Estudo Biológico Prospectivo em Pacientes com TNEs Pancreáticos Metastáticos Tratados com Everolimus

• Antecedentes: Foi relatado que everolimo é eficaz em comparação com placebo em TNEs pancreáticos bem/moderadamente diferenciados em termos de melhora da sobrevida livre de progressão (PFS). No entanto, vários pacientes são refratários no início ou tornam-se resistentes após alguns meses de terapia. Portanto, é crucial detectar alguns fatores biológicos que podem ajudar a identificar os tumores responsivos. O everolimus é um agente biológico e seu mecanismo de ação pode ser parcialmente direcionado para a angiogênese. Isso pode ser estudado em diferentes níveis e com diferentes métodos. Marcadores preditivos substitutos iniciais e iniciais de atividade/eficácia podem ser estudados no tecido tumoral, na imagem do tumor e no sangue periférico. O estudo do tumor com ressonância magnética por difusão e marcadores circulantes angiogênicos também podem ser estudados como marcadores de resposta em comparação com a imagem morfológica.

• Material e métodos :

  1. Células Endoteliais Circulantes (CECs) e Progenitores Endoteliais Circulantes (CEPs) serão realizados por citometria de fluxo. Os anticorpos monoclonais utilizados para a pesquisa de CECs e CEPs incluem: cluster de antígeno de diferenciação 45 (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-amino-actinomicina D (7-AAD) e Syto1. Fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), fator de crescimento básico de fibroblastos (bFGF), VEGFR-2 e trombospondina-1 (TSP-1) também serão detectados no sangue periférico.

  2. No tecido tumoral serão realizadas as seguintes determinações, incluindo:

     • receptor de somatostatina subtipo 2,
     • Fosfo-AKT
     • Fosfo-mTOR
     • Fosfo-4E-BP1
     • Fosfo-p70-S6 quinase Coelho anti-esclerose tuberosa complexa 2 (TSC2) Tecnologia de sinalização celular
     • Tecnologia de sinalização celular anti-PTEN de mouse
  3. A imagem ponderada por difusão (DWI) demonstrou ser capaz de fornecer informações sobre a densidade celular e as propriedades da matriz extracelular e o valor do coeficiente de difusão aparente (ADC) calculado usando DWI pode servir como um marcador de celularidade. Dado que a celularidade do tumor é amplamente contribuída pela proliferação celular, o valor ADC pode ser um biomarcador substituto para a proliferação de células tumorais. ADC-Ressonância Magnética (MRI) será realizada na linha de base, após 1 mês e após três meses de terapia.
• Design de estudo

Linha de base, após 1 mês de terapia, após três meses de terapia e na progressão:

• Abdômen DWI-MRI
• CEC, CEPs
• VEGF circulante, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Biópsia inicial de um local metastático e possivelmente uma nova biópsia no momento da progressão do tumor

Correlação de parâmetros biológicos com desfecho clínico (resposta tumoral e sobrevida livre de progressão, Critérios de Avaliação de Resposta em Tumores Sólidos, critérios RECIST 1.0)

• Análise estatística: Este é um estudo exploratório sobre o potencial valor preditivo de alguns fatores biológicos (CECs, VEGF e bFGF entre eles) expressos em termos de redução do risco de progressão em pacientes com TNEs pancreáticos avançados tratados com Everolimus.

Usaremos o teste log-rank bicaudal (α = 0,05, 1-β = 0,20) para testar a hipótese de 30% de redução do risco (hazard rate; HR) igual a HR = 0,30 para aqueles pertencentes às camadas seguintes :

• ≥ 2,2/uL vs < 2,2/uL para CEC no basal ou
• ≤ 65,6 vs > 65,6 para níveis de FGF após dois meses desde o início do tratamento ou
• ≤ 32,5 vs > 32,5 para níveis de VEGF após dois meses desde o início do tratamento O tamanho da amostra é calculado para compensar a perda de poder do teste de log-rank assumindo uma desistência média e uniforme do teste de log-rank de 10% e tendo em mente que os valores limiares se referem às distribuições dos percentis 25, 75 e 50 de CEC, bFGF e VEGF, respectivamente. Considerando uma taxa de inclusão de 20 pacientes/ano, um período de tratamento de 12 semanas com seguimento de 1 ano e para um tamanho amostral igual a 43 pacientes, o estudo terá uma duração total de cerca de 3 anos e 6 meses.