 1.0-kriterier)

• Statistisk analys: Detta är en explorativ studie om det potentiella prediktiva värdet av vissa biologiska faktorer (CEC, VEGF och bFGF bland dem) uttryckt i termer av att minska risken för progression hos patienter med avancerade pankreatiska NET som behandlats med Everolimus.

Vi kommer att använda tvåsidigt log-rank test (α = 0,05, 1-β = 0,20) för att testa hypotesen om 30 % minskning av risken (riskfrekvens; HR) lika med HR = 0,30 för de som tillhör följande lager :

• ≥ 2,2/uL vs < 2,2/uL för CEC vid basal eller
• ≤ 65,6 vs > 65,6 för FGF-nivåer efter två månader efter påbörjad behandling eller
• ≤ 32,5 vs > 32,5 för VEGF-nivåer efter två månader efter påbörjad behandling. Provstorleken beräknas för att kompensera för effektförlusten för log-rank testet, med antagande av ett genomsnittligt och enhetligt log-rank testbortfall på 10 % och med hänsyn till detta att tröskelvärdena hänvisar till 25:e, 75:e och 50:e percentilfördelningarna av CEC, bFGF respektive VEGF. Med tanke på en ackumuleringshastighet på 20 patienter/år, en behandlingsperiod på 12 veckor med en uppföljning på 1 år och för en provstorlek lika med 43 patienter, kommer studien att ha en total längd på cirka 3 år och 6 månader.