Biologinen tulevaisuustutkimus everolimuusilla hoidetuilla potilailla, joilla on metastasoituneita haimaverkkoja

• Taustaa:: Everolimuusin on raportoitu olevan tehokas verrattuna lumelääkkeeseen hyvin/kohtalaisesti erilaistuneissa haiman NET-verkoissa etenemisvapaan eloonjäämisen (PFS) paranemisen kannalta. Monet potilaat ovat kuitenkin tulenkestäviä etukäteen tai tulevat vastustuskykyisiksi muutaman kuukauden hoidon jälkeen. Siksi on ratkaisevan tärkeää havaita joitain biologisia tekijöitä, jotka voivat auttaa tunnistamaan reagoivat kasvaimet. Everolimuusi on biologinen aine ja sen vaikutusmekanismi voi olla osittain suunnattu angiogeneesiin. Tätä voidaan tutkia eri tasoilla ja eri menetelmillä. Aktiivisuuden/tehokkuuden ennakoivia ja varhaisia ​​korvikemarkkereita voidaan tutkia kasvainkudoksesta, kasvainkuvauksesta ja ääreisverestä. Kasvaintutkimusta diffuusio-MRI:llä ja angiogeenisillä verenkierron markkereilla voidaan tutkia myös vastemarkkereina verrattuna morfologiseen kuvantamiseen.

• Materiaali ja metodit :

  1. Circulating Endothelial Cells (CEC) ja Circulating endothelial progenitoris (CEPs) suoritetaan virtaussytometrialla. CEC:iden ja CEP:ien etsimiseen käytettyjä monoklonaalisia vasta-aineita ovat: erilaistumisantigeeniklusteri 45 (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-amino-aktinomysiini D (7-AAD) ja Syto1. Verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF), emäksinen fibroblastikasvutekijä (bFGF), VEGFR-2 ja trombospondiini-1 (TSP-1) havaitaan myös ääreisverestä.

  2. Kasvainkudokselle tehdään seuraavat määritykset, mukaan lukien:

     • Alatyyppi 2 somatostatiinireseptori,
     • Phospho-AKT
     • Phospho-mTOR
     • Fosfo-4E-BP1
     • Fospho-p70-S6 kinaasi Kanin tuberkuloosin vastainen skleroosikompleksi 2 (TSC2) -solusignaalitekniikka
     • Hiiren anti-PTEN-solusignaalitekniikka
  3. Diffuusiopainotetun kuvantamisen (DWI) on osoitettu pystyvän tarjoamaan tietoa solutiheydestä ja solunulkoisen matriisin ominaisuuksista, ja DWI:llä laskettu näennäisen diffuusiokertoimen (ADC) arvo voi toimia solujen markkerina. Ottaen huomioon, että solujen lisääntyminen myötävaikuttaa suurelta osin kasvaimen soluihin, ADC-arvo voi olla korvaava biomarkkeri kasvainsolujen lisääntymiselle. ADC-magneettikuvaus (MRI) suoritetaan lähtötilanteessa, yhden kuukauden ja kolmen kuukauden hoidon jälkeen.
• Opintojen suunnittelu

Lähtötaso 1 kuukauden hoidon jälkeen, kolmen kuukauden hoidon jälkeen ja etenemisen aikana:

• Vatsan DWI-MRI
• CEC, CEPs
• Kiertävä VEGF, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Metastaattisen paikan perusbiopsia ja mahdollisesti uusi biopsia kasvaimen etenemisen aikana

Biologisten parametrien korrelaatio kliinisen tuloksen kanssa (kasvainvaste ja etenemisvapaa eloonjääminen, vasteen arviointikriteerit kiinteissä kasvaimissa, RECIST 1.0 -kriteerit)

• Tilastollinen analyysi: Tämä on tutkiva tutkimus joidenkin biologisten tekijöiden (mukaan lukien CEC:t, VEGF ja bFGF) mahdollisesta ennustearvosta ilmaistuna etenemisriskin vähentämisenä potilailla, joilla on edennyt haiman NET ja joita hoidetaan Everolimuusilla.

Käytämme kaksisuuntaista log-rank-testiä (α = 0,05, 1-β = 0,20) testataksemme hypoteesin 30 prosentin riskin pienenemisestä (hazard rate; HR), joka vastaa HR = 0,30 seuraaviin kerroksiin kuuluville. :

• ≥ 2,2/uL vs < 2,2/ul CEC perus- tai
• ≤ 65,6 vs > 65,6 FGF-tasoilla kahden kuukauden kuluttua hoidon aloittamisesta tai
• ≤ 32,5 vs > 32,5 VEGF-tasoilla kahden kuukauden kuluttua hoidon aloittamisesta. Otoskoko on laskettu kompensoimaan log-rank-testin tehohäviö olettaen, että log-rank-testin pudotus on keskimäärin ja tasainen 10 % ja pitää mielessä että kynnysarvot viittaavat CEC:n, bFGF:n ja VEGF:n 25., 75. ja 50. prosenttipistejakaumiin, vastaavasti. Kun otetaan huomioon kertymäaste 20 potilasta/vuosi, 12 viikon hoitojakso 1 vuoden seurannalla ja 43 potilaan otoskoko, tutkimuksen kokonaiskesto on noin 3 vuotta ja 6 kuukautta.